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一种胆盐水解酶及其生产方法与专用生产菌株: 本发明公开了一种乳酸菌胆盐水解酶及其生产方法与专用生产菌株。该胆盐水解酶，是发酵其专用生产菌株－干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KTx CGMCC№.1739得到的。该生产胆盐水解酶的方法，包括下述步...; 李平兰王玉文王延祥周伟刘慧李伟欣靳志强; 文献传递

一种胆盐水解酶及其生产方法与专用生产菌株: 本发明公开了一种乳酸菌胆盐水解酶及其生产方法与专用生产菌株。该胆盐水解酶，是发酵其专用生产菌株-干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KTx CGMCC№.1739得到的。该生产胆盐水解酶的方法，包括下述步...; 李平兰王玉文王延祥周伟刘慧李伟欣靳志强; 文献传递

植物乳杆菌耐酸耐胆盐的体外试验及其降胆固醇作用被引量：26: 2009年; 目的:研究产胆盐水解酶植物乳杆菌H13的耐酸、耐胆盐特性,在此基础上对其可能的降胆固醇作用机理进行体外试验研究。方法:采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH=3)和胆盐环境(0.3%),测定H13菌株在酸性及高胆盐环境作用后的存活菌数,并在此胆盐浓度下测定植物乳杆菌H13的胆盐水解酶活力、降解胆盐能力和胆固醇沉淀量。结果:菌体能够耐受pH3的环境和0.3%的胆盐环境;该菌产生的胆盐水解酶在降低胆固醇方面具有重要作用,酶活性与游离胆酸量、胆固醇沉淀量呈正相关,而且胆盐水解酶对反应底物的特异性不同,以甘氨胆酸钠为佳。结论:植物乳杆菌H13体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶使胆盐失去共轭作用,在酸性(pH<6.0)条件下,解共轭胆盐与胆固醇形成复合物共同沉淀下来。; 靳志强王延祥李平兰王玉文; 关键词：植物乳杆菌胆盐水解酶降胆固醇共沉淀

利用16S rRNA序列鉴定分离自开菲尔粒的一株乳杆菌被引量：9: 2008年; 对菌株H13的16S rRNA序列进行克隆和测序,并以此为基础构建菌株H13的系统发育树,对菌株H13进行鉴定。应用PCR技术,扩增H13菌株的16S rRNA基因,将其与pEASY-T载体相连接,用Sanger双脱氧链终止法测定序列并将16S rRNA序列与GenBank所选择的同属及非同属的菌进行同源性比较。结果表明:H13菌株16S rRNA基因序列同源性与乳杆菌属10株菌均在89%以上,与所选的植物乳杆菌和类植物乳杆菌的同源性高达99.5%和99.2%,与其他8株乳杆菌属菌株的同源性都小于97%,可进一步确定其为植物乳杆菌或类植物乳杆菌。系统发育进化树结果表明,H13与植物乳杆菌的同源性最为接近。H13最终鉴定为植物乳杆菌,该菌株现在已被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心收录保存,编号为CGMCC 1357。; 王延祥秦伟李平兰王玉文张博文; 关键词：开菲尔粒 RRNA 植物乳杆菌系统发育树

胆盐水解酶的分离纯化与部分特性研究被引量：13: 2007年; 为了给胆盐水解酶结构分析及降低血液胆固醇的机理研究提供理论基础,采用硫酸铵分级沉淀、透析、阴离子交换树脂层析等方法对分离自我国传统开菲尔粒中的1株干酪乳杆菌KTx(lactobillus casei KTx)产生的胆盐水解酶进行了纯化,并对其部分特性进行了研究。结果表明:在70%的硫酸铵条件下酶蛋白能最大程度地沉淀。采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂层析,流速1.0mL/min,用0.1mol/L NaCl-50mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)洗脱,比活力可达到115(AU/mg),是原粗酶液的17倍。纯化后的样品经SDS-PAGE电泳,初步确定了胆盐水解酶的分子质量约30kDa。该酶的最适反应温度35℃,最适pH6.0,最适反应底物浓度6mmol/L,酶促反应动力学常数4.57mmol/L。抑制剂对此酶的抑制作用强弱顺序依次为:尿素>SDS>EDTA。Al3+对此酶的激活能力最强,其次是Fe3+,Zn2+对酶活无激活作用。; 王玉文王延祥李平兰刘慧张燕; 关键词：胆盐水解酶纯化

产胆盐水解酶乳酸菌的分离、鉴定及降解胆固醇机理的初步研究被引量：28: 2006年; 本文从开菲尔粒中分离出15株能降低胆固醇的菌,通过生理生化反应以及其他指标对这15株菌株进行鉴定,其中7株为球菌,8株为杆菌。对这15株菌进行复筛,最终筛选出一株能产胆盐水解酶的菌株,用全自动生化鉴定仪对这株菌做进一步的鉴定,其鉴定结果为干酪乳杆菌。; 王玉文刘慧李平兰王延祥熊利霞; 关键词：开菲尔粒胆盐水解酶降胆固醇

开菲尔源干酪乳杆菌产胆盐水解酶的研究: 为探讨乳酸菌降胆固醇机理并为开发降胆固醇的益生菌和益生菌制品提供前期理论基础，本研究以开菲尔为材料，开展了产胆盐水解酶菌株的筛选、鉴定、胆盐水解酶合成条件的优化、胆盐水解酶的提取纯化及酶学特性研究。 1.以开菲...; 王玉文; 关键词：开菲尔胆固醇胆盐水解酶益生菌制品酶学特性; 文献传递

胆盐水解酶合成条件的优化被引量：3: 2006年; 以MRS,MRS肉汤,改良MRS为基础培养基,考察了培养基对菌株产胆盐水解酶活力的影响,确定了MRS肉汤为基础培养。对KTx在MRS肉汤中最适碳源、氮源、培养温度、培养基起始pH值、刺激因子作了单因素试验,得出最适碳源为葡萄糖,最适氮源为大豆蛋白胨,最适培养温度37℃,最适培养基起始pH值为5.5～6.0,最适刺激因子吐温80。在此基础上选择葡萄糖、大豆蛋白胨、培养温度、接种量进行L16(44)四因素四水平正交试验。结果表明,对胆盐水解酶活力影响因子水平:葡萄糖>大豆蛋白胨>培养温度>接种量;最佳产胆盐水解酶条件:葡萄糖4%,大豆蛋白胨2%,接种量2%(均为质量分数),培养温度为37℃。优化后菌株的产酶活力可提高到优化前的13.4倍。; 王玉文李平兰王延祥刘慧张艳; 关键词：胆盐水解酶

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王玉文