周明莉
- 作品数：17 被引量：35H指数：4
- 供职机构：成都市第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- TGF-β信号通路调节乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及迁移
- 目的：探讨TGF-β信号通路对乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及其迁移的影响.方法：在乳腺细胞小球(Mammosphere)形成实验的基础上,加入TGF-β信号通路特异性抑制剂LY2109761并计算其成球效率;Western ...
- 周明莉柳满然刘华伟
- 关键词：病理机制转化生长因子-Β细胞迁移
- Drosha水平与胃腺癌恶性程度及侵袭呈负相关被引量：4
- 2015年
- 目的研究Drosha蛋白在胃腺癌发展进程中的意义及与患者预后的相关性,探究Drosha对胃癌细胞SGC-7901侵袭能力的影响。方法免疫组织化学染色及Image-Pro Plus软件检测组织芯片889例胃腺癌组织样本中Drosha的表达量,统计分析Drosha与各临床参数及309例胃腺癌患者预后的关系;小干扰RNA(siRNA)干扰人胃腺癌细胞株SGC-7901中Drosha的表达,TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 Drosha在高分化胃腺癌组织中高表达(吸光度值中位值为0.4195),在中分化胃腺癌中表达降低、在低分化腺癌中低表达;Drosha的表达与肿瘤大小、Lauren分型、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、肿瘤病理分级及病理分期相关;生存分析显示Drosha高表达的患者拥有更高的生存率;敲低SGC-7901细胞的Drosha水平后,细胞侵袭能力显著增强。结论 Drosha蛋白水平随胃腺癌分化程度降低而逐渐降低,敲低Drosha水平可促进胃癌细胞的侵袭。
- 张海龙徐丽云周明莉杜燕娥文思阳柳满然
- 关键词：DROSHA胃腺癌免疫组织化学技术
- 高表达ITGB1促进人乳腺上皮MCF10A细胞EMT及迁移被引量：2
- 2016年
- 目的探讨ITGB1基因过表达对人乳腺上皮MCF10A细胞迁移和侵袭的影响。方法构建重组质粒p BABEpuro-myc-ITGB1,在人胚肾上皮细胞系293T细胞中包装反转录病毒,转染人乳腺上皮MCF10A细胞系,构建ITGB1基因过表达的稳定细胞系;实验设空白对照组(MCF10A)、阴性对照组(MCF10A-vector)和ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1);经嘌呤霉素筛选后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ITGB1 mRNA及蛋白的表达;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞株迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法进一步检测上皮间质转换(EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK、p-FAK和FAK蛋白的表达。结果成功构建ITGB1基因稳定过表达人乳腺上皮MCF10A细胞系;ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1)与空白对照组(MCF10A)和阴性对照组(MCF10A-vector)细胞相比,迁移能力(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)显著增强;EMT相关蛋白E-cadherin显著下调(P<0.05),vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK,p-FAK蛋白显著上调(P<0.05)。结论在人乳腺上皮MCF10A细胞中,过表达ITGB1基因诱导细胞EMT并促进其迁移和侵袭。
- 郎磊周明莉杨佳佳杜燕娥文思阳柳满然
- 关键词：细胞迁移细胞侵袭
- TGF-β信号通路调节乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及迁移
- 目的 目的探讨TGF-β信号通路对乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及其迁移的影响。方法 在乳腺细胞小球(Mammosphere)形成实验的基础上，加入TGF-β信号通路特异性抑制剂LY2109761并计算其成球效率;Wester...
- 周明莉柳满然刘华伟
- 关键词：TGF-Β信号通路细胞迁移
- Hedgehog信号通路调控Twist高表达乳腺肿瘤干细胞样细胞的富集及迁移被引量：7
- 2017年
- 目的 :探讨阻断Hedgehog信号通路对Twist高表达乳腺癌干细胞样细胞微球体富集及其迁移的影响。方法:分别采用蛋白质印迹法和微球体细胞形成实验检测正常乳腺上皮MCF-10A细胞、乳腺癌MCF-7和HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平及微球体细胞形成能力。蛋白质印迹法检测MCF-10A、MCF-7和HS578T微球体细胞中Twist、GLI1家族锌指蛋白(GLI family zincnger1,GLI1)和音猬因子(Sonic Hedgehog,SHh)蛋白的表达情况。采用不同浓度的Hedgehog信号通路特异性抑制剂GDC-0449(10、20和30μmol/L)处理Twist蛋白表达水平最高的乳腺癌HS578T微球体细胞96 h,分别采用微球体细胞形成实验和Transwell小室法检测GDC-0449对HS578T微球体细胞再成球能力和迁移能力的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测HS578T微球体细胞中GLI1、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)和八聚体绑定转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)蛋白的表达情况。结果:乳腺癌HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平明显高于MCF-10A和MCF-7细胞(P值均<0.05),且具有最强的微球体形成能力(P值均<0.05)。HS578T微球体细胞中Twist、GLI1和SHh蛋白水平均明显高于MCF-10A和MCF-7微球体细胞(P值均<0.05);经抑制剂GDC-0449处理后,乳腺癌HS578T微球体细胞的成球能力及迁移能力均明显降低(P值均<0.05),GLI1、SOX2和OCT4蛋白的表达水平明显下调(P值均<0.05)。结论:阻断Hedgehog信号通路的活化可抑制Twist高表达乳腺癌细胞微球体的形成及迁移能力。
- 周明莉唐石伏张海龙柳满然
- 关键词：乳腺肿瘤TWIST转录因子
- Hedgehog信号通路调控Twist高表达乳腺肿瘤干细胞样细胞的富集及迁移
- 目的：探讨Hedgehog信号通路对Twist高表达乳腺癌干细胞样细胞微球体富集及其迁移的影响。方法蛋白印迹法和乳腺微球体细胞形成实验分别检测正常乳腺上皮MCF10A细胞、乳腺癌MCF7和Hs578T细胞中Twist的表...
