郭春霞
- 作品数：12 被引量：40H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 商陆抗病毒蛋白体外抑制乙型肝炎病毒复制的研究被引量：2
- 2007年
- 商陆抗病毒蛋白（pokeweed antiviral protein，PAP）是从美洲商陆种子或叶子中提取的一种碱性蛋白，具有抑制流感病毒、脊髓灰质炎病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒、HIV等多种病毒复制的作用。我们先前的研究发现：天然PAP种子体外直接作用于HepG2．2．15细胞，显示有较强的抗HBV作用，但在高剂量时对细胞有一定毒性。本研究旨在探讨PAP真核表达质粒体外对HBV的抑制作用。
- 贺永文郭春霞雷延昌
- 关键词：乙型肝炎病毒复制体外抑制HEPG2.2.15细胞抗HBV作用脊髓灰质炎病毒巨细胞病毒
- 骨桥蛋白与肝脏疾病被引量：4
- 2005年
- 骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌性磷酸化糖蛋白,以多种亚型存在于细胞内外。结构上它与多种基质蛋白相似,功能上它具有细胞因子的特点,参与了机体多种病理过程。近年的研究证实OPN在多种肝脏疾病中大量表达,与非酒精性脂肪肝、各种肝炎、肝纤维化及肝癌的发生发展及预后密切相关。本文将OPN与肝脏疾病的关系进行综述。
- 郭春霞贺永文
- 关键词：肝脏疾病骨桥蛋白磷酸化糖蛋白基质蛋白病理过程OPN
- APOBEC3G在慢性乙型肝炎、肝癌组织中的表达及与HBsAg、HBcAg的关系被引量：1
- 2008年
- 目的探讨APOBEC3G在正常对照、慢性乙肝患者肝脏组织及肝癌组织中的表达情况,以及在慢性肝炎组织中与HBsAg、HBcAg表达的关系。方法收集正常对照肝组织9例、慢性肝炎肝脏组织37例,以及肝癌组织13例,运用免疫组织化学染色的方法检测APOBEC3G、HBsAg、HBcAg的表达。结果与正常肝脏相比,慢性乙肝肝炎患者肝脏组织中APOBEC3G的表达增强,差异具有显著性(P<0.05),主要定位于HBV感染的肝细胞及汇管区的炎性细胞胞浆中,但与同时在肝细胞内高度表达的HBsAg、HBcAg强度无明显相关性,r分别为0.04和-0.15,P>0.05。肝癌组织中APOBEC3G也有表达,但未明显强于癌旁组织(P>0.05)。结论HBV慢性感染肝细胞中表达增高的APOBEC3G未能有效控制病毒的活动,并可能与肝癌的发生无直接关系。
- 彭程贺永文童巧霞郭春霞
- 关键词：APOBEC3G
- 小鼠急性肝坏死模型锌指蛋白A20的变化及意义被引量：1
- 2008年
- 目的探讨锌指蛋白A20在小鼠急性肝坏死模型中的表达变化规律及意义。方法用D-氨基半乳糖(D-GalN)+内毒素(LPS)联合制备小鼠急性肝坏死模型。将BalB/C小鼠随机分为正常对照组和模型组,于不同时间点取肝组织,采用苏木素-伊红(HE)染色光镜下观察肝组织病理学变化,免疫组化SP法检测肝细胞A20的表达情况。结果A20在正常对照组小鼠肝细胞中无表达。模型组小鼠在注射D-GalN和LPS后1h肝细胞开始表达A20;2h时表达水平迅速上升达峰值,Constantine半定量评分为4.33分,A20染色阳性肝细胞达20%～45%,主要分布在小叶间静脉周围;3h时A20表达下降;7h时降至难以检测水平。在肝坏死期,A20染色阳性肝细胞仍部分存活,而A20染色阴性肝细胞则大片坏死。结论在小鼠急性肝坏死模型出现大量肝细胞坏死前,A20在肝细胞中表达水平快速上升至高峰;当肝细胞大量坏死时,A20表达水平降至极低。A20在控制炎症反应、保护肝细胞免受损伤方面发挥了作用。
- 贺永文赖玲玲郭春霞李淑莉王华
- 关键词：锌指蛋白A20急性肝坏死动物模型
- 铜绿假单胞菌外膜蛋白D_2与亚胺培南耐药的关系
- 2007年
