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王东霞: 作品数：11 被引量：55H指数：4; 供职机构：中国人民解放军第二炮兵总医院更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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NANOGP8基因在肺癌细胞系中甲基化水平与表达研究: 2014年; 目的:研究NANOGP8基因在肺癌细胞系A549中启动子区域甲基化水平及其与基因表达的相关性。方法:利用MethPrimer甲基化岛预测和甲基化引物设计软件,预测NANOGP8启动子区甲基化位点。分别从人成纤维细胞系和肺癌细胞系中提取基因组DNA,经过亚硫酸氢钠处理后,用针对甲基化位点设计的引物进行PCR扩增,获得相应区段DNA后,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌鉴定阳性克隆后,测序并与GenBank数据库中NANOGP8基因组DNA序列比对,获得其甲基化水平数据。分别提取两个细胞系的总RNA,RT-PCR获得相应cDNA进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,经酶切和测序验证,获取其表达水平数据。结果:成功预测NANOGP8的两个区域有甲基化位点,并检测到人成纤维细胞系和肺癌A549细胞系中NANOGP8启动子甲基化水平分别为59.7%和12.5%,表达检测结果显示在A549细胞系中检测到NANOGP8的基因片段,而在人成纤维细胞系中没有扩增到相应产物。结论:在正常成体细胞中NANOGP8基因由于启动子的高度甲基化而沉默,而在肺癌细胞系中NANOGP8基因启动子去甲基化激活其表达。NANOGP8基因的表达与其启动子区域去甲基化密切相关,同时NANOGP8在肺癌细胞分化过程中发挥重要作用。; 王爱娥王英李朝霞宋云熙王东霞甘乐文马建新常艳张睢扬江小霞; 关键词：甲基化

氯霉素抗性融合蛋白报告系统的建立与验证被引量：1: 2005年; 利用氯霉素乙酰基转移酶(CAT)N端融合了可溶性蛋白细胞所表现出的氯霉素抗性高于不溶性蛋白这一特点,建立了一种能在大肠杆菌中方便地检测到目的蛋白可溶性的报告系统。以pMalp2X高效表达载体为基础,采用PCR法扩增CAT基因,并通过引物向CAT中引入所需的多克隆位点、终止密码子及linker,将扩增得到的CAT片段插入到pMalp2X中,构建pCAR报道质粒并作测序鉴定;PCR分别扩增IGF1、IL3、Trx基因,连接到pCAR载体上,导入大肠杆菌原核表达系统中进行诱导表达,SDSPAGE分析、氯霉素抗性试验对表达目的蛋白的可溶性和表现出的氯霉素抗性的相关性加以验证。结果显示用该载体表达的重组蛋白的可溶性与氯霉素抗性具有很强的相关性。本报告系统能通过直观的平板氯霉素抗性高低正确指示位于CATN端的目的蛋白的可溶性,为其在生物工程和蛋白质构象相关疾病研究等领域的应用打下了基础。; 王爱娥张睢扬董书魁梅开城马建新王东霞王英; 关键词：蛋白质折叠可溶性原核表达

一种亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型的建立: 2006年; 为建立以多聚谷氨酰胺(polyQ)为靶点的亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型,以随机引物PCR法克隆了不同长度的CAG片段,经序列测定正确后,分别融合到已经建立的氯霉素抗性融合蛋白表达系统pCAR中CAT的N端。重组质粒转化大肠杆菌,并在其中诱导表达,SDS-PAGE和氯霉素抗性平板试验对目的蛋白可溶性与氯霉素活性进行测定。结果显示长度在40以上的polyQ为不溶性包涵体表达,表现为低水平的氯霉素抗性,40以下的polyQ则以可溶形式表达,表现为高水平氯霉素抗性,从而建立起能够模拟亨廷顿舞蹈症病理过程的体外细胞模型。通过检测模型细胞的氯霉素抗性,可以定性、定量地反映polyQ在体内的折叠状态和可溶性,故可以借助该模型对促溶药物或生物活性物质进行高通量筛选,为亨廷顿舞蹈症预防、诊断、治疗提供了新思路。; 王爱娥张睢扬于新荣王东霞王英马建新梅开城闫春莲; 关键词：蛋白溶解性细胞模型

