王平
- 作品数：11 被引量：31H指数：3
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- 在大肠杆菌中利用反义RNA抑制乙肝病毒（HBV）X基因的表达
- 1995年
- 将乙肝病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ株完整的Ｘ基因正向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２１的ＰＬ启动子下游，得到能表达Ｘ蛋白的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＶ（＋）；同时将Ｘ基因反向重组到原核表达质粒ｐＢＶ－２２０的ＰＬ启动子下游，得到能转录Ｘ基因反义ＲＮＡ的重组质粒ｐＢＶ－ＨＢＸ（－）．利用这两个质粒，构建出能同时转录Ｘ基因ｍＲＮＡ和反义ＲＮＡ的重组质粒ＰＥＸ．ＡＮ－ＨＢＸ，并在原核水平上，证实了反义ＲＮＡ对Ｘ基因的表达具有明显的抑制作用，从而为在真核水平上利用反义ＲＮＡ对Ｘ基因进行调控的研究提供了有利的基础．
- 杨建琪张锡元李文鑫张晓刚王平
- 关键词：RNAHBVX基因大肠杆菌
- 核酶Ripc对HBV基因体外转录物的作用被引量：15
- 1993年
- 核酶是新发现的一类基因调控RNA,它可以序列特异性地催化切割靶RNA。实际上,核酶是一种具有酶的特性的RNA分子。核酶主要是通过与靶RNA配对、切割而使其失去生物功能。由于核酶是在RNA水平上进行作用,有严格的序列特异性,长期使用对细胞无副作用,并且结构简单,可人工设计,因此很有希望用于基因治疗。目前,核酶已发展成为一门分子生物学技术,正被广泛地研究。
- 王平徐炜曾力宇孙晓梅童葵塘侯云德
- 关键词：核酶乙型肝炎病毒
- 人NAP-1/IL-8基因的合成及在大肠杆菌中的表达
- 1992年
- 人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8(NAP-1/IL-8),主要由单核细胞产生并具有嗜中性白细胞趋化活性及嗜中性白细胞活化活性的一种新的细胞因子.它在抗感染免疫(尤其是抗菌免疫及抗真菌免疫)、肿瘤免疫及炎症反应中的重要作用,以及作为蛋白质佐剂或作为导向药物的向导分子的应用前景,日益受到重视.有关重组NAP-1/IL-8在大肠杆菌系统的表达,以及以重组NAP-1IL-8为材料利用二维核磁共振技术分析它在溶液中的二级与三级结构的工作均已见诸报道.由于成熟的NAP-1/IL-8只有72个氨基酸,通过化学合成而得到它的全基因,不失为开展NAP-1/IL-8基因工程研究的捷径.本文将报道人NAP-1/IL-8基因的半化学半酶促合成及NAP-1/IL-8合成基因在大肠杆菌中的表达. 一、合成的设计和策略在设计NAP-1/IL-8合成基因时。
- 金冬雁徐荣辉王平袁劲松侯云德
- 关键词：嗜中性活化蛋白白细胞介素
- 应用扫描隧道显微镜技术观察针对HBsAg基因转录物的核酶的二级结构被引量：1
- 1991年
- 核酶(Ribozyme)是具有催化RNA切割反应功能的RNA,它可以特异性地切割RN-A。最近,核酶的一级结构已经被证实,其与底物结合时所形成的二级结构如锤头状(Hammerhead)、发夹型(Hairpin)结构,亦得到初步证实。因此,能够设计并人工合成核酶,通过特异性破坏RNA,阻断其功能,从而有效地阻止病毒的复制和繁殖。这是近年来继反义RNA之后发现的又一个抑制基因表达的有力工具,开辟了分子生物学的一个新领域。
- 王平郭军白春礼侯云德
- 关键词：核酶HBSAG基因转录STM
- 流感病毒变异规律的一些新发现及其在流感监测和生态学研究中的应用被引量：2
- 1990年
- 通过近10年的研究,在流感病毒生态学研究方面取得了一些重要的研究成果。填补了我国在这方面的空白。在国际上首先从猪中分离到丙型流感病毒,并通过基因分析,证实了丙型流感病毒在猪群中也能发生抗原性漂移甚至基因重组;并证实在猪群中有乙型流感病毒抗体的存在且至今猪群中仍含有甲2型（H2N2）流感病毒抗体。在国内,首次从猪中分离到人甲1型（H1N1）流感病毒。
- 郭元吉王敏王平朱既明
- 关键词：流感病毒乙型流感病毒抗体流行株
- 核酶对鸭乙型肝炎病毒感染体内抗病毒作用效果的观察被引量：4
