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王英: 作品数：18 被引量：114H指数：7; 供职机构：中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>; 发文基金：军队“十一五”科技攻关课题中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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氯霉素抗性融合蛋白报告系统的建立与验证被引量：1: 2005年; 利用氯霉素乙酰基转移酶(CAT)N端融合了可溶性蛋白细胞所表现出的氯霉素抗性高于不溶性蛋白这一特点,建立了一种能在大肠杆菌中方便地检测到目的蛋白可溶性的报告系统。以pMalp2X高效表达载体为基础,采用PCR法扩增CAT基因,并通过引物向CAT中引入所需的多克隆位点、终止密码子及linker,将扩增得到的CAT片段插入到pMalp2X中,构建pCAR报道质粒并作测序鉴定;PCR分别扩增IGF1、IL3、Trx基因,连接到pCAR载体上,导入大肠杆菌原核表达系统中进行诱导表达,SDSPAGE分析、氯霉素抗性试验对表达目的蛋白的可溶性和表现出的氯霉素抗性的相关性加以验证。结果显示用该载体表达的重组蛋白的可溶性与氯霉素抗性具有很强的相关性。本报告系统能通过直观的平板氯霉素抗性高低正确指示位于CATN端的目的蛋白的可溶性,为其在生物工程和蛋白质构象相关疾病研究等领域的应用打下了基础。; 王爱娥张睢扬董书魁梅开城马建新王东霞王英; 关键词：蛋白质折叠可溶性原核表达

氩气刀联合高频电刀及冷冻刀治疗气道狭窄的临床疗效被引量：16: 2012年; 目的观察电子支气管镜下氩气刀联合高频电刀及冷冻刀治疗良恶性肿瘤所致气道狭窄的临床疗效。方法对33例良恶性肿瘤导致气道阻塞患者,经电子支气管镜下进行氩气刀、高频电刀及冷冻刀治疗,观察疗效和并发症的发生率。结果 33例患者共进行63次治疗,近期完全有效10例(30.3%),部分有效9例(27.3%),轻度有效12例(36.4%),无效2例(6.0%),33例患者中,术后12例出现痰血,6例出现38.0℃以下低热,无气胸、纵隔气肿、大咯血等严重并发症。结论支气管镜下氩气刀联合高频电刀及冷冻刀治疗良恶性肿瘤引起的气道阻塞疗效显著,对良性肿瘤避免了开胸手术,可达到临床根治;对恶性肿瘤疗效直接,是非常有效的姑息治疗手段。; 李朝霞张睢扬闫春连甘乐文王英卫晓慧; 关键词：氩气刀高频电刀气道狭窄

一种亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型的建立: 2006年; 为建立以多聚谷氨酰胺(polyQ)为靶点的亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型,以随机引物PCR法克隆了不同长度的CAG片段,经序列测定正确后,分别融合到已经建立的氯霉素抗性融合蛋白表达系统pCAR中CAT的N端。重组质粒转化大肠杆菌,并在其中诱导表达,SDS-PAGE和氯霉素抗性平板试验对目的蛋白可溶性与氯霉素活性进行测定。结果显示长度在40以上的polyQ为不溶性包涵体表达,表现为低水平的氯霉素抗性,40以下的polyQ则以可溶形式表达,表现为高水平氯霉素抗性,从而建立起能够模拟亨廷顿舞蹈症病理过程的体外细胞模型。通过检测模型细胞的氯霉素抗性,可以定性、定量地反映polyQ在体内的折叠状态和可溶性,故可以借助该模型对促溶药物或生物活性物质进行高通量筛选,为亨廷顿舞蹈症预防、诊断、治疗提供了新思路。; 王爱娥张睢扬于新荣王东霞王英马建新梅开城闫春莲; 关键词：蛋白溶解性细胞模型

原发性气管腺样囊性癌误诊为支气管哮喘被引量：5: 2012年; 目的探讨气管腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)的误诊原因,以减少误诊误治。方法回顾性分析1例原发性气管ACC误诊为支气管哮喘的临床资料,并复习相关文献。结果患者表现为发作性咳嗽、咳痰伴气喘,在当地医院多次就诊,误诊为支气管炎、支气管哮喘,后渐出现痰中带血、呼吸困难、持续喘憋、发绀,以哮喘持续状态转入我院。无创呼吸机辅助通气等治疗无效,纤维支气管镜引导下经鼻气管插管时发现距隆突约5 cm处一肿物堵塞主气管约4/5,取材病理检查诊断为气管ACC,先后2次于全麻下经气管镜行高频电圈圈套联合冷冻刀、氩气刀切除全部肿瘤。术后症状基本缓解。结论气管ACC临床症状不典型,易误诊为支气管哮喘,诊断方法首选胸部CT及纤维支气管镜检查,手术切除结合术后放疗是最佳治疗方法,纤维支气管镜下介入治疗是较好的姑息治疗手段。; 李朝霞赵伟王英宋云熙; 关键词：气管肿瘤误诊哮喘

