- 携带单纯疱疹病毒tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建(英文)被引量：1
- 1997年
- 目的构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体．方法用ＳａｌＩ酶切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧｋｔｋ质粒中用ＢａｍＨＩ酶游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ｐＭＮＰｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７ＺＡＦＰｅ质粒中用ＥｃｏＲＩ酶游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮＰｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰｔｋ逆转录病毒载体．结果酶切鉴定ｐＭＮＰｔｋ和ｐＭＮＡＰｔｋ载体构建正确．结论该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义．
- 高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙
- 关键词：逆转录病毒科甲胎蛋白类基因疗法
- 逆转录病毒介导的肿瘤坏死因子肝癌特异性基因治疗实验研究被引量：9
- 1996年
- 为探讨肿瘤坏死因子基因对肝癌的治疗作用，分别构建ＳＶ４０早期启动子和白蛋白增强子／启动子调控小鼠肿瘤坏死因子基因的逆转录病毒载体ＭＮＳＴ和ＭＮＡＴ，以及ＳＶ４０早期启动子和人甲胎蛋白增强子／ＳＶ４０启动子调控的逆转录病毒载体ＬＴＳＮ和ＬＴＡＳＮ。构建物导入ＰＡ３１７细胞中包装成重组病毒，感染肿瘤细胞，证明白蛋白增强子／启动子和甲胎蛋白增强子均能使肿瘤坏死因子基因在肝癌细胞中高效特异表达。ＭＮＡＴ病毒和ＰＡ３１７／ＭＮＡＴ产病毒细胞ｉｎｖｉｖｏ法基因治疗有特异抗肝癌效果。提示组织特征蛋白“持家基因”转录调控序列在肿瘤组织特异性免疫基因治疗研究中有重要意义。
- 曹广文杜平杨文国孔宪涛戚中田
- 关键词：肝肿瘤肿瘤坏死因子基因疗法
- 携带HSV－tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建被引量：2
- 1996年
- 构建携带单纯疱疹病毒ｔｋ基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果：切除逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ内部的ＳＶ４０启动子使之成为ｐＭＮＭ；从真核表达载体ｐＢＰＧＫ－ｔｋ质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因（ｐｇｋ）启动子调控的ＨＳＶ－ｔｋ片段，克隆到ｐＭＮＭ的ＰＬ位点上，构建成普通型ＰＭＮｐ－ｔｋ逆转录病毒载体；从ｐＧＥＭ．７Ｚ－ＡＦＰｅ质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列，克隆到ｐＭＮｐ－ｔｋ的ｐｇｋ启动子上游，构建成人肝癌特异型ｐＭＮＡＰ－ｔｋ逆转录病毒载体。结论：该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。
- 高军曹广文戚中田仇小芳吴宗娣杜平杨文国崔龙
- 关键词：基因治疗逆转录病毒载体HSV-TK
- 细胞因子评述与临床应用
- 1999年
- 杜平杨文国
- 关键词：细胞因子
- 肿瘤坏死因子肝癌特异性重组载体的构建及其介导的肝癌特异性基因治疗的研究被引量：1
- 1996年
- 将小鼠肿瘤坏死因子(mTNF)cDNA克隆到逆转录病毒载体MNSM构建MNSM-SV40-mTNF,用小鼠白蛋白增强子/启动子Alb e/p元件置换MNSM-SV40-mTNF中SV40启动子构建成MNSM-Alb e/p-mTNF。构建物经脂质体转染法引入包装细胞PA137中制备重组病毒,在Polybrene存在条件下感染小鼠肿瘤细胞,经RNA和TNF活性分析证明Alb e/p可驱动TNF基因在合成白蛋白的小鼠肝癌细胞中特异转录和表达,转TNFα基因小鼠肝癌细胞体内致瘤性消失,体内特异抑制亲代肝癌生长。重组病毒及产病毒PA317于肝癌瘤体内显著抑制肝癌生长,特异地延长荷肝癌小鼠存活期。病理及免疫组化分析证实in situ基因治疗后,肝癌广泛坏死、出血并伴有大量Mac-11^+、CD_8^+和CD_(25)^+炎细胞浸润和纤维化。
- 曹广文杜平杨文国戚中田孔宪涛
- 关键词：肝肿瘤肿瘤坏死因子逆转录病毒载体基因治疗
- 中枢神经系统病毒感染干扰素检测及其意义被引量：2
- 1994年
- 采用微量细胞病变抑制法测定136例中枢神经系统病毒感染患者急性期与恢复期血液和脑脊液干扰素。结果急性期血液与脑脊液中分别有106例(77.9%)和97例(71.3%)测出干扰素活性,平均滴度为10.5IU/ml 和13.9IU/ml。急性期干扰素测出阳性率和滴度明显高于恢复期阳性率和滴度,且脑脊液干扰素滴度高于血液干扰素滴度(P<0.05)。不同病原感染机体干扰素阳性率和滴度存在差异。提示中枢神经系统疾病感染机体可产生干扰素,并在早期抵抗病毒感染中起重要作用。
- 张育才王岱明杨文国吴宗娣
- 关键词：干扰素病毒中枢神经系统儿童
- 小儿细菌性脑膜炎外周血和脑脊液中干扰素的检测被引量：2
- 1995年
- 小儿细菌性脑膜炎外周血和脑脊液中干扰素的检测上海医科大学儿科医院张育才，王岱明第二军医大学微生物学教研室杨文国，吴宗娣干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ，ＩＦＮ）是一类具有多种生物学活性的糖蛋白，并被认为是宿主对病毒感染最早应答反应的产物。近年来观察到非病...