- 目的制备铜绿假单胞菌(PA)的外膜蛋白(Opr)D_2多克隆抗体,探讨OprD_2缺失与亚胺培南耐药的关系。方法常规酚-氯仿法提取PA的基因组DNA,PCR扩增OprD_2基因,构建原核表达质粒pRSET-OprD_2,在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达目的蛋白,胶回收后制备兔多克隆抗体,应用该抗体检测临床分离的32株PA OprD_2的表达情况。结果成功构建了OprD_2原核表达载体,制备了特异性好的OprD_2多克隆抗体。蛋白印迹法检测27株临床分离的耐亚胺培南PA,20株(74.1%)OprD_2表达缺失,5株(18.5%)OprD_2表达明显减少,2株(7.4%)OprD_2表达正常。结论临床分离的PA OprD_2表达的缺失或减少是PA对亚胺培南耐药的主要机制之一。
- 郭春霞贺永文潘延凤李淑莉王华
- 关键词：铜绿假单胞菌外膜蛋白多克隆抗体亚胺培南耐药性
- 慢性乙肝外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平与HBV病毒及IFN-γ关系的研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC)APOBEC3G mRNA的水平,以及其与IFN-γ mRNA、血清HBV病毒载量及ALT的关系。方法用实时荧光定量RT-PCR的方法检测27例慢性乙肝患者以及16名健康人PMBC中APOBEC3G和IFN-γ mRNA的水平,并分别检测每个乙肝患者血清HBV病毒载量及肝功能ALT。结果慢性乙肝患者PBMC中APOBEC3G mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有显著性(P<0.01),IFN-γ mRNA无明显增高,A3G还与患者血清中的病毒载量呈正相关(r=0.73,P<0.01),但与IFN-γ及ALT水平无关(P>0.05)。结论表达增高的APOBEC3G蛋白可能只是HBV慢性感染的伴随表现,APOBEC3G蛋白是否具有抗HBV临床应用价值,还需要更加深入的研究探讨。
- 彭程贺永文揭盛华郭春霞
- 关键词：APOBEC3G免疫逃避
- 慢性乙肝患者外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA表达的水平及意义被引量：4
- 2007年
- 目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)APOBEC3G mRNA表达水平与乙肝病毒(HBV)慢性感染的关系。方法用实时荧光相对定量RT-PCR的方法检测27例慢性乙肝患者以及16名健康人PBMC中APOBEC3G mRNA的水平,同时检测乙肝患者外周血HBV病毒载量及肝功能ALT。结果慢性乙肝患者PBMC中APOBEC3G mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),且与外周血HBV病毒载量成正相关(r=0.73,P<0.01),与ALT水平无明显相关性(P>0.05)。结论APOBEC3G在人体内对HBV复制的影响可能不是直接的抑制作用。
- 彭程贺永文郭春霞曾令兰翁志宏罗端德
- 关键词：乙肝病毒APOBEC3G核细胞
- 商陆抗病毒蛋白不同结构域的抗乙型肝炎病毒活性
- 2010年
- 目的比较全长和不同片段缺失型商陆抗病毒蛋白（PAP）基因真核表达质粒体外抗HBV作用及其细胞毒性作用。方法将全长和不同片段缺失型PAP基因真核表达质粒用脂质体转染HepG2．2．15细胞，收获生长良好的HepG2．2．15细胞，转染前1d，接种于24孔培养细胞板，培养20h后，待细胞密度达到40％～50％时进行转染。细胞随机分为4组：pXF3H组，转染空质粒pXF3H作为对照；pXF3H—PAP12组，转染全长PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP12；pXF3H-PAP14组，转染C端缺失25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP141;pXF3HPAP34组，转染既缺失N端69个氨基酸又缺失C端25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H—PAP34。