杨文静
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 二硫键氧化还原酶类似蛋白的研究进展被引量：1
- 2014年
- 二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)是一个最近发现的与脂联素相互作用的关键蛋白,它具有明显上调高相对分子质量脂联素水平及增强胰岛素敏感性的重要功能。DsbA-L水平与肥胖症以及内质网应激呈负相关,并能缓解由内质网应激诱导的脂联素水平下降。因此,DsbA-L是一个具有广泛前途的药物新靶点,而有效地调节DsbA-L的表达可能为治疗各种代谢疾病提供一个新的途径。
- 杨文静胡文秀方启晨
- 关键词：脂联素内质网应激肥胖
- 小鼠DsbA-L基因的转录调控机制研究
- 第一部分鉴定调控小鼠DsbA-L基因表达的转录因子 目的: 二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)是近年发现的一种与脂联素多聚体形成有关的重要调节蛋白,它具有显著上调高分子量脂联素水平及增强胰岛素敏感性的作用,并且...
- 杨文静
- 关键词：白藜芦醇转录因子肥胖
- 文献传递
- 小鼠谷胱甘肽S转移酶K1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:构建小鼠谷胱甘肽S转移酶K1(mGSTK1)启动子荧光素酶报告基因质粒,并分析其活性。方法:根据GeneBank中mGSTK1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增mGSTK1启动子片段,插入pGL3-basic载体,获得mGSTK1启动子报告基因质粒pGL3-mGSTK1-2046。再以pGL3-mGSTK1-2046为模板,进一步构建了2个5’端部分缺失的报告基因质粒:pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76。将构建的报告基因质粒瞬时转染不同的细胞株3T3-L1和人胚肾(HEK)293,48 h后检测荧光素酶的活性。结果:所构建的质粒经酶切、测序鉴定正确。pGL3-mGSTK1-2046在3T3-L1和HEK293中均有不同程度的转录活性。将pGL3-mGSTK1-2046、pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76转染HEK293细胞,结果显示pGL3-mGSTK1-936转录活性最高,而pGL3-mGSTK1-76转录活性显著降低。结论:成功构建mGSTK1启动子荧光素酶报告基因质粒;翻译起始点上游的-971～-111 bp片段是mGSTK1启动子的重要区域。为深入了解mGSTK1启动子的调控机制以及今后对代谢性疾病的治疗提供一定的实验基础。
- 胡文秀方启晨董坤宋倩倩姜杉杨文静贾伟平
- 关键词：启动子荧光素酶报告基因
- 白藜芦醇在调控二硫键氧化还原酶类似蛋白基因表达中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨白藜芦醇对二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)基因转录的影响。方法将25μmol/L白藜芦醇加入HepG2细胞和3T3-L1细胞,干预24h后收获细胞,用于后续实验提取RNA和蛋白;以二甲基亚砜(DMSO)处理组作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测3T3-L1细胞和HepG2细胞DsbA-L mRNA和蛋白表达水平。以荧光素酶报告基因实验分析白藜芦醇对DsbA-L基因启动子活性的影响。采用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测白藜芦醇对转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子1区域Sp1结合位点的结合能力的影响。采用Western印迹法检测Sp1蛋白表达水平。结果在3T3-L1细胞和HepG2细胞中,白藜芦醇处理组DsbA-L蛋白和DsbA-L mRNA的表达水平均显著高于DMSO对照组(P值均<0.05)。白藜芦醇处理组的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc的相对荧光素酶活性显著高于DMSO对照组(P<0.05);与包含该Sp1结合位点的DsbA-L基因启动子报告基因质粒p(-186to+432)Luc相比,不包含该Sp1结合位点的两个报告基因质粒,Sp1位点缺失突变的p(-186to+432)Luc mut和3’端部分缺失的p(-186to+391)Luc在白藜芦醇干预后的相对荧光素酶活性与DMSO对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与DMSO对照组相比,白藜芦醇处理后转录因子Sp1与DsbA-L基因内含子区DNA特异结合形成的DNA-Sp1复合物的条带灰度减弱。白藜芦醇处理后3T3-L1细胞和HepG2细胞中Sp1的蛋白表达均显著低于DMSO对照组(P值均<0.05)。结论白藜芦醇通过抑制Sp1表达,上调DsbA-L基因的转录,从而促进DsbA-L蛋白的表达。
- 杨文静方启晨张菁任伟宋倩倩贾伟平
- 关键词：白藜芦醇启动子SP1
