刘红玉
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
- 供职机构：南京医科大学鼓楼临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金南京市卫生局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miR-181a促进人子宫内膜间质细胞蜕膜化催乳素的表达被引量：10
- 2012年
- 目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stromal cell,hESC)体外诱导蜕膜化过程中蜕膜化标志基因蜕膜化催乳素(decidual prolactin,dPRL)表达的调控作用。方法收集怀孕0～6.5 d孕鼠子宫组织,采用TRIZOL法提取总RNA,通过实时定量PCR检测子宫组织中miR-181a的表达。制备Ad-miR-181a重组腺病毒,并感染hESC,24 h后采用0.5 mmol/L 8-Br-cAMP和1μmol/L Medroxyproges-terone(MPA)联合进行体外蜕膜化诱导培养;通过化学发光免疫法和实时定量PCR分别检测细胞培养液上清中dPRL的浓度与间质细胞中催乳素(prolactin,PRL)mRNA的表达;同时采用荧光素酶报告基因检测miR-181a对hESC中dPRL(-332/+65)启动子的调控作用。结果早孕小鼠子宫组织中miR-181a的表达高于非妊娠小鼠子宫,且随着妊娠天数的增加呈逐渐上升的趋势,在小鼠着床"窗口期"即孕4.5 d达到高峰(2.60±0.15倍,P<0.01,n=5),孕5.5 d子宫miR-181a的表达开始平稳下降;成功获得滴度为5.19×1010ifu/ml的miR-181a腺病毒,该腺病毒介导的miR-181a过表达显著增加hESC蜕膜化标志基因dPRL mRNA表达水平,增高超过8倍(P<0.01);在8-Br-cAMP和MPA联合诱导hESC体外蜕膜化时,高表达miR-181a可明显增加8-Br-cAMP联合MPA诱导的PRL mRNA表达水平与PRL蛋白分泌(P<0.01)。荧光素酶报告基因进一步证实miR-181a可以激活dPRL(-332/+65)启动子的活性达到2倍(P<0.05)。结论 miR-181a参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。
- 张群刘红玉蒋玥王玢颜桂军孙海翔胡娅莉
- 关键词：催乳素蜕膜化
- P300/CBP相关因子(PCAF)表达水平对人子宫内膜间质细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察P300/CBP相关因子(P300/CBP associated factor,PCAF)对人子宫内膜间质细胞增殖的调控作用。方法:通过Western blotting、实时定量PCR及Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖实验,观察分析Ad-FLAG-PCAF重组腺病毒介导的PCAF过表达及PCAF-siRNA介导的PCAF低表达对体外培养的人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果:获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Ad-FLAG-PCAF腺病毒,转染体外培养的人子宫内膜间质细胞后,可有效介导细胞内FLAG-PCAF融合蛋白的高表达;而转染PCAF特异的siRNA后,可有效抑制人子宫内膜间质细胞中PCAF的表达。PCAF过表达的人子宫内膜间质细胞中,其细胞周期标志蛋白cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著降低(P<0.05),而PCAF低表达的人子宫内膜间质细胞中,其cyclinD1和cyclinD3的表达水平显著升高(P<0.05);此外,CCK-8实验结果显示,PCAF过表达能显著抑制由雌、孕激素共同刺激所引起的人子宫内膜间质细胞的增殖,而基因沉默人子宫内膜间质细胞中内源性PCAF的表达后,间质细胞的增殖增加>20%(P<0.05)。结论:PCAF可能通过蛋白乙酰化修饰作用,参与调控人子宫内膜间质细胞的增殖过程。
- 朱丽华刘红玉沈晓月甄鑫王玢颜桂军孙海翔
- 关键词：P300增殖
- CAPN7促进人子宫内膜间质细胞增殖的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的子宫内膜异位症是引起育龄妇女不孕的主要疾病之一,研究表明子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞增殖增强,但具体机制不清。我们研究发现半胱氨酸蛋白酶CAPN 7在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织中表达显著增高,本研究旨在探讨CAPN 7对子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法提取正常育龄妇女及子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织总蛋白,通过Western Blotting检测CAPN 7蛋白表达。制备Ad-GFP-CAPN 7重组腺病毒,采用CCK-8增殖试剂盒和Western Blotting结合腺病毒介导的CAPN 7基因过表达及小干扰RNA介导的CAPN 7基因沉默实验,研究CAPN 7对人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果 CAPN 7蛋白在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织中的表达明显高于正常育龄妇女子宫内膜组织;成功获得滴度为3.5×1010ifu/mL的重组GFP-CAPN 7腺病毒,人子宫内膜间质细胞感染该腺病毒后,可表达带有绿色荧光蛋白的CAPN 7融合蛋白;伴随CAPN 7蛋白表达量的增加子宫内膜间质细胞中CyclinD3蛋白的表达增加,同时显著增加细胞的增殖能力;基因沉默子宫内膜间质细胞中内源性CAPN 7表达后,子宫内膜间质细胞中CyclinD3蛋白的表达降低且增殖能力降低15%。结论 CAPN 7通过调控细胞周期蛋白CyclinD3的表达促进人子宫内膜间质细胞的增殖。
- 刘红玉朱丽华沈晓月金晓艳颜桂军孙海翔
- 关键词：增殖
