程敏
- 作品数：3 被引量：15H指数：1
- 供职机构：复旦大学上海医学院医学神经生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 调心方中β淀粉样蛋白结合成分的初步探讨被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨调心方中是否具有通过结合β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)而减少其神经元毒性的成分。方法:调心方提取物与Aβ共同沉淀并对沉淀物中的Aβ进行免疫印迹检测,制备小量Affi-gel-Aβ,用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测调心方中Affi-gel-Aβ结合组分;大鼠原代皮层神经元培养,以乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)测定法反映细胞损害程度。结果:免疫印迹检测显示Aβ能与调心方中的成分一起沉淀,且沉淀中的Aβ会随调心方的稀释而减少;调心方与Affi-gel-Aβ反应后,用甘氨酸液(pH2.5)洗脱的组分中有可被HPLC荧光检测器所检测的物质。LDH漏出检测结果显示,在无血清和含血清的培养体系中5μmol/LAβ1-42处理48h均可导致原代培养神经元损害,LDH漏出率显著增加(P<0.01),而大鼠调心方药物血清可抑制Aβ诱导的LDH漏出(P<0.05);经Affi-gel-Aβ吸附的调心方药物血清对Aβ毒性仍有抑制作用(P<0.05),但较经Affi-gel吸附的药物血清有减弱的趋势。结论:调心方中有Aβ结合成分,这类成分不促进Aβ的毒性,而可能具有抑制Aβ毒性的作用。提示在对老年性痴呆有效的中药方剂中探寻Aβ结合成分可能是探寻治疗AD药物的一个手段。
- 程敏冯琼钱淑文高慧朱粹青
- 关键词：Β淀粉样蛋白调心方乳酸脱氢酶老年性痴呆
- 兴奋性氨基酸受体的激活介导冷水应激诱导的tau蛋白磷酸化(英文)被引量：13
- 2010年
- 为探讨兴奋性神经传递系统是否参与冷水应激引起的tau蛋白磷酸化,将小鼠于4℃冷水应激5min.采用免疫印迹和免疫组织化学方法分析应激后脑内c-fos和磷酸化tau蛋白的表达情况;运用HPLC检测冷水应激后小鼠脑内兴奋性或抑制性神经递质的变化;同时分析兴奋性氨基酸受体和L-型钙通道拮抗剂预处理后冷水应激小鼠脑内磷酸化tau蛋白的水平.冷水应激后1h,海马内磷酸化tau蛋白的水平显著升高,同时伴c-fos的染色增加.HPLC检测显示,兴奋性和抑制性神经递质呈现急剧上升而后又下降的趋势.冷水应激后15min,天冬氨酸和甘氨酸水平显著升高,1h后天冬氨酸、谷氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸显著下降.NMDA受体拮抗剂MK-801(5mg/kg)和AMPA受体拮抗剂DNQX(0.5,5mg/kg)可显著抑制冷水应激引起的磷酸化tau蛋白水平的升高,代谢性谷氨酸受体拮抗剂MAP-4不影响tau蛋白的磷酸化,另外,L-型钙通道阻断剂尼莫地平可抑制冷水应激引起的磷酸化tau蛋白水平的升高.这些结果表明,冷水应激可影响兴奋性神经传递系统,通过离子型兴奋性氨基酸受体和异常神经激活来调节tau蛋白的磷酸化.兴奋性神经传递系统的激活在冷水应激诱导的海马tau蛋白的磷酸化中发挥作用.
- 武凤英冯琼程敏闫洁许玉霞朱粹青
- 关键词：TAU蛋白磷酸化HPLC
- 早老蛋白-1过度表达对神经母细胞瘤NG-108的tau蛋白磷酸化的影响(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的观察早老蛋白-1(Presenilin-1,PS1)的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。方法在NG-108细胞上转染不同的PS1质粒,利用免疫双标,免疫印记,免疫细胞化学,MTT,Western blot等方法,观察早老蛋白-1的过度表达对tau蛋白磷酸化的影响。结果免疫双标显示,在散发性AD(sporadic Alzheimer disease)患者脑内,PS1主要分布于神经元,并与磷酸化tau蛋白部分共存。免疫印迹显示,与空质粒组相比,转染野生型PS1组和转染一种家族性AD(familial Alzheimer disease,FAD)突变型早老蛋白-1(mPS1)质粒组的NG-108细胞中磷酸化的tau蛋白均增加。MTT方法未检测到这两组的转染细胞与对照组有显著差异。用Confocal显微镜观察PS1-EGFP质粒转染组,发现在转染后早期12 h,PS1-EGFP主要分布在细胞膜表面或细胞器上,随后PS1-EGFP主要在细胞浆中弥散分布。同时,免疫细胞化学检测显示,部分PS1-EGFP转染细胞中有明显的tau蛋白磷酸化,并且这些磷酸化tau蛋白能与PS1-EGFP蛋白一起形成聚集体。在给予磷酸酯酶抑制剂岗田酸后,PS1-EGFP转染细胞比未转染细胞含有更多的磷酸化的tau蛋白。结论野生型PS1可能参与了散发性阿茨海默氏病中的tau蛋白的病理改变。
- 陈波程敏王寅孙凤艳朱粹青
- 关键词：早老蛋白-1TAU蛋白磷酸化
