毛绮妍
- 作品数：4 被引量：36H指数：3
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 葛根素对培养的晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）对培养的兔晶状体上皮细胞（LEC）造成的影响以及葛根素（Pur）的对抗作用。方法为实验研究。原代培养兔LEC，将其第3或第4代用作实验。实验分为：（1）对照组：加入无热源生理盐水200μl。（2）ONOO^-组：加入ONOO^-200μl使之终浓度为0．5mmol／L。（3）Pur组：同时加入5μg／ml ONOO^-和10μg／ml的Pur。各组加入试剂总容积为200μl，继续培养24h。收集细胞分别用免疫荧光技术检测ONOO^-的标记物硝基酪氨酸（NT）在LEC中的抗原表达变化；免疫印迹法检测晶状体组织中NT蛋白表达变化；光学显微镜观察细胞形态；基因组DNA电泳、流式细胞仪和Fas／FasL免疫组织化学染色检测细胞凋亡。采用单因素方差分析和q检验对数据进行分析。结果实验6～24h期间，对照组LEC呈现绿色荧光；ONOO^-组：LEC颜色逐渐由黄绿色转变为橘黄色荧光；Pur组LEC颜色逐渐由淡绿色转变为淡黄色和淡黄绿色荧光；对照组NT蛋白质表达极微弱；ONOO^-组：实验各期均有NT蛋白质表达，且呈由弱到强的趋势（A值为77．22±2．44，145．00±3．94，235．78±5．97）。Pur组实验6h表达微弱（A值为72．78±2．64），12h表达增强（A值为84．94±3．01），但至24h表达强度减弱（A值为74．44±3．00）；计算机图像分析表明，实验6、12及24h，3组NT蛋白质平均表达水平比较，差异有统计学意义。对照组细胞形态和基因组DNA电泳正常，流式细胞仪检查可见极轻微凋亡，但细胞膜和细胞浆均未见Fas／Fas L的表达；ONOO^-组出现了明显的细胞形态改变，基因组DNA电泳可见典型的“梯形条带”，随时间延长细胞凋亡逐渐加重（q=78．12，82．76，69．98，P〈0．01）并可见Fas／Fas L的表达；而Pur组细胞形态、基因组DNA电泳以及流式细胞仪检查大致正常，未见Fas／Fas L的表达。结论葛根素可减轻ONOO^
- 郝丽娜何守志罗秀梅马清敏毛绮妍凌亦凌
- 关键词：晶体上皮细胞葛根素细胞
- 糖尿病大鼠白内障形成中的基因表达及生化变化被引量：13
- 2005年
- 目的研究糖尿病大鼠白内障形成过程中晶状体上皮细胞(LEC)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的变化及生化改变。方法用链脲佐菌素(STZ)45mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠白内障动物模型后分为对照组、STZ组和治疗组(应用葛根素腹腔注射)。分别于实验第20、40、60d时取材,采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术及生化方法观察糖尿病大鼠LECiNOSmRNA表达的变化及其对一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)生成的影响。结果糖尿病大鼠白内障形成过程中iNOSmRNA表达变化并伴有NO和NOS生成增加。对应用葛根素的糖尿病大鼠观察表明,实验后期iNOSmRNA的表达明显减弱,伴有NO和NOS活性明显下降。结论iNOS诱生并大量增加是过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在糖尿病大鼠LEC中产生的重要基础。ONOO-参与糖尿病大鼠晶状体氧化而发生白内障。葛根素通过对抗ONOO-对糖尿病大鼠LEC的氧化作用而间接调控iNOS基因的表达。
- 郝丽娜毛绮妍凌亦凌何守志
- 关键词：白内障晶状体诱导型一氧化氮合酶过氧亚硝基阴离子葛根素
- 葛根素减轻部分由过氧亚硝基阴离子导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡(英文)被引量：20
