- 牛新孢子虫病LAMP检测方法的建立被引量：11
- 2009年
- 为建立一种快捷、灵敏的牛新孢子虫病检测方法,根据GenBank上登录的新孢子虫NcSAG1基因(AF132217)序列设计合成了2对环介导等温扩增(LAMP)特异引物,建立了检测牛新孢子虫病的LAMP技术,并优化了LAMP的各反应条件,进行了敏感性和特异性试验。结果显示,LAMP方法扩增牛新孢子虫的电泳产物呈特征性梯状条带,显色反应呈现绿色荧光,酶切鉴定出现目的条带,LAMP方法检测的敏感性为5×105copies/μL;特异性试验显示,新孢子虫检测管显色后呈阳性,而瑟氏泰勒虫、弓形虫和附红细胞体等对照组均呈阴性。表明,本研究建立的LAMP方法具有灵敏、特异、快速等优点,适合于牛新孢子虫病的检测。
- 金超贾立军曹世诺栾杨王娜李月梅张守发
- 关键词：犬新孢子虫环介导等温扩增
- 弓形虫ROP4基因的克隆及原核表达载体的构建
- 2010年
- 其木格陈健贾立军李月梅金超张守发
- 关键词：原核表达载体弓形虫克隆有核细胞宿主细胞红细胞
- 猪附红细胞体病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用
- 本研究以纯化的猪附红细胞体特异性抗原作为包被抗原，在建立猪附红细胞体病间接ELISA检测方法的基础上进行了各反应参数的优化，确定了各参数的最适反应条件，并初步组装成试剂盒。组装的试剂盒抗原最佳包被浓度为30μg/mL，被...
- 张守发齐楷贾立军梁晚枫丛艳昭王娜金超
- 关键词：附红细胞体病特异性抗原
- 猪附红细胞体病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用
- 本研究以纯化的猪附红细胞体特异性抗原作为包被抗原,在建立猪附红细胞体病间接ELISA检测方法的基础上进行了各反应参数的优化,确定了各参数的最适反应条件,并初步组装成试剂盒。组装的试剂盒抗原最佳包被浓度为30μg/mL,被...
- 张守发齐楷贾立军梁晚枫丛艳昭王娜金超
- 关键词：猪附红细胞体间接ELISA试剂盒
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫P23-33融合基因重组腺病毒的构建及免疫学初步评价
- 牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫(Theileria sergenti)寄生于牛体内引起的以高热、贫血、出血、消瘦和体表淋巴结肿大为主要临床症状的一种血液原虫病。近年来,牛瑟氏泰勒虫病在我国的流行区域逐渐扩大...
- 金超
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫重组腺病毒动物免疫
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫HSP70基因的克隆及原核表达
- 2010年
- 根据GenBank(D12692.1)上发表的牛瑟氏泰勒虫HSP70基因序列设计、合成1对特异性的引物,采用PCR方法扩增牛瑟氏泰勒虫HSP70基因片段,将扩增产物与pMD18-Tsimple载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后测序;用pGEX-4T-1表达载体构建重组质粒pGEX-HSP70,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE、Western-blot分析。结果表明:扩增的HSP70基因与D12692.1序列同源性为99.3%;表达的融合蛋白分子质量约为68ku,而且可与牛瑟氏泰勒虫阳性血清发生特异性反应。
- 金超贾立军薛书江王娜钱年超张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫HSP70克隆原核表达
- 犬附红细胞体抗原分析被引量：2
- 2009年
- [目的]为了解犬附红细胞体抗原特性。[方法]对犬附红细胞体进行体外培养,培养后对解离的犬附红细胞体经超声波裂解,制备粗提抗原并提纯,对所提抗原进行SDS-PAGE及免疫印迹分析。[结果]犬附红细胞体抗原在电泳图谱上出现了3条主蛋白带,其分子量分别为66、32和25 kD,其中32和25 kD的抗原具有较好的免疫性,且不与犬附红细胞体阴性血清发生交叉反应,具有较好的特异性。[结论]该研究为犬附红细胞体的抗原成分及犬附红细胞体病的免疫学诊断等研究奠定了基础。
- 齐楷贾立军张守发梁晚枫丛艳昭王娜金超
- 关键词：犬附红细胞体抗原分析免疫印迹
- 延边地区滑雪运动参加者的体验价值与行为意向关系研究
- 随着中国成功申办2022年北京冬季奥运会，全国全民对冬季运动掀起一股前所未有的高潮，各项冬季运动项目蓬勃发展.而滑雪运动作为冬季项目深受全国人民的热爱，“三亿人上冰雪”的号召也带动了全国人民参与滑雪运动的浪潮。那么如何利...
- 金超
- 文献传递
- 牛新孢子虫LAMP检测方法的建立
- 为建立一种快捷、灵敏的牛新孢子虫检测方法,本研究根据GenBank上发表的新孢子虫NcSAG1基因(AF132217)序列设计合成两对LAMP特异引物,建立了检测牛新孢子虫环介导等温扩增(LAMP)技术,并优化了LAMP...
- 金超贾立军曹世诺张守发
- 文献传递
- 牛瑟氏泰勒虫不同靶基因PCR检测方法的比较被引量：4
- 2011年
- 为筛选出检测牛瑟氏泰勒虫更为特异、敏感的PCR方法,本试验以牛瑟氏泰勒虫p23和p33基因、HSP70基因及18S rRNA基因为靶基因进行PCR检测,并从其敏感性、特异性和临床样本检出率等方面进行了比较。结果显示,4种靶基因引物对牛瑟氏泰勒虫的检测均有较高的特异性,当牛瑟氏泰勒虫基因组DNA浓度为127 ng/μL时,p23、p33、HSP70及18S rRNA4种基因的最小检测量分别为1×105、1×105、1×104和1×106copies/μL;检测临床样本阳性检出率分别为30.19%(16/53)、39.62%(21/53)、47.17%(25/53)和54.72%(29/53)。表明以18SrRNA基因为靶基因的PCR方法从敏感性和临床检出率上明显优于其他3种基因。
- 金超贾立军王妍王娜莫添添张守发
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫P33HSP70RRNA
