牛振东
- 作品数：9 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法
- 本发明公开了一种快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法。该快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法基于以酸性α-淀粉酶的编码基因作为筛选标记基因。本发明还公开了以所述酸性α-淀粉酶的编码基因作为筛选标记基因的载体。本发明的快速筛选...
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- 文献传递
- 汉逊酵母(Hansenula polymorpha)表达系统工业化生产技术平台
- 汉逊酵母,又名多形汉逊,是一种特殊的甲醇营养型酵母,该宿主构建的系统可利用强诱导型的启动子如FMD,MOX,GAP等,表达的异源蛋白可实现糖基化修饰,可利用完全合成培养基进行高密度发酵,其遗传背景较为清楚,安全又高效的性...
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- 文献传递
- 一种透明颤菌血红蛋白基因及其应用
- 本发明公开了一种透明颤菌血红蛋白基因及其应用。该基因，具有下述核苷酸序列之一：1)序列表中序列1的DNA序列；2)与序列表中序列1的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；3)在高严谨条件下可与...
- 邱并生牛振东
- 文献传递
- 木薯醇腈酶在枯草芽孢杆菌中的表达及活性检测
- 2009年
- 醇腈酶(α-hydroxynitrile lyase,HNL)能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。以含有木薯醇腈酶基因的重组质粒pET28a-HNL为模板,应用PCR扩增得到HNL基因,将其连接到pMD18-T载体中进行测序分析,然后通过Nde I和Xba I2个酶切位点将其连接到枯草芽孢杆菌表达载体pMA5Z2中,获得了含有HNL基因的重组质粒pMA5Z2-HNL,转化蛋白质三缺陷的枯草芽孢杆菌DB1342。SDS-PAGE显示HNL在枯草芽孢杆菌DB1342中获得表达,产物分泌到细胞外,每毫升发酵液中获得了2.108 U的醇腈酶。
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- 关键词：枯草芽孢杆菌分泌表达活性
- 一种重组酵母菌及其制备方法
- 本发明公开了一种重组酵母菌及其制备方法。该方法包括如下步骤：(1)将表达载体I转入宿主酵母菌中，得到转入所述表达载体I的重组酵母菌，记作酵母菌A；(2)将表达载体II转入所述酵母菌A中，得到转入所述表达载体I和所述表达载...
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- 文献传递
- 一种重组酵母菌及其制备方法
- 本发明公开了一种重组酵母菌及其制备方法。该方法包括如下步骤：(1)将表达载体I转入宿主酵母菌中，得到转入所述表达载体I的重组酵母菌，记作酵母菌A；(2)将表达载体II转入所述酵母菌A中，得到转入所述表达载体I和所述表达载...
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- 一种透明颤菌血红蛋白基因及其应用
- 本发明公开了一种透明颤菌血红蛋白基因及其应用。该基因的核苷酸序列如SEQID NO：1所示。含有本发明的透明颤菌血红蛋白基因的多形汉逊酵母工程菌，在贫氧情况下能够正常生长和表达目的基因的，提高了氧的利用率，避免在发酵过程...
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- 文献传递
- 快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法
- 本发明公开了一种快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法。该快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法基于以酸性α-淀粉酶的编码基因作为筛选标记基因。本发明还公开了以所述酸性α-淀粉酶的编码基因作为筛选标记基因的载体。本发明的快速筛选...
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- 中国木薯醇腈酶在汉逊酵母中的表达被引量：1
- 2009年
- α-醇腈酶(α-hydroxynitrilelyase,HNL)是手性醇腈化合物生物合成十分有用的工具,能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。应用PCR扩增得到HNL基因,连接到pMD18-T中进行测序,然后通过EcoRⅠ和NotⅠ将其连接到汉逊酵母表达载体pHMOXGαA中。通过在含有4mg/mL的G418的YPD培养基上进行筛选获得阳性重组子,用0.5%的甲醇诱导96h。酶活测定和SDS-PAGE分析显示HNL在汉逊酵母NCYC495(leu1.1)中得到正确表达,每毫升发酵液中获得2.015U的醇腈酶。
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- 关键词：汉逊酵母RDNA
