魏威
- 作品数：25 被引量：70H指数：5
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广州市科技支撑计划项目南宁市科学研究与技术开发计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌耐药性分析及耐药基因检测被引量：1
- 2015年
- 目的分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌的耐药性,并检测相关耐药基因,为临床合理用药提供参考。方法采用纸片扩散法对乐山市中医医院的产ESBLs大肠杆菌分离、确认;采用纸片扩散法和自动化仪器法对筛选出来的菌株进行药敏试验,探讨产ESBLs大肠杆菌菌株对临床常用药物的耐受情况;采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因TEM、SHV和CTX-M-1、CTX-M-2,了解分离得到的菌株的耐药遗传学特征,获得医院耐药菌株的主要基因型。结果经患者的痰液、消化液、血液及切口脓液等处分离得到大肠杆菌164株,其中产ESBLs 104株。产ESBLs大肠杆菌对头孢类抗菌药物的耐药率较高,其中头孢他啶、头孢拉啶、头孢噻啶的耐药率均为100.0%;对β-内酰胺类抗菌药物耐药率较低,且对亚胺培南、美罗培南的耐药率均为0,产ESBLs菌株对常见抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株的耐药率;产ESBLs菌中检出CTX-M-2型41株(39.5%)、CTX-M-1型30株(28.9%)、SHV型18株(17.3%)和TEM型15株(14.4%)。结论产ESBLs大肠杆菌在感染患者病原菌中占据一定的比重,其对常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs大肠杆菌,临床应加强对产ESBLs大肠杆菌的认识,以指导临床治疗。
- 周翼魏威
- 关键词：Β-内酰胺酶大肠杆菌耐药分析耐药基因
- 人IgE重链3-4区蛋白的表达、纯化及功能分析被引量：1
- 2009年
- 目的通过基因重组的方法表达IgE Cε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的相互作用,并用重组蛋白免疫小鼠制备血清。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgE Cε3-Cε4cDNA片段,克隆至pET28a(+)构建原核表达载体IgE Cε3-Cε4-pET28a(+),将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达IgE Cε3-Cε4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的结合能力,并用UniCAP 100全自动分析检测仪对重组抗原进行定量检测与鉴定;用表达蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗鼠血清,用Western-blot法对多克隆抗体进行鉴定。结果成功调取的人IgE Cε3-Cε4区基因与已报道的序列相一致;获得的IgECε3-Cε4区蛋白相对分子质量(Mr)同预期的结果相一致;IgE Cε3-Cε4能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠ受体;通过UniCAP 100全自动分析检测仪能够检测到重组抗原并精确到国际单位;免疫鼠血清多抗能特异性结合天然人血清IgE。结论成功构建了IgE Cε3-Cε4-pET28a(+)表达载体,获得了能被人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠα亚基特异性识别的IgE Cε3-Cε4区蛋白,并用天然人血清IgE鉴定了多克隆抗体,为下一步单克隆抗体的制备打下了基础。
- 付琛颖曲戎梅邱国真魏威林志斌王萍王文敬李珍董文其
- 关键词：IGE
- 肿瘤坏死因子-α在脓毒症大鼠心肌损害中的表达及作用机制被引量：8
- 2014年
- 目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α在脓毒症大鼠心肌损害中的表达及其作用机制。方法将40只1月龄的健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为脓毒症组20只(盲肠结扎穿刺术脓毒症造模)、对照组20只(假手术仅开腹翻动盲肠),应用免疫组织化学法检测两组心肌中TNF-α的表达强度。电镜观察心肌损伤的病理变化,进行病理学分级和白细胞浸润分级。分析损伤心肌中TNF-α表达强度与病理分级、白细胞浸润分级的关系。结果 TNF-α在脓毒症组心肌中的表达强度明显大于对照组(P<0.01);脓毒症组心肌病理分级及白细胞浸润分级明显高于对照组(P<0.01);脓毒症组心肌中TNF-α表达的强弱与病理分级和白细胞浸润分级呈正相关。结论 TNF-α与脓毒症心肌损害密切相关,其介导的炎症在心肌损害的发生发展过程中起着重要的作用。
- 张文伟魏威曹红金辉
- 关键词：脓毒症动物造模心肌损害
- 乙型病毒性肝炎患者检测HBV基因分型、耐药变异的价值和意义被引量：2
- 2013年