- 周明莉柳满然
- 关键词：TWISTHEDGEHOG信号通路
- Twist基因逆转录病毒载体的构建及其诱导正常乳腺上皮细胞发生上皮间质转化被引量：3
- 2013年
- 目的构建Twist基因逆转录病毒载体,研究其对人正常乳腺上皮细胞MCF10A的影响。方法酶切pcDNA3/mycTwist获得myc-Twist,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组质粒pBABE-myc-Twist。通过酶切、测序鉴定Twist基因正确后,在体外将质粒pBABE-myc-Twist和其对照分别与包装质粒pAmpho共同转染人胚肾上皮细胞系293T细胞,进行逆转录病毒的包装,并感染人正常乳腺MCF10A上皮细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选,获得成功转入Twist的MCF10A-Twist细胞和MCF10A-Vector对照细胞。通过RT-PCR和Western blot法验证Twist细胞在MCF10A-Twist和MCF10A-Vector细胞内的表达。免疫荧光技术和Western blot法检测细胞内上皮间质转化(EMT)标志蛋白的表达。Transwell^(?)法检测细胞的迁移和侵袭能力。结果重组逆转录病毒载体质粒pBABE-myc-Twist经酶切和测序鉴定构建正确;Twist基因被逆转录病毒成功导入MCF10A细胞,并在靶细胞内稳定表达,RT-PCR检测到Twist mRNA在MCF10A-Twist细胞中表达,Western blot法检测发现myc-Twist蛋白在MCF10A-Twist细胞中表达;免疫荧光和Western blot法检测显示在MCF10A-Twist细胞中E-cadherin表达显著下调、vimentin表达明显上调;与MCF10A-Vector细胞相比,Transwell^(?)法检测发现MCF10A-Twist细胞迁移和侵袭能力明显增加(P<0.01)。结论 Twist诱导MCF10A细胞发生EMT转化,并促进其迁移和侵袭。
- 杨佳佳胡萍周明莉黄杰涛柳满然
- 关键词：TWIST逆转录病毒
- TGF-β信号通路调节乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及迁移
- 目的探讨TGF-β信号通路对乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及其迁移的影响。方法在乳腺细胞小球（Mammosphere）形成实验的基础上,加入TGF-β信号通路特异性抑制剂IY2109761并计算其成球效率;Western bl...
- 周明莉柳满然刘华伟
- 关键词：TGF-Β信号通路细胞迁移
- 文献传递
- Hedgehog信号通路调控Twist高表达乳腺肿瘤干细胞样细胞的富集及迁移
- 目的：探讨Hedgehog信号通路对Twist高表达乳腺癌干细胞样细胞微球体富集及其迁移的影响。方法：蛋白印迹法和乳腺微球体细胞形成实验分别检测正常乳腺上皮MCF10A细胞、乳腺癌MCF7和Hs578T细胞中Twist的...
- 周明莉
- 关键词：TWISTHEDGEHOG信号通路
- TGF-β信号通路调控Twist高表达型乳腺肿瘤细胞微球体的形成及迁移被引量：4
- 2016年
- 目的 :探讨转化生长因子β(transforming growth factor-beta,TGF-β)信号通路对Twist高表达型乳腺癌细胞微球体形成及微球体细胞迁移的影响。方法:应用蛋白质印迹法和微球体形成实验分别检测正常乳腺上皮MCF10A细胞及乳腺癌MCF7和BT549细胞中Twist的表达水平及微球体形成能力。蛋白质印迹法检测MCF10A、MCF7和BT549微球体细胞中TGF-β、SMAD3和磷酸化SMAD3(phospho-SMAD3,p-SMAD3)的表达水平。在微球体形成实验的基础上,加入TGF-β信号通路特异性抑制剂LY2109761,应用微球体形成实验和蛋白质印迹法分别检测乳腺癌BT549微球体细胞的形成能力和p-SMAD3蛋白、肿瘤干细胞相关标志物性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)和八聚体绑定转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)的表达水平,Transwell法检测乳腺癌BT549来源的微球体细胞的迁移能力。结果:乳腺癌BT549细胞中Twist的表达水平明显高于MCF10A细胞和MCF7细胞(P值均<0.05),BT549细胞微球体形成能力显著高于MCF10A和MCF7细胞(P值均<0.05)。BT549微球体细胞中TGF-β、p-SMAD3和SMAD3蛋白的表达水平均显著高于MCF10A和MCF7微球体细胞(P值均<0.05)。LY2109761可显著抑制乳腺癌BT549细胞的微球体形成能力(P<0.05),下调乳腺癌BT549微球体细胞中p-SMAD3及干细胞相关蛋白SOX2和OCT4的表达(P值均<0.05),抑制乳腺癌BT549微球体细胞的迁移(P<0.05)。结论 :TGF-β信号通路特异性抑制剂LY2109761可抑制Twist高表达乳腺癌细胞微球体的形成及微球体细胞的迁移。
- 郎磊周明莉徐丽云杜燕娥文思阳柳满然
- 关键词：乳腺肿瘤转化生长因子微球体信号通路
