毛雄英
- 作品数：11 被引量：11H指数：2
- 供职机构：宁波大学医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 变性高效液相色谱(DHPLC)在寡核苷酸引物质量控制中的应用
- 寡核苷酸的纯化和质量控制对分子生物学实验工作影响很大。引物化学合成常用的纯化方法有聚丙烯酰铵凝胶电泳(PAGE)法、高效液相层析(HPLC)法和寡核苷酸纯化柱(OPC)法等。一般认为OPC柱法的优点是快速、简易;但是其专...
- 毛雄英沈广宇陈辉
- 文献传递
- 宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因检测被引量：1
- 2012年
- 目的了解近年宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中质粒AmpC酶基因流行状态。方法用K-B法对临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作耐药表型分析,通过聚合酶链反应(PCR)检测AmpC酶基因,然后用三维试验予以证实。结果 140株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,质粒AmpC酶基因阳性率2009、2010、2011年分别为4.4%(2/45)、8.6%(3/35)、13.3%(8/60);其中2009和2010年所检出的均为DHA基因型,2011年分别从2株大肠埃希菌和1株肺炎克雷伯菌中检出ACT-1基因。结论宁波地区临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶基因的流行率有增长趋势。
- 顾欣毛雄英王卫华汪丽吕婉飞
- 关键词：埃希菌属质粒头孢菌素酶基因
- 模板提取方法对HBV DNA实时荧光定量PCR检测的影响
- 2010年
- 目的:研究模板纯化与否对血浆HBV DNA实时荧光定量PCR检测线性范围、重复性、灵敏度的影响。方法:采用国产离心柱法DNA纯化试剂盒及实时定量PCR试剂盒提供的直接煮沸裂解法处理107～10110倍浓度梯度稀释的血浆样本和标准品及乙肝窗口期患者的血清标本,用国产HBV PCR荧光定量扩增试剂盒检测,比较其检测结果线性范围、重复性、灵敏度及乙肝窗口期患者HBV DNA阳性检出率。结果:离心柱纯化组和煮沸裂解组的检测线性范围分别为107IU/ml～101IU/ml和107IU/ml～103IU/ml;灵敏度分别为24 IU/ml～48 IU/ml和1200 IU/ml～2400 IU/ml;104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml样品的批内变异系数(CV)离心柱纯化组为2.5%、2.3%、1.8%,煮沸裂解组为1.9%、1.6%、12%,批间变异系数(CV)离心柱纯化组为2.3%、2.9%、5.4%,煮沸裂解组为1.7%、4.5%、7.7%;离心柱纯化组和煮沸裂解组的窗口期患者血清标本阳性检出率分别为83.9%和3.6%。结论:HBV血清样品经离心柱纯化可以极大地改善乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测结果。
- 毛雄英王卫华王德扬陈辉
- 关键词：乙型肝炎病毒实时荧光定量PCR
- 宁波地区阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因研究及一种新型ACT-1基因的初步发现
- 阴沟肠杆菌是肠道正常菌丛的成员,在环境中广泛存在,近年来逐步成为医院获得性感染的重要菌种;另据报道,越来越多的阴沟肠杆菌临床分离株携带有质粒AmpC酶耐药基因,且可在细菌间快速水平传播,对控制细菌感染构成极大挑战,而目前...
- 王卫华陈洁毛雄英许小敏黄志刚孙珺汪丽吕婉飞
- 文献传递
- 宁波地区阴沟肠杆菌质粒型AmpC酶基因研究及一种新型ACT-1基因的初步发现
- 阴沟肠杆菌是肠道正常菌丛的成员，在环境中广泛存在，近年来逐步成为医院获得性感染的重要菌种;另据报道，越来越多的阴沟肠杆菌临床分离株携带有质粒AmpC 酶耐药基因，且可在细菌间快速水平传播，对控制细菌感染构成极大挑战，而目...
