许小乐
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南通大学药学院更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目南通市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 基于谷氨酸棒杆菌NCgl1221蛋白的新型细菌表面展示系统被引量：1
- 2012年
- 【目的】开发一种新型的大肠杆菌表面展示系统,为C末端截短NCgl1221蛋白作为锚定蛋白提供科学依据,丰富并优化细菌表面展示系统。【方法】扩增C末端截短NCgl1221序列和β-淀粉酶基因,构建融合蛋白表达载体。将重组载体PET-NA和空载体PET-28a分别转入Rosetta(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白表达情况。将诱导表达菌株进行免疫荧光染色,荧光显微镜观察和流式细胞分析检测β-淀粉酶的展示。酶活测定和淀粉水解分析验证被展示β-淀粉酶的活性。【结果】融合蛋白成功地在大肠杆菌中表达,有活性的β-淀粉酶通过与锚定蛋白C末端的融合被展示在了宿主菌表面,展示β-淀粉酶的重组菌可以水解利用培养基中的淀粉。【结论】成功开发了一种以C末端截短NCgl1221为锚定蛋白的新型大肠杆菌表面展示系统,并以此系统展示了分子量大小为56 kDa的活性酶,为该系统在全细胞催化剂或吸附剂等方面的应用奠定了基础。
- 姚文娟范文俊许小乐张伟邓小昭
- 关键词：Β-淀粉酶
- 药理学微课教学的课程设计及应用被引量：2
- 2017年
- 药理学课程具有专业性强、知识点过多而且分散、学生不容易抓住重点等特点。"微课"作为一种新兴的授课方式,其授课时间短、针对性强、重点突出、容易吸引学生注意等特点有利于开发学生自主学习的能力,提高学生对药理学课程的学习兴趣和学习效率,因此非常适用于药理学课程的教学改革。
- 朱红艳罗琳许小乐姚文娟殷润婷吴锋孟国梁
- 关键词：药理学
- γ-聚谷氨酸合成酶系PgsBCA结构的生物信息学分析被引量：2
- 2012年
- 利用ProtParam、TopPred、PredictProtein、PSORT-B Prediction、SWISS-MODEL等软件分别分析蛋白质的理化性质、跨膜区、二级结构、亚细胞定位、三维结构.结果显示:PgsB是亲水不稳定蛋白,通过豆蔻酰锚钩锚定于质膜上,催化作用需与ATP结合提供能量;PgsC是疏水稳定蛋白,通过4个跨膜区和多个豆蔻酰锚钩定位于质膜,具有酰胺化位点;PgsA是亲水稳定蛋白,通过N端一个跨膜区和豆蔻酰锚钩结合于质膜,具有多种磷酸化位点.说明γ-聚谷氨酸(Polyγ-glutamic acid,γ-PGA)合成酶系3个组分蛋白形成复合物定位于质膜上,其中PgsB在胞内催化γ-PGA合成,PgsC固定于质膜,连接PgsB和PgsA组分,PgsA在胞外负责γ-PGA的运输.通过对γ-PGA合成酶系各组分蛋白结构的分析,为日后在谷氨酸高产菌株中的表达奠定了基础.
- 姚文娟范文俊许小乐邓小昭张伟
- 关键词：Γ-聚谷氨酸生物信息学