- 张育才王岱明杨文国吴宗娣
- 关键词：脑膜炎细菌性脑膜炎干扰素外周血脑脊液
- 应用低浓度人脐血白细胞干扰素治疗慢性宫颈炎122例结果报道被引量：1
- 1990年
- 应用低浓度人脐血白细胞干扰素,以随机双盲对照法,对宫颈表面直接喷雾试治慢性宫颈麋烂122例,总有效率达91.8%,显效率以上达46.7%,与对照组相比有非常显著差异。根据作者的初步研究结果表明,宫颈糜烂的程度和类型与疗效有关。糜烂程度轻则治愈率高,3种类型的宫颈糜烂,以单纯型较易治,其显效率以上可达65.2%,其次是颗粒型(52.3%)。最难治的是乳突型(12.5%)。此外,本文还讨论了干扰素治疗慢性宫颈糜烂的机制问题。
- 范中善杜平杨文国邢春香汤淑萍韩九如潘海萍严亚新刘敏英刘壁如胡玉林范月妹汪菊芬
- 关键词：干扰素宫颈炎
- 细胞因子评述与临床应用被引量：1
- 1999年
- 何谓“细胞因子”?目前示尚无一个完整、公证的定义。为便于讨论,这里不妨提出一个“基本含义”的概念。所谓细胞因子(ｃｙｔｏｋｉｎｅ,ＣＫ),系指“体细胞”所产生的几群高活性、多功能的诱生蛋白。这里所说的体细胞主要指人和动物的体细胞,而非其它生物体细胞。ＣＫ的?..
- 杜平杨文国
- 关键词：细胞因子肿瘤
- 肝癌组织特异性小鼠IL─3、TNF逆转录病毒载体的构建及在肝癌细胞中的表达被引量：6
- 1995年
- 从ｐＳＶ２３ＳＭＴＮＦ和ｐＳＰＭｏＩＬ─３质粒分别切下小鼠肿瘤坏死因子（ｍＴＮＦ）和小鼠白细胞介素３（ｍＩＬ─３）ｃＤＮＡ，并切除ｍＩＬ─３ｃＤＮＡ３＇端ＡＴＴＴＡＴＴＴＡ不稳定序列，以两种细胞因子ｃＤＮＡ作为目的基因，分别克隆到逆转录病毒载体ｐＭＮＳＭ多克隆位点，再于目的基因上游分别插入小鼠白蛋白启动子增强子序列（Ａｌｂｅ／ｐ），构建成功两种肝癌组织特异表达性细胞因子逆转录病毒载体，经磷酸钙共沉淀法导入包装细胞ｐＡ３１７中包装成重组病毒颗粒，并测转染率。经ＮＩＨ／３Ｔ３细胞测定重组病毒Ｎｅｃ抗性感染率后，在８μｇ／ｍｌＰｏｌｙｂｒｅｎｅ存在下感染肿瘤细胞，经４００μｇ／ｍｌ活性Ｇ４１８选择后测转基因肿瘤细胞培养上清中表达相应细胞因子，证明ｍＩＬ─２、ｍＩＬ─３特异地在表达白蛋白的小鼠肝癌细胞中表达（Ｐ＜０．００１）。
- 曹广文杜平杨文国吴清璇戚中田孔宪涛
- 关键词：白细胞介素