- 2006年
- 本研究观察葛根素是否减轻部分由过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite，ONOO^-）导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞（lens epithelium cell，LEC）凋亡。采用大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）的方法建立糖尿病动物模型。36只大鼠作为对照组，腹腔注射生理盐水；其他72只大鼠腹腔注射STZ（45mg/kg）后分为STZ组和STZ＋葛根素组，每组36只。STZ注射3d后，STZ＋葛根素组大鼠每天腹腔注射葛根素（140mg／kg）。于实验开始后第20、40和60天用裂隙灯检查晶状体的形态学变化后处死动物。用流式细胞仪检测LEC凋亡，用免疫组化方法检测晶状体中ONOO^-的标志物——硝基酪氨酸（nitrotyrosine，NT）的表达，用基因芯片分析技术检测LEC凋亡相关基因iNOS等的表达。结果发现，对照组大鼠晶状体均透明，各项指标基本正常；STZ组大鼠第20天时即出现晶状体混浊，40-60d期间混浊不断加重；STZ＋葛根素组大鼠20-40d时晶状体混浊呈加重趋势，但40-60d以后明显减轻。对照组LEC轻度凋亡，而STZ组凋亡细胞呈持续性增长，STZ＋葛根素组大鼠20-40d时细胞凋亡呈增长趋势，但40-60d以后明显下降。对照组大鼠晶状体NT未见明显表达；STZ组大鼠NT表达明显加强；STZ＋葛根素组大鼠20-40d时NT表达呈增长趋势，但40-60d以后明显下降。对照组凋亡相关基因未见明显变化，STZ组凋亡相关基因iNOS表达明显上调。其他凋亡相关基因如BCL-2、SOD表达明显下调，但NF-κB和TNFR1-FADD-caspase信号转导途径明显上调；STZ＋葛根素组凋亡相关基因表达则呈相反改变。上述结果表明，在糖尿病大鼠晶状体中有ONOO^-的标志物NT表达，证明糖尿病大鼠LEC凋亡部分由ONOO^-诱导，这可能是氧化损伤导致白内障形成的新途径。葛根素能够部分逆转ONOO^-对LEC的致凋亡作用，提示葛根素可能是治疗糖尿病性白内障的有效药物，
- 郝丽娜凌毅群罗秀梅毛宇湘毛绮妍何守志凌亦凌
- 关键词：葛根素晶状体上皮细胞糖尿病白内障
- 过氧亚硝基阴离子在大鼠糖尿病性白内障形成中的作用及葛根素的对抗作用被引量：8
- 2004年
- 目的 探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO-)在糖尿病大鼠白内障形成中的作用 ,以及葛根素的对抗作用。方法 将 72只健康无热原Sprague Dawley(SD)雄性大鼠均分为对照组、链脲佐菌素(STZ)组及治疗组 ,使用STZ制作STZ组和治疗组大鼠糖尿病模型 ,治疗组大鼠腹腔注射葛根素。分别于实验 2 0、4 0及 6 0d检查大鼠的全身情况和晶状体形态 ;光镜下观察晶状体上皮细胞 (LEC)的形态 ;同时使用流式细胞仪检测LEC中凋亡细胞的数量和百分率 ,以及ONOO-标志物———硝基酪氨酸(NT)阳性细胞的荧光强度和数量 ;采用免疫印迹法检测NT蛋白质在晶状体中的表达。结果 实验2 0、4 0及 6 0d ,对照组大鼠晶状体均透明 ,治疗组大鼠晶状体仅轻度混浊 ,STZ组晶状体混浊明显且逐渐加重 ;光镜下LEC形态对照组无改变 ,治疗组仅轻度改变 ,STZ组明显改变。实验 2 0、4 0及 6 0d ,凋亡细胞数量和百分率治疗组和STZ组与对照组比较 ,治疗组与STZ组比较 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 ) ;NT阳性细胞的荧光强度和数量治疗组和STZ组与对照组比较 ,治疗组与STZ组比较 ,差异均有显著意义 (P <0 0 5 ) ;治疗组和STZ组LEC凋亡情况的变化趋势与NT阳性细胞的荧光强度和数量的改变情况基本相同。各组均可见NT蛋白质表达 ;实验 2 0、4 0及 6 0d ,NT蛋白?
- 郝丽娜凌亦凌何守志毛绮妍梁俊清
- 关键词：过氧亚硝基阴离子糖尿病白内障葛根素腹腔注射
