刘悦晖
- 作品数：23 被引量：91H指数：6
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝损伤模型小鼠高迁移率族蛋白-1的表达被引量：9
- 2008年
- 将刀豆蛋白A(Con A)经尾静脉注射入雄性Balb/C小鼠,建立T细胞介导的Con A急性肝损伤小鼠模型,检测模型小鼠不同时间点血清中高迁移率族蛋白1(HMGB1)及肝组织HMGB1mRNA的表达水平,并与血清中TNF-α进行对比.实验显示:在Con A注射后0～3h,小鼠血清中的未能检测出HMGB1蛋白特异带;但在4h后,检测出一条微弱的HMGB1蛋白特异带;在6～36h,均检测出一条清晰的HMGB1蛋白特异带,在8￣12h处于一个高水平状态.而正常对照组小鼠血清中未能检测HMGB1蛋白.与HMGB1动力学曲线不同,血清中TNF-α水平在Con A注射后2h就达到峰值,4h后迅速下降,8h恢复到正常范围.Con A小鼠肝细胞中HMGB1mRNA的表达在Con A注射1h后即达到峰值,是对照组的2.4倍,之后迅速回落,3～12h均低于对照组水平(0.5～0.8倍),24h后逐渐恢复正常水平.初步揭示HMGB1在Con A小鼠急性肝损伤中可能发挥重要作用,血清中HMGB1蛋白与TNF-α相比,呈现出迟发与长效的特点,HMGB1给肝细胞造成损伤有足够强度和效应时间.
- 刘洪波范学工刘悦晖张磐周蓉蓉李宁WANG Hai-chao黄建军
- 关键词：刀豆蛋白A肝损伤模型晚期炎症介质高迁移率族蛋白-1
- 贵州乙型肝炎病毒感染者病毒基因亚型研究
- 本文论述了通过调查贵州B、C基因型乙肝病毒(HBV)感染者的病毒基因亚型.方法 用PCR扩增HBV P区长309 bp的基因片段,扩增产物分别经限制性内切酶NciⅠ、VspⅠ、BstEⅡ酶切,琼脂糖胶电泳,根据酶切图谱多...
- 丁静娟刘悦晖王梅
- 关键词：肝炎病毒乙型肝炎基因亚型长度多态性
- 文献传递
- 原发性肝癌患者乙型肝炎病毒前C区联合基本核心启动子变异的分析被引量：4
- 2008年
- 目的:研究原发性肝癌患者乙型肝炎病毒前C区联合基本核心启动子变异情况及与基因型的关系。方法:收集乙型肝病毒感染者血清132份,HBVDNA均阳性,用半巢式聚合酶链反应扩增HBV前C及C基因部分片段,产物纯化后直接测序,检测前CA1896联合BCPT1762/A1764变异。用S基因PCR-RFLP方法确定HBV基因型。结果:乙型肝炎病毒前C区联合基本核心启动子变异在原发性肝癌组的阳性率为41.18%(14/34),显著高于慢性肝病组的11.22%(11/98)(P<0.01)。前C A1896联合BCP T1762/A1764变异在B基因型检出率与C基因型相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:乙型肝炎病毒前C区联合基本核心启动子变异与原发性肝癌关系密切,与基因型无相关性。
- 刘悦晖丁静娟范学工
- 关键词：原发性肝癌基因型
- 贵州省四城市乙型肝炎病毒感染者病毒基因型调查研究被引量：4
- 2006年
- 目的调查贵州省4城市乙型肝炎病毒(HBV)感染者的病毒基因型及其与临床的关系。方法选择贵阳、遵义、凯里、都匀4城市慢性HBV感染患者共786例,其中无症状携带者(ASC)346例,慢性肝炎(CH)313例,肝硬化(LC)77例,肝细胞肝癌(HCC)50例。用S基因限制性片段长度多态性确定基因型,直接测序分析B基因亚型,比较主要基因型地区分布及临床特征。结果786例中,B基因型497例(63．23%),C型275例(34．99%),A型7例(0．89%),D型7例(0．89%),未发现E、F型。B型的分布：凯里市最高(96．04%),遵义、都匀市其次(78．79%、64．52%),贵阳市最低(53．14%)。C型的分布,贵阳(45．84%)高于都匀(34．41%)、遵义(13．13%)及凯里市(3．96%),差异有统计学意义(P＜0．05或P＜0．01)。94例B型感染者中,93例为Ba(98．94%)、1例为Bj亚型。从ASC、CH、LC到HCC组,B型的分布逐渐降低,而C型在各组的分布逐渐增高。与B型相比,C型感染者年龄较大；ALT水平较高(P＜0．05)；HBeAg阳性较低(P＜0．025)。结论贵州省存在A、B、C、D 4种HBV基因型,但以B型为主,C型其次,A、D型极少。B型中又以Ba亚型为主。B、C基因型在贵州省4城市的分布有一定差异。
