闫永宏
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：解放军第251医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞增殖及转化生长因子-β_1、γ-干扰素分泌的诱导作用被引量：3
- 2009年
- 目的:阐明细菌内毒素的主要致病成分脂多糖(LPS)对体外培养人真皮成纤维细胞增殖及转化生长因子-β1(TGF-β1)、γ-干扰素(IFN-γ)分泌的影响。方法:取正常及瘢痕皮肤行成纤维细胞培养后分为2个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1μg/mL大肠杆菌LPS(E.coli055:B5)培养,对照组为DMEM培养,并对刺激后细胞进行传代至表型稳定(第8代)。应用MTT比色分析法检测细胞增殖率的变化。分别于接种后8、24及48h收集培养细胞上清液,应用酶联免疫吸附测定分析法测定培养细胞上清TGF-β1、IFN-γ分泌量的变化。结果:①0.005～0.1μg/mLLPS组成纤维细胞增殖及TGF-β1的分泌增加、IFN-γ的分泌降低,随浓度增加作用增强,均在0.1μg/mL浓度点作用达高峰;②0.5及1μg/mLLPS组成纤维细胞增殖及TGF-β1的分泌下降,IFN-γ的分泌开始增加。③0.1μg/mLLPS组成纤维细胞增殖及TGF-β1、IFN-γ的分泌与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:一定浓度的LPS可能与增生性瘢痕形成有关。
- 万力李凤玉闫永宏石军任成波
- 关键词：脂多糖类细胞增殖转化生长因子-ΒΓ-干扰素
- 脂多糖对增生性瘢痕患者正常皮肤成纤维细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨脂多糖（hpopolysaccharide，LPS）对皮肤成纤维细胞增殖和I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达的影响．以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法取正常皮肤按黄勇等方法行成纤维细胞培养后，分为1个对照组及6个实验组。实验组分别与终浓度为O．005、0．010、O．050、0．100、0．500和1．000μg／ml大肠杆菌LPS（E．coli055：B5）培养，对照组为DMEM培养。分别通过MTT比色法及细胞计数法观察各组1—9d吸光度（A）值和细胞数量的变化；并对刺激后细胞进行传代，用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA及胶原酶mRNA的表达，并以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞作对照。结果与对照组比较，0．005～0．500μg/ml组A值增加，于5～9d差异有统计学意义（P〈0．05）；1．000μg／ml组A值降低，于3～9d差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，0．005～O．500μg／ml组细胞数量显著增加，于1～6d差异有统计学意义（P〈O．05）；1．000μg／ml组细胞数量显著降低，于2～9d差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组比较，0．005～O．500μg／ml组促进细胞胶原合成，且O．100μg/ml组作用达高峰（P〈O．05），1．000μg／mlLPS抑制细胞胶原合成（p〈O．05）。LPS刺激浓度在0．005～0．100μg/ml时，促进正常皮肤成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA表达，抑制胶原酶mRNA表达，且呈一定的剂量依赖性；当LPS刺激浓度为O．500μg／m1，上述作用下降；而当LPS刺激浓度到达1．000μg／ml时，抑制正常皮肤成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA表达，促进胶原酶mRNA表达。LPS刺激浓度在0．100μg／ml时．成纤维细胞I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达与同一个体增生性瘢痕组织成纤维细胞近似。结论LPS对正常人皮肤成纤维细胞增殖及I、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA
- 李凤玉贾国洪万立闫永宏石军
- 关键词：脂多糖细胞增殖信使核糖核酸成纤维细胞增生性瘢痕
- 细菌内毒素对人正常皮肤成纤维细胞表型变化的影响及意义
- 李凤玉王舒琦万立闫永宏纪文达李海赵军雒书朋
- 实验结合临床实际，从感染的角度探讨了瘢痕的形成因素，文献调研充分，综合分析正确。通过脂多糖刺激后的正常人皮肤成纤维细胞生物学特性与增生性瘢痕组织成纤维细胞生物学特性、表型特征的比较观察，探讨细菌脂多糖在烧伤后增生性瘢痕形...