- 王卫华陈洁毛雄英许小敏黄志刚孙汪丽吕婉飞
- 关键词：阴沟肠杆菌质粒型AMPC酶
- 文献传递
- 引物延伸/变性高效液相色谱检测HBV拉米夫定耐药突变被引量：5
- 2010年
- 目的建立引物延伸/变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测HBV拉米夫定耐药突变的方法。方法本法只需单条引物一次延伸反应便可检测野生株YMDD型、突变株YIDD和YVDD型。其中,突变株YVDD型被延伸1个碱基(G),突变株YIDD型被延伸4个碱基(ATTG/ATCG),野生株YMDD型被延伸3个碱基(ATG),延伸产物用DHPLC检测长度;构建野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型质粒,对方法进行检验;用商品试剂和临床标本对方法进行验证。结果野生株YMDD型、突变株YIDD型和YVDD型克隆质粒验证结果完全符合;临床56例标本的检测结果与商品化试剂(熔解曲线法)结果完全符合。结论引物延伸/DHPLC检测HBV基因拉米夫定耐药突变是一个高特异性、高可靠性的方法。
- 毛雄英王卫华沈广宇张建英陈辉
- 关键词：变性高效液相色谱突变检测拉米夫定耐药
- 非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测HBVP区rt204位点耐药突变
- 目的建立一种基于非标记探针高分辨率熔解曲线技术(HMR)检测HBV P区rt204位点耐药突变的方法。方法构建野生株rt204M、突变株rt204I和突变株rt204V的质粒,设计、优化探针。利用质粒作为标准品建立HRM...
- 毛雄英陈洁王卫华陈辉
- 文献传递
- 泛耐药鲍曼不动杆菌获得性耐药基因、可移动遗传元件检测及指标聚类分析被引量：3
- 2012年
- 目的调查泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-ABA)获得性耐药基因、可移动遗传元件携带情况,探讨获得性耐药基因与可移动遗传元件的相关性。方法收集临床样本中分离的20株PDR-ABA,采用PCR法检测54种水平转移获得性耐药基因(与β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关)以及12种可移动遗传元件(接合性质粒、转座子、插入序列、整合子等)遗传标记,并对检测结果进行指标聚类分析以探讨本组PDR-ABA菌株获得性耐药基因与可移动遗传元件的相关性。结果本组PDR-ABA菌株中TEM-1、ADC-30、OXA-23等3种β-内酰胺酶类药物耐药基因呈阳性,前二者检出率均为100%,后者为65%;提示本组PDR-ABA菌株β-内酰胺类耐药表型与这3种β-内酰胺酶相关;检出aac(3)-Ⅰ、aac(6’)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、aph(3’)-Ⅰ等4种氨基糖苷类修饰酶基因,16SrRNA甲基化酶基因无检出;提示本组PDR-ABA菌株氨基糖苷类耐药表型主要与产氨基糖苷类修饰酶相关。指标聚类分析可见TEM-1、ADC-30等2种β-内酰胺酶基因,aac(6’)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ等2种氨基糖苷类修饰酶基因,abeB和qacE△1外排泵基因与intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、ISaba1等可移动遗传元件遗传标记高度相关。结论临床分离的PDR-ABA可携带多种获得性耐药基因、可移动遗传元件,两者之间高度相关。
- 王卫华陈洁毛雄英毛雄英汪丽吕婉飞
- 关键词：鲍曼不动杆菌泛耐药
- ICU耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌同源性研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨重症监护病房(ICU)耐碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌(CRAB)之间的同源性,并了解是否存在耐药菌株的克隆流行。方法收集宁波大学附属医院ICU 2010年2月至2011年5月分离到的CRAB 40株,常规药敏试验采用K-B法。用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析其耐药株的同源性。结果阿米卡星的敏感率最高为100%,其次米诺环素敏感率为50%;PFGE结果显示,40株CRAB菌株分为A、B、C三型,A型22株,主要分离时段为2010年2月～3月(16株)和2011年1月-2011年2月(6株);B型16株,主要分离时段为2010年5月-6月(16株),C型为C1亚型和C2亚型各1株为散发型。结论调查期间CRAB主要的PFGE基因型为A型和B型菌株克隆流行,流行相关的克隆株可在病区长期生存,从而引起病区持续感染,需要积极采取感染控制措施;同时不同时段主要流行株由克隆株A变为克隆株B,推测同一个病区的流行基因型可能存在流行变迁。
- 吕婉飞汪丽毛雄英马红映陈巧巧
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯类耐药脉冲场凝胶电泳同源性
- PCR热循环模式的一个重要改进—慢退火PCR
- 虽然PCR技术被广泛地研究和使用,但是一个影响扩增效率和特异性的重要因素—退火速度却被人们长期忽视了。在本文中我们建立了一种新的PCR热循环模式:慢退火PCR(SA-PCR)。典型的SA-PCR的一个热循环过程如下:94...
- 陈辉沈广宇毛雄英
- 文献传递
