闫宝龙
- 作品数：9 被引量：4H指数：1
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- 捻转血矛线虫ZJ株疫苗候选抗原H11亚型基因H11-4的克隆及序列分析被引量：1
- 2013年
- 微粒体氨肽酶H11天然提取物是目前捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)防治研究中最好的疫苗候选抗原之一,但其重组形式均不能提供有效的免疫保护效果;同时报道H11蛋白存在多种亚型,推测其某种亚型或亚型组合可能在天然提取物参与免疫保护中起了关键作用。本试验参考NCBI公布的H.contortus H11-4基因序列,设计2对特异性引物,以H.contortus ZJ株总RNA为模板,利用RT-PCR技术分段扩增出该基因的部分片段,并进行T-A克隆。测序正确后,利用含有不同片段的阳性质粒经BamHⅠ/NcoⅠ消化,连接后获得H11-4基因的全长cDNA序列。测序结果显示成功获得H11-4基因,开放阅读框大小为2 916bp,与NCBI中公布的核苷酸序列同源性为97.8%,氨基酸序列同源性为97.6%。生物信息学分析,已获得的H11-4与H11(H11-3)亚型氨基酸序列高度同源,且具有保守糖基化位点、相对保守的跨膜区与微粒体氨肽酶活性中心锌指基序。为进一步分析H11天然提取物各亚型在参与免疫保护的机制和角色分工奠定了基础。
- 段丽君周前进张红丽杨怡闫宝龙杜爱芳
- 关键词：捻转血矛线虫
- 基于18S rRNA基因的猪旋毛虫检测试剂盒及应用
- 本发明提供一种基于18SrRNA基因的猪旋毛虫检测试剂盒，由无菌去离子水、PCR反应液、TaqDNA聚合酶、GoldViewDNA染料、溴酚蓝上样缓冲液、标准品、对照品组成。本发明试剂盒即可快速、准确地检测出被检标本中的...
- 杜爱芳俞颖超闫宝龙蓝丽华
- 文献传递
- 禽传染性支气管炎病毒鸡胚连续传代后3'端7 kb编码区核酸变异特性被引量：2
- 2010年
- CK/CH/LHLJ/04V在鸡胚上连续传代后,其致病力、免疫原性和组织嗜性均发生了改变。为了研究其生物学特性变化的分子特征,通过RT-PCR的方法扩增出4个不同代次(P3、P40、P70、P110)的毒株的3'端7kb区域,克隆于pMD18-T中进行测序。序列分析表明CK/CH/LHLJ/04V病毒群中含有基因突变的各种亚群。3'端7kb区域的氨基酸替换主要发生在S蛋白。P3和P40中,S1亚基中的氨基酸替换,同样发生在病毒传代过程中的其它亚群中。但是P70和P110中的另一些氨基酸替换却仅发生在某些亚群中。P70和P110的大部分亚群中,3'非编码区出现109bp的缺失,这可能与病毒的复制、转录和致病力有关。病毒3'端7kb区域的变化很可能导致了病毒毒力的减弱、免疫原性的降低和组织嗜性的变化。
- 闫宝龙张晓楠龚利洋韩宗玺邵昱昊孔宪刚刘胜旺
- 关键词：禽传染性支气管炎病毒分子特性
- Hc-fau基因的获得及其在捻转血矛线虫滞育过程中的调节作用
- 捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)是寄生于牛、羊等反刍动物真胃内消化道寄生虫，以血液为食，给畜牧业造成极大的经济损失。“滞育”是虫体抵抗外界环境压力的有效措施，也是捻转血矛线虫病呈“春季高潮”的主要...