- 关键词：
- 关键词：瘢痕治疗皮肤成纤维细胞
- 烧伤后传染性湿疹样皮炎的治疗体会
- 目的观察烧伤后传染性湿疹样皮炎的临床特点与治疗效果。方法对我院1990年8月—2005 年8月治疗的37例烧伤后并发传染性湿疹样皮炎的治疗进行回顾性分析。结果烧伤后传染性湿疹
- 卢青军李兆顺陈宝元闫永宏
- 文献传递
- 脂多糖对人皮肤成纤维细胞表型变化的影响及意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨被细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激后的人正常皮肤成纤维细胞的表型改变与增生性瘢痕形成的关系。方法体外培养增生性瘢痕患者瘢痕组织和人正常皮肤成纤维细胞,正常成纤维细胞分别经不同浓度(0、0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、1.000μg/ml)LPS刺激,并对刺激后细胞进行传代,通过病理学、免疫组化染色、电镜观察等方法,观察成纤维细胞表达增殖细胞核抗原(PCNA)、α1(Ⅰ)前胶原蛋白、α平滑肌肌动蛋白的规律及透射电镜下超微结构的变化,并以相同代数的瘢痕组织成纤维细胞作对照。结果经LPS刺激后,正常皮肤成纤维细胞被激活,随着刺激浓度的增加,光镜下核浆比例逐渐增大;免疫组化染色显示PCNA表达阳性细胞逐渐减少,α1(I)前胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白阳性细胞逐渐增多;电镜下显示细胞形态多样化,核浆比例增加,核膜变得不规则,胞浆内粗面内质网和高尔基复合体进一步增多,微丝微管增加,肌微丝出现。上述变化在LPS浓度为0.100μg/ml时最明显,接近瘢痕组织成纤维细胞,表明成纤维细胞逐渐向增殖表型、合成表型或收缩表型变化。此后,随着LPS浓度继续升高,上述表型标志的表达和细胞形态均趋向于正常成纤维细胞。结论一定浓度的LPS可能与增生性瘢痕形成有关。
- 李凤玉杨红明贾国洪闫永宏万立石军
- 关键词：脂多糖类成纤维细胞瘢痕
- 内毒素对人正常皮肤成纤维细胞表型变化的影响及意义被引量：4
- 2010年
- 目的:研究细菌内毒素(LPS)刺激后的正常皮肤成纤维细胞的表型改变,探讨其与增生性瘢痕形成的关系。方法:体外培养增生性瘢痕患者瘢痕组织和正常皮肤成纤维细胞,正常成纤维细胞分别经不同浓度LPS(0、0.005、0.010、0.050、0.100、0.500、1.000μg/ml)刺激,并对刺激后细胞进行传代,通过病理学、免疫组化染色、电镜观察等方法,观察成纤维细胞表达增殖细胞核抗原(PCNA)、α_1(Ⅰ)前胶原蛋白、α平滑肌肌动蛋白的规律及透射电镜下超微结构的变化,并以相同代数的瘢痕组织成纤维细胞作对照。结果:瘢痕组织成纤维细胞光镜下核浆比例大;免疫组织化学染色显示PCNA、α1(Ⅰ)前胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白表达阳性细胞比例分别为0.88±0.15、0.42±0.11和0.38±0.13;电镜下显示细胞形态多样化,核膜不规则,胞浆内粗面内质网和高尔基复合体多,伴微丝、微管及肌微丝出现。正常皮肤成纤维细胞PCNA阳性细胞比例为0.37±0.09,未见α1(Ⅰ)前胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白表达。正常皮肤成纤维细胞经LPS刺激后,随着刺激浓度的增加,光镜下核浆比例逐渐增大;免疫组织化学染色显示PCNA、α1(Ⅰ)前胶原蛋白阳性细胞和α平滑肌肌动蛋白表达阳性细胞逐渐增多;电镜下显示细胞形态发生多样化,核浆比例增加,核膜变得不规则,胞浆内粗面内质网和高尔基复合体进一步增多,微丝微管增加,肌微丝出现。上述变化在LPS 0.1ug/ml时最明显[PCNA、α1(Ⅰ)前胶原蛋白和α平滑肌肌动蛋白阳性细胞比例分别为:0.91±0.15、0.40±0.15和0.44士0.13],接近瘢痕组织成纤维细胞,表明成纤维细胞逐渐向增殖表型、合成型或收缩表型变化。此后,随着LPS浓度继续升高,上述表型标志的表达和细胞形态均趋向于正常成纤维细胞。结论:LPS刺激后皮成纤维细胞表型变化规律,提示LPS可能与增生性瘢痕形成有关。
- 李凤玉杨红明贾国洪闫永宏万立石军
- 关键词：脂多糖表型成纤维细胞增生性瘢痕
- 脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对正常人皮肤成纤维细胞胶原合成的影响,以阐明LPS在皮肤创伤愈合中的可能作用。方法:体外培养正常人皮肤成纤维细胞,采用3H-脯氨酸掺入法观察不同浓度(0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5和1.0μg.ml-1)的LPS对成纤维细胞胶原合成的影响。结果:LPS刺激浓度在0.005μg.ml-1时,皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成增加;随着刺激浓度增加,刺激作用增强;但当LPS浓度为0.5μg.ml-1时,促胶原合成作用开始降低;当浓度达到1.0μg.ml-1时则呈现抑制效应。结论:在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞胶原合成,表明LPS在皮肤创伤愈合中可能具有重要作用。
- 纪少军万立李凤玉贾国洪闫永宏石军
- 关键词：脂多糖胶原成纤维细胞创面愈合