转染的质粒剂量为每孔1．0μg，终浓度为2．0μg／ml，质粒DNA（μg）和脂质体（μl）的比例为1：2．5，转染72h后收集细胞及培养上清液。酶联免疫吸附法检测培养上清液HBsAg和HBeAg，荧光定量PCR检测HBV DNA水平，四甲基偶氮唑盐比色法检测各质粒对转染细胞的毒性作用。应用SPSS12．0软件包处理数据，两样本均数的比较采用t检验，率的比较采用Х^2检验。结果对HBsAg、HBeAg、HBV DNA的抑制率，pXF3H—PAP14组分别为56．3％、75．8％和61．7％，pXF3H—PAP12组分别为61．4％、84．2％和63．2％，两组间差异无统计学意义。但pXF3H-PAP14组细胞毒性（抑制率为10．2％）明显低于pXF3H—PAP12组（抑制率为27．1％），Х^2=7．7，P〈0．01。pXF3H-PAP34组无细胞毒性，但其抗HBV作用也丧失，对HBsAg、HBeAg、HBV DNA的抑制率分别为7．8％、11．0％、20．5％。结论PAP的C端25个氨基酸与细胞毒性相关，与抗HBV活性无关；PAP的N端69个氨基酸与抗HBV活性相关。
- 郭春霞贺永文彭程雷延昌李文庭
- 关键词：抗病毒药
- 外周血单个核细胞APOBEC3G mRNA水平与乙肝病毒慢性感染关系的研究
- 2007年
- 【目的】探讨外周血单个核细胞(PBMC)APOBEC3G mRNA水平与乙肝病毒(HBV)慢性感染的关系。【方法】用实时荧光相对定量RT-PCR的方法检测27例慢性乙肝患者以及16名健康人PBMC中APOBEC3G mRNA的水平,同时检测乙肝患者外周血HBV病毒载量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)。【结果】慢性乙肝患者PBMC中APOBEC3G mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有显著性(P<0.01),且与外周血HBV病毒载量成正相关(r=0.73,P<0.01),与ALT水平无明显相关性(P>0.05)。【结论】APO-BEC3G在人体内对HBV复制的影响可能不是直接的抑制作用。
- 彭程贺永文郭春霞曾令兰翁志宏罗端德
- 关键词：单核细胞
- 商陆抗病毒蛋白在急性人乙型肝炎病毒感染小鼠体内的抑制作用
- 2010年
- 目的探讨商陆抗病毒蛋白（PAP）在急性HBV感染小鼠模型体内抗HBV的效果。方法通过尾静脉注射具有复制能力的HBV真核表达质粒来建立小鼠急性HBV感染模型，根据注射后第1天小鼠血清HBsAg和HBeAg水平，从35只小鼠中选出24只进行配对，分为PAP治疗组（腹腔注射0．25mg／kgPAP）和对照组。于PAP注射前、注射后第1、3、5、7天，时问分辨免疫荧光分析法检测小融血清HBsAg、HBeAg和抗HBc水平，荧光定量PCR检测小鼠血清HBVDNA水平。注射后第7天HE染色检测肝组织病理变化，免疫组织化学检测肝组织HBsAg、HBeAg表达。采用配对t检验进行统计学分析。结果与对照组相比，在PAP腹腔注射后第1、3、5天对HBsAg的抑制率分别为23％（t=116．3，P〈O．05）、47％（t=38．2，P〈0．05）、68％（t=23．7，P〈0．05），对HBeAg的抑制率分别为36％（t=34．2，P〈0．05）、55％（t=61．6，P〈0．05）、83％（t=98．8，P〈0．05），对HBVDNA的抑制率分别为70．7％（t=6．6，P〈0．05）、86．9％（t=5．9，P〈0．05）、95．2％（t=36．6，P〈0．05）、95．3％（t=19．7，P〈0．05）。结论0．25mg／kg剂量的PAP在急性HBV感染小鼠模型体内对血清和肝组织的HBsAg、HBeAg的表达及HBVDNA的复制均有明显的抑制效果。
- 郭春霞贺永文彭程雷延昌翁志宏
- 关键词：商陆抗病毒药(中药)乙型疾病模型病毒
