严玉娟
- 作品数：7 被引量：4H指数：2
- 供职机构：苏州市第五人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 一种随机引物联合多特异性DNA片段检测结核分支杆菌的新方法
- <正>目的针对目前结核性疾病实验室诊断的局限性,探索一种更为敏感和特异的结核分枝杆菌DNA检测新方法。方法选取10株江苏地区流行的结核分支杆菌(MTB)菌株,选取临床其他常见菌株及分枝杆菌菌株作为对照组,分别提取DNA作...
- 黄威邢益平严友德严玉娟艾月梅
- 文献传递
- 一种随机引物联合多特异性DNA片段检测结核分支杆菌的新方法被引量：2
- 2014年
- 目的:针对目前结核性疾病实验室诊断的局限性,探索一种更为敏感和特异的结核分枝杆菌DNA检测新方法。方法:选取10株江苏地区流行的结核分支杆菌(MTB)菌株,选取临床其他常见菌株及分枝杆菌菌株作为对照组,分别提取DNA作为随机引物的模板。参考国内、外文献设计12条随机引物,并分别对MTB及对照菌株进行单个引物随机扩增,2%的琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行分离并切胶纯化,通过TA克隆将纯化片段连接到质粒pEASYTM-T5 Zero并进行测序,通过BLAST-nr比对验证是否为MTB DNA片段。按照所确定的MTB片段序列,在其内部设计、合成一对特异性引物。用此特异性引物扩增对应的随机引物扩增产物,获得MTB特异性条带图谱。并将该方法检测的敏感性和特异性与临床上常用的real-time PCR进行比较。结果:经BLAST-nr比对,随机引物IS986F,S535及IS986R扩增的条带与MTB DNA有高度同源性(均为99%)。随机引物IS986F、S535和IS986R分别联合其特异性引物可以检测稀释105倍、105倍和103倍的MTB DNA,其特异性分别为100%、90%和80%。常规real-time PCR可检测出稀释104倍的MTB DNA。结论:随机引物IS986F联合其特异性引物检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性优于S535、IS986R两组,特异性为100%,且灵敏度优于常规real-time PCR法。
- 黄威邢益平严有德严玉娟艾月梅
- 关键词：结核分支杆菌RAPDPCR
- 苏州地区142例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者的临床特征分析
- 2022年
- 目的:分析苏州地区新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者的临床特征。方法:回顾性分析2022年2月14日—3月10日苏州市第五人民医院收治的142例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者,统计患者的资料包括基础情况、临床表现、新型冠状病毒疫苗接种和实验室检查情况等,采用SPSS 28.0软件进行统计处理,采用Spearman法进行相关性分析。结果:142例新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者的临床表现呈现多样化,其中咳嗽77例(占54.23%),咳痰50例(占35.21%),发热49例(占34.51%),咽痛咽干43例(占30.28%);患者的临床分型与年龄段呈正相关(ρ=0.315,P=0.001,P<0.05),提示年龄越大,感染奥密克戎变异株后临床分型越严重;新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者中,99.30%采用中医中药治疗,其中仅有1例未采用中医中药治疗;其症状好转约在(2.59±2.38)d,症状消失约在(8.17±3.11)d,住院周期约为(13.18±2.79)d。结论:与其他变异株比较,苏州地区新型冠状病毒奥密克戎变异株感染患者的临床特征(咳嗽,咳痰,发热,咽痛咽干等)存在共性;新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者的临床分型与年龄段分布呈正相关,完成疫苗全程接种和加强接种,以及采取有效的防控措施可减少变异株的传播以挽救患者的生命。
- 吴雪华钱峰许炜璐朱月萍王银铃肖丹严玉娟王月黄金龙
- 关键词：新型冠状病毒
- 随机扩增多态性技术联合荧光定量PCR检测结核分枝杆菌方法的建立与评估