面罩机械通气治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭18例临床分析被引量：1: 2002年; 目的　分析面罩机械通气 (MMV)治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭的疗效。方法　对 18例急性Ⅱ型呼吸衰竭患者采用同步间歇性指令通气 (SIMV) +压力支持通气 (PSV ) +呼气末正压通气(PEEP)或PSV +PEEP通气方式进行面罩机械通气 ,并观测通气前后动脉血气变化。结果　通气治疗前后动脉血气比较 ,通气后pH、PO2 和SaO2 明显回升 (P <0 .0 5～P <0 .0 1) ,PCO2 明显回降(P <0 .0 1)。 18例患者中 ,12例好转出院 ,6例因通气失败死亡。结论　面罩机械通气是治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭的重要手段之一。; 甘乐文张睢扬马建新王英李朝霞王东霞; 关键词：面罩机械通气呼吸衰竭

三磷酸肌醇受体各亚型在大鼠气道平滑肌细胞中的表达以及在慢性哮喘中的作用被引量：5: 2005年; 目的　检测正常大鼠气道平滑肌细胞中三磷酸肌醇受体 (Inositol 1,4,5triphosphatereceptors ,IP3 R)各亚型的表达以及在慢性哮喘中的作用。方法　采用胶原酶消化法培养大鼠气道平滑肌细胞 ,RT PCR方法测定IP3 R亚型的表达 ,并将纯化的PCR产物与pGEM T载体连接后进行DNA序列分析 ;卵蛋白致敏并激发大鼠制备慢性哮喘模型 ,RT PCR测定各受体mRNA表达水平的变化。结果　大鼠气道平滑肌细胞中IP3 R的 3种亚型共表达 ,测序结果与GenBank中登录的序列完全一致 ;制备的慢性哮喘模型中 ,病理切片显示平滑肌层及粘膜层明显增厚 ,IP3 R1的表达较对照组有明显的上调P<0 .0 1。结论　大鼠气道平滑肌细胞中IP3 R 3种亚型共表达 ,提示存在着复杂的细胞内钙调节机制 ;并且IP3 R1在慢性哮喘的发生过程中可能起了一定的作用。; 王英张睢扬王希良钱桂生; 关键词：气道平滑肌细胞逆转录-聚合酶链式反应

不同基础疾病所致重症肺炎病原体构成及耐药性被引量：13: 2006年; 目的了解不同基础疾病发生重症肺炎病原体构成及对抗菌药物敏感性的差异.方法 2002年1月～2005年6月间,采用VITEK-AMS微生物分析仪检测痰培养阳性的病原菌,纸片法（Kirby-Bauer）检测细菌的体外抗生素药物敏感性.结果有106例患者,共分离出致病菌173株,结果显示：不同基础疾病的社区获得性重症肺炎病原体构成比与无明显基础疾病的社区获得性重症肺炎有明显不同,吸入性重症肺炎以肺炎克雷伯菌（20.9%）、大肠埃希菌（16.3%）常见;阻塞性重症肺炎以产碱假单胞菌常见（18.9%）,铜绿假单胞菌（16.2%）和金黄色葡萄球菌（16.2%）占有一定比例;COPD合并重症肺炎以肺炎克雷伯菌常见（22.6%）;金黄色葡萄球菌（18.9%）、铜绿假单胞菌（17.0%）占一定比例,而医院获得性肺炎（HAP）以铜绿假单胞菌（25.0%）和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（20.0%）为主.结论有不同基础疾病所致重症肺炎与无基础疾病的社区获得性肺炎病原体构成比不同,医院获得性肺炎病例中耐药菌显著增加.; 闫春连马建新张睢扬王英; 关键词：重症肺炎病原体耐药性

