路伟
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划吉林市科技发展计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段的原核表达及抗血清制备
- 2008年
- 本研究以国内分离的牛源坏死梭杆菌F4基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增BSBSE片段,克隆到pMD18-T载体上,鉴定并测序正确后,构建pET32a-BSBSE表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导、SDS-PAGE检测重组蛋白表达、Western blot检测重组蛋白反应原性。以该重组蛋白免疫兔制备抗血清,经间接ELISA检测抗血清效价。结果表明,PCR扩增得到1100bp的BSBSE片段,以此片段构建了pET32a-BSBSE表达质粒,经诱导后获得了目的蛋白表达,以Western blot检测该重组蛋白证明为本研究的目的蛋白,并且与抗体具有反应原性。以间接ELISA检测该重组蛋白免疫兔制备的抗血清效价达105。研究结果将为坏死梭杆菌毒力因子(lkt)的深入研究奠定了物质基础。
- 张秀华陈立志赵利芳刘晓颖路伟
- 关键词：坏死梭杆菌
- 豚鼠动物模型评价牛口蹄疫Asia-1型灭活疫苗效力的研究被引量：1
- 2011年
- 以豚鼠为试验动物模型,探索一种应用豚鼠替代牛进行牛口蹄疫Asia-1型灭活疫苗效力检验的方法。豚鼠和牛同步对6批牛口蹄疫Asia-1型灭活疫苗进行PD50效力检验,其中2批进行重复性试验。豚鼠分别在免疫后7、14、21和28天采血检测Asia-1型的中和抗体水平。统计学分析显示,测定的豚鼠PD50和牛PD50之间具有极显著的相关性(R=0.846,P<0.01);经回归分析,建立了应用豚鼠测定的PD50预测牛口蹄疫Asia-1型灭活疫苗效力的线性回归模型(y=1.625x-0.704;x表示豚鼠PD50结果;y表示牛PD50结果)。F检验(F=15.058,P=0.008)和t检验(t=3.880,P=0.008)证明该线性方程成立。豚鼠的Asia-1型抗体水平随免疫剂量的增加而升高,攻毒时的抗体水平与攻毒后的保护力存在正相关关系。本研究初步证明,在未来的效力检验中豚鼠可作为试验动物替代牛进行口蹄疫Asia-1型灭活疫苗效力检验。
- 赵俊李少英路伟王钦富赵炳武武华
- 关键词：口蹄疫灭活疫苗效力试验
- 坏死梭杆菌分子生物学鉴定和白细胞毒素免疫原性研究
- 陈立志张秀华刘晓颖程世鹏赵家平苏伟林司方方路伟
- 该项目围绕奶牛腐蹄病主要病原—坏死梭杆菌和节瘤拟杆菌，针对致病性坏死梭杆菌和A、E、C三个血清型的节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因，较为系统、深入地开展了坏死梭杆菌分离鉴定和主要致病因子白细胞毒素研究。利用常规的厌氧菌分离方法，分...
- 关键词：
- 关键词：奶牛腐蹄病分子生物学鉴定坏死梭杆菌
- 一株H1N1亚型猪流感病毒的分离鉴定及全基因序列分析被引量：2
- 2010年
- 2006年从辽宁省某猪场采集具有流感症状猪鼻拭子共30份,经9~11日龄SPF鸡胚分离,对分离株进行了血凝试验、血凝抑制试验、RT-PCR亚型鉴定,全基因序列比对和接种试验动物试验。结果表明：该毒株具有凝集0.5%鸡红细胞的活性,且与抗猪流感H1标准血清发生血凝抑制反应,RT-PCR分别扩增得到全基因8个片段,利用DNAStar生物学软件进行序列分析,HA基因与GenBank登录的H1~H16中的H1基因序列同源性最高,NA基因与N1~N9中的N1基因序列同源性最高,故该LN株分离毒为猪流感H1N1亚型病毒。全基因序列中,除了M基因不是猪源的,其它基因片段均与国内H1N1亚型猪流感参照株高度同源,推测LN株可能是由类人和类禽谱系的流感病毒与古典猪谱系的流感病毒重排形成的;用该病毒接种试验动物可成功复制出猪流感典型症状。该病毒的分离鉴定及全基因组序列分析为我国进一步调查猪流感的流行规律提供了基础数据。
- 路伟张秀华王秀东武华
- 关键词：猪流感病毒H1N1