- 目的通过一体化鉴定探讨乙肝病毒肝炎患者HBV基因分型和耐药变异的临床价值与意义。方法选取本院收治的73例乙肝病毒肝炎患者,以拉米夫定为首选治疗药物,以阿德福韦酯和恩替卡韦为耐药患者替代治疗药物;所有患者均取清晨空腹静脉血,利用MassARRAY Assay和实时定量PCR技术进行基因分型和耐药变异测定,对其用药情况进行为期3年的追踪分析。结果基因分型:本组病例包括B型40例(54.79%)、C型32例(43.84%)、及D型1例(1.37%),未见其他基因分型患者。耐药变异:在为期3年的追踪治疗中,共发生耐药变异33例(45.21%),其中B型变异率27.5%(11/40),C型变异率68.75%(22/32),D型无变异,各基因型之间差异显著(P<0.05);治疗1、2、3年的耐药变异率分别为3例(4.11%)、9例(27.27%)、21例(63.64%),随着治疗时间的延长显著升高(P<0.05);B型基因以YVDD变异为主,占81.82%(9/11),其余2例为YIDD变异(18.18%),C型基因均为YIDD变异,其变异类型差异显著(P<0.05)。结论乙肝病毒肝炎患者HBV基因分型和耐药变异具有一定的相关性,对乙型病毒性肝炎的抗病毒治疗效果有一定影响,利用MassARR.AY Assay高通量技术建立HBV基因分型、耐药变异、前C区/BCP区突变检测技术,可为乙型病毒性肝炎的临床诊治提供指导性策略。
- 陈海雁张桂花魏威罗锦彬黄舒婷
- 关键词：HBV基因分型耐药变异ASSAY核苷(酸)类似物
- 重组人源细胞珠蛋白单抗制备及检测方法建立被引量：2
- 2011年
- 目的制备重组人源细胞珠蛋白(recombinanthumanCytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备。方法用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。结果筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Western-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应。本方法灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10～1250ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%。结论成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础。
- 汤金萍魏威王萍李珍李莹董文其
- 关键词：单克隆抗体ELISA双抗体夹心法
- HIV-1核心抗原p24基因的表达、纯化及应用研究被引量：2
- 2013年
- 目的在原核系统中表达全长HIV-1 p24抗原,对其抗原性进行鉴定,探讨其对HIV早期诊断的价值。方法利用PCR技术从含有HIV-1 gag基因质粒PTM-1中扩增p24蛋白基因,通过酶切消化后连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导,表达p24抗原。通过ELISA和Western blotting(WB)法检测表达产物的免疫反应活性及特异性。结果PCR产物和构建的重组质粒pET28a-p24经双酶切均显示约690 bpDNA片段,与预期p24抗原全基因片段大小一致。SDS-PAGE电泳可见纯化蛋白为1条相对分子量约26×103Mr的外源表达蛋白带,与预期大小一致。ELISA及WB实验证实表达的p24抗原具有较好的活性及特异性。时间分辨荧光免疫双抗体夹心法显示与市售p24抗原线性一致。结论构建了HIV-1 p24/pET28a原核高效表达系统,表达产物与市售的p24抗原具有相似的抗原性。
- 刘华琴李鹏吴英松李珍魏威董文其王萍
- 关键词：HIV-1基因表达时间分辨荧光免疫分析
- 帕金森病小鼠模型中型多棘神经元突触前功能异常的实验研究
- 帕金森氏病(Parkinson's disease，PD)是第二大神经退行性疾病，临床上以震颤、肌肉僵硬、行动迟缓以及身体姿势不稳为特征。黑质致密部(substantia nigra pars compacta，SNc)...
- 魏威
- 关键词：帕金森病行为学卡方检验
- IgE低亲和力受体基因的克隆、表达及初步鉴定
- 2010年
- 目的利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FcεRⅡ)基因的原核表达系统。方法用RT-PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FcεRⅡcDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体FcεRⅡ-pGEX-4T-1,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta,诱导表达FcεRⅡ蛋白,通过割胶回收纯化,并用Western blot检测FcεRⅡ的表达。结果测序表明所扩增FcεRⅡcDNA基因,与已报道的序列一致。获得的重组蛋白经Western blot鉴定可以和人IgE特异性结合。结论成功构建了FcεRⅡ-pGEX-4T-1表达载体,获得了能和人IgE特异性结合的重组蛋白,为下一步FcεRⅡ单克隆抗体的制备及应用研究打下了基础。
- 尹晴陈白虹邱国真付琛颖董文其魏威李珍朱勇王萍
- 关键词：IGE
- 一种用于防治肝硬化的人源细胞珠蛋白及其制备方法
- 本发明提供了一种人源细胞珠蛋白的表达质粒，该质粒是将SEQ NO.1所示的DNA片段用NcoI和HindIII酶切后克隆到载体pET－32a的表达区得到。本发明所述人源细胞珠蛋白的表达质粒可在原核宿主中表达融合蛋白，该融...
- 魏威董文其
- 文献传递
- 一种重组人源细胞株蛋白在制备预防或治疗肺纤维化疾病的药物中的用途
- 本发明提供了一种细胞株蛋白在制备预防或治疗哺乳动物肺纤维化疾病的药物中的用途。其中，所述细胞株蛋白为人源细胞株蛋白，所述用途为预防或治疗特发性肺纤维化疾病中的用途。本发明提供的重组人源Cygb意外地其可以治疗特发性肺纤维...
- 董文其林忠顺李珍王萍魏威