- 闫宝龙
- 关键词：捻转血矛线虫
- 捻转血矛线虫ZJ株滞育虫体的获得及其形态特征
- 2015年
- 为进一步研究寄生性线虫的滞育机制,参照Adams(1986)的方法,通过瘤胃灌注,将捻转血矛线虫感染性三期幼虫攻入绵羊体内,对绵羊进行处理后,获得捻转血矛线虫滞育虫体。滞育虫体发育程度一致,虫体长(1 067±97)μm(n=18),肠道细胞中含有大量棒状结晶块;性腺开始发育,出现雌驱器原基;颈部出现颈乳突。通过温度检测分析,温度可能不是滞育现象的主要刺激因素。棒状结晶块可以被DAPI特异性着色,其成分可能含有核酸。本试验将为进一步研究捻转血矛线虫的滞育机制及其防治奠定基础。
- 闫宝龙杨怡郭筱璐陈学秋杜爱芳
- 关键词：捻转血矛线虫滞育
- 利用mRNA差异显示技术分离捻转血矛线虫感染性三期幼虫抗干燥相关基因被引量：1
- 2013年
- 捻转血矛线虫感染性三期幼虫对干燥环境具有很强的抵抗力,环境适宜时可恢复到正常状态并继续感染宿主。为初步探讨捻转血矛线虫感染性三期幼虫抗干燥的分子机制,试验对该期幼虫施以不同干燥条件的处理,筛选出虫体存活率达到90%的干燥条件。在筛选到的条件下(相对湿度为50%,时间为60h)处理虫体,采用mRNA差异显示技术分析干燥环境下培养的虫体和正常虫体的mRNA表达差异。经验证获得了48个差异表达的EST序列,其中25个(52.08%)序列与现有捻转血矛线虫基因组数据库有高度同源性;15个(31.25%)序列与已知线虫的cDNA序列或基因组序列有较高同源性;9个(18.75%)序列与其他线虫已知蛋白质氨基酸序列同源性较高。差异表达序列AF-U01C与多种线虫的蛋白酶体β亚基家族成员同源性达90%,差异表达序列AG-U01A与多种线虫的β酮脂酰CoA硫解酶(3-ketoacyl-CoA thiolase)同源性达65%。结果为进一步研究寄生性线虫抗干燥机制奠定基础。
- 陈学秋马羽洁周前进张红丽杨怡闫宝龙杜爱芳
- 关键词：MRNA差异显示技术
- 基于18S rRNA基因的猪旋毛虫检测试剂盒及应用
- 本发明提供一种基于18S rRNA基因的猪旋毛虫检测试剂盒，由无菌去离子水、PCR反应液、<I>Taq</I> DNA聚合酶、GoldView DNA染料、溴酚蓝上样缓冲液、标准品、对照品组成。本发明试剂盒即可快速、准确...
- 杜爱芳俞颖超闫宝龙蓝丽华
- 文献传递
- 捻转血矛线虫感染性三期幼虫gst基因的筛选及抗干燥功能分析
- 2015年
- 为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析干燥相关表达基因,本试验利用mRNA差异显示技术得到了捻转血矛线虫干燥相关基因,通过相对荧光定量PCR验证所获基因的表达情况,并在秀丽隐杆线虫中通过RNA干扰抑制相关同源基因的表达检测干燥后复苏虫体生存率以研究基因抗干燥功能。结果显示,差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸同源性为94%。对秀丽隐杆线虫Ce-gst-7基因进行RNA干扰后,虫体在干燥后的生存率降低,证明gst基因在线虫中有抗干燥功能。
- 马羽洁陈学秋闫宝龙杨怡郭筱璐杜爱芳
- 关键词：GST
- 鸡传染性支气管炎病毒部分中国代表株基因组序列分析及致病性研究
- 近年来,在国内虽然已广泛的使用了H120的IBV弱毒疫苗,但嗜肾型IBV毒株还是频繁的出现,并且2007年分离到了Mass型突变株,为了从全基因水平上阐述各流行毒株的特点,研究国内近年来流行的IBV的血清型和H120疫苗...
- 闫宝龙
- 关键词：IBV免疫保护突变全基因组
- 文献传递