- 1998年
- 目的观察核酶在体内抗病毒作用效果。方法选择鸭乙型肝炎（ＤＨＢＶＬＪ－７６）及其鸭动物模型作为检测系统，将针对ＤＨＢＶＰｒｅ－Ｓ７３６位点的核酶（ＲｚＤＳ）插入ｐＪ１２０质粒构建成ｐＪ－ＲｚＤＳ。与痘苗病毒天坛７６１株（ＶＶ）同源重组后获得含ＲｚＤＳ的重组痘苗病毒（Ｖ－ＲｚＤＳ）。用ＤＨＢＶ感染１日龄北京鸭，分别在感染的同时、感染后２４小时和７２小时注射Ｖ－ＲｚＤＳ和ＶＶ，１０天后检测血清中ＤＨＢＶＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ的含量。结果北京鸭在感染ＤＨＢＶ的同时注射Ｖ－ＲｚＤＳ，其ＤＨＢＶＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ的含量均低于ＶＶ对照组，两组之间有显著性差异。结论提示ＲｚＤＳ对ＤＨＢＶ基因组复制和表达均有抑制作用，其抑制率分别为４５％和６３％。
- 李虹陈文徐纬王平郭巨涛侯云德
- 关键词：核酶鸭乙型肝炎病毒
- 核酶Ripc催化性质的研究被引量：3
- 1993年
- 本文根据Jim Haseloff和Wayne,L.Gerlach等人发表的锤头状核酶(Hammer-head structure ribozyme)基本模式,设计并人工合成了针对HBV基因转录物的核酶-Ri-pc,已在体外成功地切割了靶RNA分子。本文利用酶学研究的一般方法研究了核酶Ripe催化方面的特性。结果表明:(1)反应温度从25℃上升到37℃时,核酶作用效果略有增加;当温度上升到42℃时,作用更为明显。(2)随时间的增加,切割产物也逐渐增加,但不是线性的。可见核酶的活性随时间的增加是有所下降的。从图中估计此核酶的半衰期T_(1/2)在1小时内。(3)从核酶的动力学曲线看,在底物浓度达到8.00μmol/L时,产物浓度仍呈线性增加。如果核酶的反应动力学曲线符合米氏方程,说明在此底物浓度下,核酶未被饱和。(4)Mg^(2+)浓度从10mmol/L增加到50mmol/L时,核酶的切割效果变化不显著。
- 徐炜王平孙晓梅容敏清童葵塘侯云德
- 关键词：核酶乙型肝炎病毒
- 痘苗病毒载体介导的反义RNA抑制HBsAg基因表达的研究被引量：1
- 1991年
- 将含有乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的DNA片段,按转录的相反方向插入痘苗病毒P11启动子下游,构建成重组质粒pJ16/HBS和pHBS-1。使用磷酸钙沉淀技术将这些质粒转染能分泌HBsAg并已被痘苗病毒感染的细胞,观察到HBsAg的合成被特异性地抑制,抑制率最高达95％以上。
- 赵小侠曹雷毛冬丽张爱臣王平侯云德
- 关键词：痘苗病毒反义RNAHBSAG基因
- 人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因的修正及修正基因在大肠杆菌中的表达
- 1992年
- 本文采用寡核苷酸介导的定位诱变技术修正了人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8合成基因中出现的合成错误,在该基因编码区的201位插入了原来缺失的G残基,从而使之恢复正确读框。经对修正基因进行DNA全序列测定,表明定位诱变的结果符合设计要求。在此基础上,利用原核高效表达载体pBV220在P_RP_L串联启动子的控制下在大肠杆菌中对该基因进行了表达,并测定了重组人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8的嗜中性白细胞趋化活性。本工作为开展人嗜中性白细胞活化蛋白-1/白细胞介素-8基因工程及蛋白质工程的研究奠定了基础。
- 徐荣辉金冬雁王平袁劲松吴淑华侯云德梁希若
- 关键词：细胞因子大肠杆菌
- 1977年以来流感病毒在我国人群中活动的特点被引量：3
- 1987年
- 本文介绍了1977年以来流感在我国活动的特点及毒株变异情况,发现了甲3型毒株的 RNA迁移状态有长短两个形式,而甲1型仅有一种形式。同时发现 RNA 分布状态与毒株能否在人群中造成流行有密切关系,并认为近期内甲2型（H2N2）毒株在人群中重新出现的可能性不大。
- 郭元吉王平王敏张莎林