医疗机构相关性肺炎和社区获得性肺炎的病原学、治疗及转归比较: 2011年; 目的比较医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎二者病原学特点、治疗及转归的差异。方法收集2007年1月至2009年12月我院呼吸科住院的264例肺炎患者病例，分析比较医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎的病原学特点、治疗及转归。结果264例肺炎患者中，医疗机构相关性肺炎101例（38．26％）、社区获得性肺炎163例（61．74％），医疗机构相关性肺炎患者均有较多危险因素。医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎在感染病原菌种类、抗生素应用、入住重症监护室的数量、住院时间和住院费用以及转归上有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论提高对医疗机构相关性肺炎的理解和认识，加强医疗机构相关性肺炎的预防，理性早期经验性抗菌药物的使用，可能会在提高医疗机构相关性肺炎的治愈率、降低其死亡率中起一定作用。; 卞明菊张睢扬王英王东霞; 关键词：社区获得性肺炎病原学转归

NANOGP8基因在肺癌细胞系中甲基化水平与表达研究: 2014年; 目的:研究NANOGP8基因在肺癌细胞系A549中启动子区域甲基化水平及其与基因表达的相关性。方法:利用MethPrimer甲基化岛预测和甲基化引物设计软件,预测NANOGP8启动子区甲基化位点。分别从人成纤维细胞系和肺癌细胞系中提取基因组DNA,经过亚硫酸氢钠处理后,用针对甲基化位点设计的引物进行PCR扩增,获得相应区段DNA后,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌鉴定阳性克隆后,测序并与GenBank数据库中NANOGP8基因组DNA序列比对,获得其甲基化水平数据。分别提取两个细胞系的总RNA,RT-PCR获得相应cDNA进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,经酶切和测序验证,获取其表达水平数据。结果:成功预测NANOGP8的两个区域有甲基化位点,并检测到人成纤维细胞系和肺癌A549细胞系中NANOGP8启动子甲基化水平分别为59.7%和12.5%,表达检测结果显示在A549细胞系中检测到NANOGP8的基因片段,而在人成纤维细胞系中没有扩增到相应产物。结论:在正常成体细胞中NANOGP8基因由于启动子的高度甲基化而沉默,而在肺癌细胞系中NANOGP8基因启动子去甲基化激活其表达。NANOGP8基因的表达与其启动子区域去甲基化密切相关,同时NANOGP8在肺癌细胞分化过程中发挥重要作用。; 王爱娥王英李朝霞宋云熙王东霞甘乐文马建新常艳张睢扬江小霞; 关键词：甲基化

美罗培南在脓毒症及脓毒症休克患者中的PK/PD研究被引量：16: 2013年; 目的测定美罗培南在脓毒症和脓毒症休克患者中不同时间的血药浓度,求出不同最小抑菌浓度(minimal inhibitory comentration,MIC)值时%T>4MIC的值及达标概率(probability of target attainments,PTAs),探讨脓毒症及脓毒症休克患者病理生理学的变化对美罗培南药代动力学(pharmacokinetics,PK)的影响。方法选自2012年9月至2013年3月呼吸重症监护病房(respiratory intensive care unit,RICU)中10例脓毒症和脓毒症休克患者,按美罗培南1.0g/2h延长输注法的点滴模型给药。采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定美罗培南给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8h的血药浓度。按人口学资料中APACHEⅡ评分将10例患者分成轻度和重度脓毒症两组,将测得的时间-血药浓度数据输入药代动力学(PK)软件Winnonlin5.2求出各例患者的药代动力学参数。使用CrystalBall软件按PK/PD(药效学)模型进行蒙特卡罗模拟(monte carlo simulation,MCS)计算出美罗培南%T>4MIC的值及达标概率(PTAs)。结果当MIC分别为0.5、1、2、4、8μg/ml时,10例患者的平均%T>4MIC(%)值分别为124.04±39.02、99.83±32.01、73.26±24.67、46.97±16.87、14.85±8.31。轻度脓毒症组分别为172.19±11.51、138.88±8.79、105.57±7.41、71.70±5.59、36.93±4.37;重度脓毒症组分别为81.77±13.20、63.31±10.34、45.37±7.07、26.70±4.33、6.82±1.75。不同MIC值时总体组的达标概率分别为100%、99.7%、96.0%、62.5%、0.93%。轻度组达标概率分别为100%、100%、100%、100%、24.5%;重度组分别为100%、99.8%、75.7%、0.9%、0.0%。结论脓毒症和脓毒症休克患者病理生理的变化改变了抗生素的药代动力学和药效学,轻度组和重度组的药代动力学有明显差异,当MIC=4.0μg/ml时,重度组%T>4MIC的值仅为26.70±4.33,需要加大药物剂量或/和增加药物给药次数。当MIC=8.0μg/ml时无论轻、重组均不达标,需加大药物剂量或/和增加药物给药次数。; 牛莎张睢扬王英王东霞马建新; 关键词：美罗培南病理生理蒙特卡罗模拟法

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