面罩机械通气治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭18例临床分析被引量：1: 2002年; 目的　分析面罩机械通气 (MMV)治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭的疗效。方法　对 18例急性Ⅱ型呼吸衰竭患者采用同步间歇性指令通气 (SIMV) +压力支持通气 (PSV ) +呼气末正压通气(PEEP)或PSV +PEEP通气方式进行面罩机械通气 ,并观测通气前后动脉血气变化。结果　通气治疗前后动脉血气比较 ,通气后pH、PO2 和SaO2 明显回升 (P <0 .0 5～P <0 .0 1) ,PCO2 明显回降(P <0 .0 1)。 18例患者中 ,12例好转出院 ,6例因通气失败死亡。结论　面罩机械通气是治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭的重要手段之一。; 甘乐文张睢扬马建新王英李朝霞王东霞; 关键词：面罩机械通气呼吸衰竭

医疗机构相关性肺炎和社区获得性肺炎的病原学、治疗及转归比较: 2011年; 目的比较医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎二者病原学特点、治疗及转归的差异。方法收集2007年1月至2009年12月我院呼吸科住院的264例肺炎患者病例，分析比较医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎的病原学特点、治疗及转归。结果264例肺炎患者中，医疗机构相关性肺炎101例（38．26％）、社区获得性肺炎163例（61．74％），医疗机构相关性肺炎患者均有较多危险因素。医疗机构相关性肺炎与社区获得性肺炎在感染病原菌种类、抗生素应用、入住重症监护室的数量、住院时间和住院费用以及转归上有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论提高对医疗机构相关性肺炎的理解和认识，加强医疗机构相关性肺炎的预防，理性早期经验性抗菌药物的使用，可能会在提高医疗机构相关性肺炎的治愈率、降低其死亡率中起一定作用。; 卞明菊张睢扬王英王东霞; 关键词：社区获得性肺炎病原学转归

美罗培南在脓毒症及脓毒症休克患者中的PK/PD研究被引量：16: 2013年; 目的测定美罗培南在脓毒症和脓毒症休克患者中不同时间的血药浓度,求出不同最小抑菌浓度(minimal inhibitory comentration,MIC)值时%T>4MIC的值及达标概率(probability of target attainments,PTAs),探讨脓毒症及脓毒症休克患者病理生理学的变化对美罗培南药代动力学(pharmacokinetics,PK)的影响。方法选自2012年9月至2013年3月呼吸重症监护病房(respiratory intensive care unit,RICU)中10例脓毒症和脓毒症休克患者,按美罗培南1.0g/2h延长输注法的点滴模型给药。采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定美罗培南给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8h的血药浓度。按人口学资料中APACHEⅡ评分将10例患者分成轻度和重度脓毒症两组,将测得的时间-血药浓度数据输入药代动力学(PK)软件Winnonlin5.2求出各例患者的药代动力学参数。使用CrystalBall软件按PK/PD(药效学)模型进行蒙特卡罗模拟(monte carlo simulation,MCS)计算出美罗培南%T>4MIC的值及达标概率(PTAs)。结果当MIC分别为0.5、1、2、4、8μg/ml时,10例患者的平均%T>4MIC(%)值分别为124.04±39.02、99.83±32.01、73.26±24.67、46.97±16.87、14.85±8.31。轻度脓毒症组分别为172.19±11.51、138.88±8.79、105.57±7.41、71.70±5.59、36.93±4.37;重度脓毒症组分别为81.77±13.20、63.31±10.34、45.37±7.07、26.70±4.33、6.82±1.75。不同MIC值时总体组的达标概率分别为100%、99.7%、96.0%、62.5%、0.93%。轻度组达标概率分别为100%、100%、100%、100%、24.5%;重度组分别为100%、99.8%、75.7%、0.9%、0.0%。结论脓毒症和脓毒症休克患者病理生理的变化改变了抗生素的药代动力学和药效学,轻度组和重度组的药代动力学有明显差异,当MIC=4.0μg/ml时,重度组%T>4MIC的值仅为26.70±4.33,需要加大药物剂量或/和增加药物给药次数。当MIC=8.0μg/ml时无论轻、重组均不达标,需加大药物剂量或/和增加药物给药次数。; 牛莎张睢扬王英王东霞马建新; 关键词：美罗培南病理生理蒙特卡罗模拟法