- 丁静娟张权彭亮刘悦晖李忠刘三都胡莲
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型限制性片段长度多态性
- 两种实验方法检测乙型肝炎病毒前C区A1896变异的比较研究
- 2007年
- 目的 建立错配PCR-限制性片段长度多态性（mPCR-RFLP）检测乙型肝炎病毒（HBV）前C区A1896变异的方法，与直接测序法比较，评估其应用价值。方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194bp的基因片段，扩增产物经限制性内切酶Bsu36Ⅰ酶切，琼脂糖凝胶电泳，根据酶切图谱多态性，建立检测HBV前CA1896变异的方法，对134份乙肝患者血清进行分析，酶切同时测序。2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性。结果 134份血清中117（87．31％）份能用酶切、109（81．34％）份能用测序成功分析HBV前CA1896状况。酶切与测序均成功的101份血清中，54份为前C区A1896变异株，47份为前C区G1896野株，酶切与测序的结果完全一致。1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异株的5个克隆子均为前C区A1896变异株；1份酶切鉴定为混合感染标本的5个克隆子中，1个为前C区A1896变异株，另外4个为前C区G1896野株。酶切分析结果与克隆测序结果完全相符。结论 与测序法相比，本方法简便、特异性强，能鉴定混合感染，适合大样本分析，可用于临床及流行病学调查。
- 刘悦晖丁静娟
- 关键词：限制性片段长度多态性
- 抑制性寡脱氧核苷酸对肝损伤小鼠pSTAT4、pSTAT6和T-bet表达的影响及其意义被引量：2
- 2010年
- 目的探讨抑制性寡脱氧核苷酸(suppressive oligodeoxynucleotide,Sup ODN)对刀豆蛋白A(ConA)诱导肝损伤小鼠兔抗鼠磷酸化信号转导和转录激动子4抗体(pSTAT4)、pSTAT6和T-bet表达的影响及其意义。方法 Balb/C小鼠40只被随机分为4组,分别为生理盐水(NS,空白对照)组、环孢菌素A(CsA)组(阳性对照)、Con ODN组(对照ODN)、Sup ODN组(实验组)。ConA(20mg/kg)尾静脉注射Balb/C小鼠造模,造模同时分别给予Sup ODN、Con ODN、CsA或NS 0.3 mL腹腔注射,分别于干预后8 h和24 h摘取小鼠脾脏,提取蛋白检测pSTAT4、pSTAT6和T-bet的表达。结果无论是干预后8 h还是24 h,Sup ODN组pSTAT4及T-bet蛋白的表达水平与NS、Con ODN及CsA组相比,均显著下降(均P<0.01);而pSTAT6蛋白表达水平,Sup ODN组与NS、Con ODN及CsA组差异均无显著性(均P>0.05)。结论 Sup ODN可能通过抑制细胞内转录因子pSTAT4和T-bet的表达,抑制小鼠Th1型免疫应答,最终实现其对肝损伤的保护作用。
- 全俊刘悦晖范学工李宁
- 关键词：刀豆蛋白ABET肝损伤
- 乙肝病毒前C区和基本核心启动子变异与基因型及肝病进展的关系
- 本文对乙肝病毒前C区和基本核心启动子变异与基因型及肝病进展的关系进行了探讨。结果表明，前C区A1896变异常见于B基因型感染者,而BCPT1762/A1764变异C基因型感染者多见。除ASC外,前C区A1896变异与疾病...
