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尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体IA基因克隆与多态分析被引量：3: 2013年; 采用touchdown PCR和RACE技术,获得了两条尼罗罗非鱼MHC IA基因3’端的新序列,其长度均为957 bp,分别命名为orni-DAA*0101和orni-DAA*0102,其分别编码了两种新发现的等位基因亚型。两条新序列均包含666 bp的CDS区和291 bp的3’-UTR区,CDS区包含了部分多肽结合区、全部的IGC区以及跨膜区和胞质区。同源性比对显示,cDNA序列分别在388 bp和426 bp处发生了碱基转换,而其编码的氨基酸序列在第130位点存在谷氨酸与赖氨酸的差异。首次发现相对保守的IGC区也存在变异。研究结果对于揭示尼罗罗非鱼MHC IA基因的多态性及其与高抗病性的相关性有重要价值。; 李同明周芬娜崔志峰季相山王慧; 关键词：尼罗罗非鱼 MHC IA 多态性 RACE

尼罗罗非鱼MHC ⅡA基因的克隆、表达及多态性分析被引量：2: 2012年; 为进一步了解鱼类MHC ⅡA基因的特点及其在免疫反应中的功能,采用同源克隆、RACE-PCR、巢式PCR等技术,从健康的尼罗罗非鱼体获得1 205 bp的MHC ⅡA基因cDNA全序列(Orni-DBA-0101,Genebank登录号:JF719813)及1 388 bp的基因组序列。序列分析发现,尼罗罗非鱼MHC ⅡA基因含4个外显子和3个内含子,开放阅读框长720 bp,编码239个氨基酸。从4尾尼罗罗非鱼中共得到8条不同的cDNA序列,分别编码不同的氨基酸序列。氨基酸序列比对后发现,序列间存在丰富的多态性,且主要集中在α-1区,多态性位点数远远高于半滑舌鳎MHC ⅡA基因。生物信息学分析表明,尼罗罗非鱼MHC ⅡA编码的蛋白质分子包含1个信号肽、2个胞外结构域、1个跨膜区和1个胞质区,存在4个保守的半胱氨酸残基以及丰富的磷酸化位点,与其他物种的相似性为23%～65%。RT-PCR结果表明,MHC ⅡA基因在脾、肾、肠、鳃、性腺、肝、心脏表达量很高,在鳔和肌肉中表达量最低。人工感染嗜水气单胞菌后,肝、脾、肾、鳃、肠5个组织中MHC ⅡA基因的mRNA水平均发生了不同程度的变化,提示MHC ⅡA分子作为一种重要的免疫因子,在清除病原的免疫反应中起着重要作用。; 周芬娜董忠典李同明傅咏王慧; 关键词：尼罗罗非鱼多态性基因克隆 MHC

山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法: 本发明涉及一种山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法，利用皮肤成纤维细胞外基质诱导和机械分离与酶消化相结合的方法，启动了ORSC的原代培养，并利用不同培养液，成功建立了山羊毛囊外根鞘细胞系。利用本发明构建的山羊毛囊外根鞘细胞系已...; 王慧崔志峰胡艳霞曾勇庆陈维云周芬娜董忠典张娇

尼罗罗非鱼致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏试验被引量：10: 2012年; 从自然患病的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脏组织分离出2株细菌,命名为M-O1和M-02。用M-O1和M-02分别在实验室人工感染健康的尼罗罗非鱼,被感染鱼3周内全部死亡,且患病症状与自然发病症状一致。从被感染的鱼体中分离得到2株类似细菌(分别命名为W-01、W-02),说明分离的菌株为本次尼罗罗非鱼出血性败血症的病原菌。通过生理生化方法进行种属鉴定,确认以上分离到的4株细菌均为嗜水气单胞菌(Aeromonaz hydrophila),分别命名为M-O1、M-02、W-01、W-02。用19种常见药物对上述菌株进行药敏试验,4菌株对丁胺卡那、氟哌酸、庆大霉素、链霉素、恩诺沙星、新霉素、氟罗沙星和复方新诺明极为敏感;对氧哌嗪青霉素、利福平、麦迪霉素、红霉素、罗红霉素和阿奇霉素敏感,对羧苄青霉素、头孢噻吩、先锋霉素、氨苄青霉素和林可霉素为不敏感。; 董忠典周芬娜袁颜颜冯艳艳王慧; 关键词：尼罗罗非鱼败血症嗜水气单胞菌药敏试验

山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法: 本发明涉及一种山羊毛囊外根鞘细胞系的构建方法，利用皮肤成纤维细胞外基质诱导和机械分离与酶消化相结合的方法，启动了ORSC的原代培养，并利用不同培养液，成功建立了山羊毛囊外根鞘细胞系。利用本发明构建的山羊毛囊外根鞘细胞系已...; 王慧崔志峰胡艳霞曾勇庆陈维云周芬娜董忠典张娇; 文献传递

尼罗罗非鱼MHC基因的克隆、表达及多态性研究: 主要组织相容性复合体(MajorHistocompatibilityComplex，MHC)是脊椎动物中编码免疫球蛋白样受体的基因家族，常呈现出高度的遗传多样性，与动物的抗病性和生长发育等重要经济性状密切相关。本研究以我...; 周芬娜; 关键词：尼罗罗非鱼 MHC基因基因克隆多态性

鲁西黄牛和渤海黑牛群体遗传多样性的RAPD分析被引量：5: 2010年; 本研究采用RAPD分子遗传标记技术,检测了鲁西黄牛和渤海黑牛群体的遗传多样性现状,从30对10碱基的随机引物中,筛选出4对多样性丰富的引物,对鲁西牛和渤海黑牛进行了群体遗传多样性检测。共得到RAPD标记位点224个,多态性位点191个,占检测总位点数的85.27%。其中,鲁西黄牛的总位点数为109个,多态性位点为95个,占总位点数的87.16%;渤海黑牛的总位点数为115个,多态性位点数96个,占总位点数的83.48%。各个引物检测到的RAPD位点数在14-35个之间,扩增片段的大小在300bp以上。分析结果表明,鲁西牛群体的遗传多样性高于渤海黑牛群体的遗传多样性。; 周芬娜毕伟伟王慧王中华; 关键词：鲁西黄牛渤海黑牛 RAPD

MHC基因的遗传变异及其与鱼类抗病性研究进展被引量：8: 2011年; 概述了主要组织相容性复合体(MHC)的结构与功能以及在脊椎动物特别是鱼类中的研究进展。对MHC基因的遗传变异与鱼类抗病性机制做了较为详细的阐述,介绍了MHC的遗传变异与多种鱼类抗病性关系的研究进展,重点介绍了草鱼MHC基因的研究。展望了MHC基因在鱼类及草鱼未来抗病育种中的研究前景。; 董忠典周芬娜王慧; 关键词：MHC 鱼类抗病性

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周芬娜