- 严玉娟邪益平艾月枸刘雪
- 随机扩增多态性技术联合荧光定量高敏检测三种疱疹病毒方法的建立被引量：2
- 2017年
- 目的:建立一种随机扩增多态性技术(RAPD)联合荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)高敏定量检测单纯疱疹病毒(HSV)、人类巨细胞病毒(HCMV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)的新方法。方法:根据文献筛选出数十条随机引物,分别对三种疱疹病毒进行随机扩增,产物经2%琼脂糖凝胶电泳,选取稳定清晰条带进行分离、纯化及克隆测序,应用blast-nr比对genebank现有病毒序列,选取高于99%匹配度的基因序列作为目的片段,并在其内部用primer3.0设计特异性内引物。经过引物筛选及条件优化后建立RAPD联合q PCR检测新方法,分别检测三种疱疹病毒。结果:经过筛选,确定了HSV、HCMV、VZV扩增灵敏性及特异性最好一组引物,建立的RAPD-q PCR可分别检测出1:10~6 HSV、1:10~5 HCMV和1:10~5 VZVDNA,而单一q PCR仅能检测1:10~3 HSV、1:10~2HCMV和1:103 VZVDNA。RAPD-q PCR相比于单一q PCR灵敏性提高100-1000倍,RAPD-q PCR扩增大于1:10~5病毒DNA得到的CT值均小于22.96±0.81,与10~2 copies/μL的标准线相距远,易于区分阴性和阳性。此外,用乙型肝炎病毒及疱疹病毒互为对照未见非特异扩增,特异性好。结论:随机扩增多态性技术联合荧光定量是一种检测三种病毒高度灵敏及特异的检测方法。
- 刘雪邢益平严玉娟韩亚萍严友德张帆
- 关键词：人类巨细胞病毒水痘带状疱疹病毒SYBR
- 获得性免疫缺陷综合征合并分枝杆菌感染患者的免疫学特征与耐药性分析
- 2023年
- 目的:分析获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)患者合并结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)或非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)感染的免疫学特征及其对常用抗结核药物的耐药特点,为临床AIDS患者并发MTB或NTM感染的诊断和治疗提供参考。方法:选取2017年1月—2022年12月苏州市第五人民医院收治的44例AIDS合并MTB感染患者(设为AIDS/MTB感染组)和44例AIDS合并NTM感染患者(设为AIDS/NTB感染组)作为研究对象,采集患者的年龄、性别、免疫学检查结果,以及MTB和NTB对常用抗结核药物的药敏试验结果等信息,分析AIDS患者合并MTB或NTM感染的免疫学特征与耐药特点。结果:AIDS/MTB感染组和AIDS/NTB感染组患者的性别均以男性为主(93.18%vs97.73%),而年龄上均主要集中在30~<50岁(56.82%vs 59.09%),但2组患者在性别和年龄上的分布情况经比较其差异无统计学意义(P>0.05);AIDS/NTB感染组患者的T-SPOT检查均为阴性,AIDS/MTB感染组患者T-SPOT检查的阳性率较高;AIDS/MTB感染组患者的CD4^(+)T细胞绝对值明显高于AIDS/NTB感染组(108.4±76.7 vs36.5±22.1,P<0.05);AIDS/NTB感染组患者中检出的主要病原菌为鸟分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌,其对链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、对氨基水杨酸、阿米卡星的耐药率均大于50.00%(远高于MTB对其的耐药率),仅对丙硫异烟胺的耐药率较低(<5.00%)。结论:AIDS患者并发MTB或NTM感染好发于30~<50岁的男性,T-SPOT检查和CD4^(+)T细胞水平可以较好地对MTB感染和NTM感染进行鉴别诊断;此外,NTM感染的病原菌对多数抗结核药物耐药性较强,应尽量选用其他敏感的抗菌药物进行治疗,以保证对患者的治疗效果。
- 朱月萍黄金龙许炜璐王银玲顾赛红严玉娟王月刘锦钱峰
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征人类免疫缺陷病毒结核分枝杆菌非结核分枝杆菌免疫学特征耐药特点