- 刘悦晖丁静娟张权
- 关键词：肝炎病毒基因变异
- 文献传递
- 贵州乙型肝炎病毒基因型分布及意义分析被引量：8
- 2006年
- 目的调查贵州乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布。方法选择贵阳、遵义、凯里、都匀慢性HBV感染者693例,其中无症状携带者(ASC)292例,慢性肝炎(CH)276例,肝硬化(LC)76例,肝细胞肝癌(HCC)49例。用S基因限制性片段长度多态性确定基因型,比较主要基因型的地区分布及其与临床的关系。结果693例中,B基因449例(64.79%),C型233例(33.62%),A型6例(0.87%),D型5例(0.72%),未发现E、F基因型。B型的分布:凯里最高(96.40%),遵义、都匀其次(78.79%、76.19%),贵阳最低(53.66%)。C型的分布,贵阳(45.68%)高于都匀(23.80%)、遵义(13.13%)及凯里(3.96%),差异有统计学意义(P≤0.01)。与B型相比,C型感染者平均年龄大;ALT水平高;HBeAg阳性率低(P≤0.01)。除ASC组外,B、C2种基因型在CH、LC和HCC中的分布差异有统计学意义(P均<0.01)。结论贵州存在A、B、C、D4种HBV基因型,但以B型为主,C型其次,A型、D型仅占很小比例。B、C基因型在贵州不同地区的分布有一定差异。与B型相比,C型感染者肝脏损害的程度较重。
- 丁静娟张权彭亮刘悦晖李忠刘三都胡莲
- 关键词：基因型
- 132例乙型肝炎病毒感染者基本核心启动子变异分析
- 2009年
- 目的研究乙型肝炎病毒（HBV）感染者基本核心启动子（BCP）变异情况。方法收集HBV感染者血清标本132份（HBVDNA均阳性），用半巢式聚合酶链反应扩增HBVC基因部分片段，产物纯化后直接测序，检测BCPT1762／A1764变异。用S基因错配聚合酶链反应（PCR-RFLP）法确定HBV基因型。结果51例乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性患者BCPT1762／A1764双变异检出率为27．45％，81例HBeAg阴性患者BCPT1762／A1764双变异检出率为62．96％，两组比较，差异有高度显著性（χ^2=15．79，P=0．00）。BCPT1762／A1764双变异的HBV感染者B基因型检出率为33．85％，明显低于C基因型的检出率66．15％（χ^2=24．25，P=0．00）。结论HBV感染者普遍存在BCPT1762／A1764双变异，以C基因型感染者多见。
- 刘悦晖范学工丁静娟
- 关键词：基本核心启动子测序基因
- 乙型肝炎病毒前S基因变异与肝病进展的关系被引量：4
- 2007年
- 目的探讨HBV前S基因变异与疾病进展的关系。方法收集无症状携带者（ASC）、慢性肝炎（CH）、肝炎肝硬化（LC）、肝细胞癌（HCC）患者血清138份，PCR扩增前S区基因．聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测前S2起始码变异，聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分析前S缺失变异，直接测序确定前CA1896、基本核心启动子（BCP）T1762／A1764变异。数据行X^2检验。结果HCC、LC组前S缺失变异检出率分别为56．3％和42．9％，高于CH组的11．8％和ASC组的8．1％（P〈0．01）。前S2起始码变异检出率在HCC（50．0％）、LC（37．1％）组亦较CH（5．9％）、ASC（0）组高。前S缺失、前S2起始码变异在HBeAg阴性组的检出率分别为37．5％和36．1％，高于HBeAg阳性组的19．7％和7．6％（P〈0．01）。分析前S基因、T1762／A1764、A1896单独或联合变异在HCC、LC组和CH、ASC组的分布，Fisher精确检验表明，T1762／A1764和前S基因的联合变异是影响疾病进展、导致严重肝病的重要因素（P-0）。结论严重肝病患者前s基因变异发生率高，有T1762／A1764联合前S基因变异HBV感染者的肝病易进展。
- 丁静娟王梅刘悦晖
- 关键词：肝炎病毒乙型蛋白质前体限制性片段长度肝疾病