成人脓毒血症患者不同负荷剂量的亚胺培南/西司他丁药动学/药效学参数差异的研究被引量：16: 2013年; 目的比较成人脓毒血症患者2h静脉泵入负荷量1.0g与2.0g亚胺培南/西司他丁的%T>4×最低抑菌浓度(MIC),为制定亚胺培南/西司他丁在成人脓毒血症患者的合理用药方案提供参考。方法对10位脓毒血症的患者随机分为实验组和对照组各5例。实验组受试者接受方案1给药即1.0g亚胺培南/西司他丁2.0h静脉泵入;对照组受试者接受方案2给药即2.0g亚胺培南/西司他丁2h静脉泵入。在给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8h抽取静脉血标本测定血药浓度。结果试验组对病原菌MIC为4、2、1mg/L的%T>4×MIC分别为分别为(19.89±4.10)%,(44.66±5.56)%,(68.97±7.47)%。对照组对病原菌MIC为4、2、1mg/L的%T>4×MIC分别为(53.34±7.54)%,(79.45±8.66)%,(105.87±11.14)%。结论①结果提示2h静脉泵入负荷量2.0g亚胺培南/西司他丁的%T>4×MIC值超过静脉泵入1.0g;②随MIC值增加,%T>4×MIC呈下降趋势,对于MIC=4.0mg/L的高病原菌感染,可采用亚胺培南/西司他丁负荷剂量2.0g2h给药。; 张娟娟王英张睢扬马建新王东霞甘乐文; 关键词：脓毒血症亚胺培南西司他丁

面罩机械通气效果不佳改气管插管机械通气治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭15例临床分析被引量：2: 2004年; 目的　探讨面罩机械通气 (MMV)对急性Ⅱ型呼吸衰竭患者疗效不佳的原因。方法　对 15例采用同步间歇性指令通气 (SIMV) +压力支持通气 (PSV) +呼气末正压通气 (PEEP)或PSV +PEEP通气模式进行MMV疗效不佳的急性Ⅱ型呼吸衰竭患者进行气管插管机械通气 (IMV) ,并观测MMV治疗前、IMV治疗前和IMV治疗后动脉血气变化。结果　MMV治疗 15 .7± 12 .7h后患者动脉血气pH进一步下降 ,PCO2 进一步升高 ,与MMV治疗前后比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但PO2 和SaO2明显回升且差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;改用IMV治疗 8.2± 7.5h后PCO2 明显下降 ,pH、PaO2 和SaO2 明显回升 ,与MMV治疗前、IMV治疗前比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 5～P <0 .0 1)。 11例好转出院 ,4例死亡。结论　面罩机械通气对急性Ⅱ型呼吸衰竭疗效不佳的原因可能与上气道阻塞严重、呼吸频率过快和病情危重有关。; 甘乐文张睢扬梅开城马建新王东霞常艳; 关键词：面罩机械通气气管插管机械通气

喘憋、转氨酶增高、黄疸、心脏扩大、房扑: 2002年; 马建新张睢扬王东霞郭和民宋有诚; 关键词：支气管哮喘房扑

慢性阻塞性肺疾病急性加重机械通气治疗后酸碱平衡状态及电解质的变化被引量：15: 2013年; 目的研究机械通气后代谢性碱中毒及电解质紊乱的发生状况,探讨恰当的处理方法,旨在提高慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)机械通气技术的临床应用水平,并提高AECOPD抢救的成功率和改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的预后。方法回顾性分析伴Ⅱ型呼吸衰竭的AECOPD并使用机械通气的患者62例,并分为无创通气(35例)和有创通气(27例)二组,观察比较二组患者使用机械通气前、机械通气后1h、2h、3h、24h、72h及通气结束后的动脉血气及Na+、K+、Ca2+变化。结果二组患者使用机械通气后呼吸性酸中毒明显改善。无创通气组通气3h时出现6例失代偿期碱中毒(17.14%),通气72h后有22例(62.86%)患者出现代谢性碱中毒(包括代偿期和失代偿期),其中失代偿期碱中毒7例(25.93%),达碱中毒高峰。有创通气组在通气2h出现7例失代偿期碱中毒(25.93%),通气3h后即出现21例(77.77%)代谢性碱中毒,其中失代偿期碱中毒9例(33.33%)。二组在通气前Na+低于正常,且K+高于正常值,通气结束后恢复正常。比较24h时碱中毒者与无酸碱平衡紊乱者的电解质,发现碱中毒者K+、Ca2+低于无酸碱紊乱者。结论机械通气用于治疗伴II型呼吸衰竭的AECOPD患者疗效肯定。机械通气后由于二氧化碳排出过快往往导致高碳酸血症呼出后代谢性碱中毒的发生,同时引起电解质钾、钙的降低。有创机械通气较无创机械通气代谢性碱中毒出现早。; 李慧平张睢扬王英马建新王东霞; 关键词：肺疾病慢性阻塞性急性加重无创机械通气有创机械通气代谢性碱中毒电解质紊乱

王东霞

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