董坤
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：上海市糖尿病研究所更多>>
- 发文基金：上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠谷胱甘肽S转移酶K1启动子荧光素酶报告基因的构建及功能鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:构建小鼠谷胱甘肽S转移酶K1(mGSTK1)启动子荧光素酶报告基因质粒,并分析其活性。方法:根据GeneBank中mGSTK1基因序列设计引物,应用PCR技术扩增mGSTK1启动子片段,插入pGL3-basic载体,获得mGSTK1启动子报告基因质粒pGL3-mGSTK1-2046。再以pGL3-mGSTK1-2046为模板,进一步构建了2个5’端部分缺失的报告基因质粒:pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76。将构建的报告基因质粒瞬时转染不同的细胞株3T3-L1和人胚肾(HEK)293,48 h后检测荧光素酶的活性。结果:所构建的质粒经酶切、测序鉴定正确。pGL3-mGSTK1-2046在3T3-L1和HEK293中均有不同程度的转录活性。将pGL3-mGSTK1-2046、pGL3-mGSTK1-936和pGL3-mGSTK1-76转染HEK293细胞,结果显示pGL3-mGSTK1-936转录活性最高,而pGL3-mGSTK1-76转录活性显著降低。结论:成功构建mGSTK1启动子荧光素酶报告基因质粒;翻译起始点上游的-971～-111 bp片段是mGSTK1启动子的重要区域。为深入了解mGSTK1启动子的调控机制以及今后对代谢性疾病的治疗提供一定的实验基础。
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- 关键词：启动子荧光素酶报告基因
- 罗格列酮对小鼠脂肪组织DsbA-L转录水平的影响
- 宋倩倩胡文秀董坤方启晨贾伟平
- 罗格列酮对小鼠脂肪组织DsbA-L转录水平的影响
- 目的近来有研究表明二硫键氧化还原酶类似蛋白(DsbA-L)是一种与脂联素多聚体形成有关的重要调节蛋白,本研究旨在观察罗格列酮对小鼠脂肪组织DsbA-L转录水平的影响,并初步分析过氧化物酶增殖体激活受体-y(PPAR-y)...
- 宋倩倩胡文秀董坤方启晨贾伟平
- 文献传递
