崔文慧
- 作品数：11 被引量：67H指数：5
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠急性皮肤缺损创面粒-巨噬细胞集落刺激因子表达特点及其作用机制被引量：6
- 2011年
- 目的探讨创面愈合过程中粒-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte—macrophage colony stimulating factor，GM—CSF）的表达变化及其在创面愈合中的作用和机制。方法采用小鼠全层皮肤缺损伤模型。肌肉麻醉后在背部中线近颈侧制作1．0cm×1．0cm大小皮肤缺损伤创面。50只雄性小鼠创面造模成功后，单笼饲养，将每笼编号，依次为1～50号，按完全随机原则将小鼠分为对照组（25只）和GM—CSF治疗组（25只），每组分为5个时相点，分别为5只。治疗组创面用重组GM—CSF（rhGM—CSF）凝胶（10μg／cm^2），对照组创面用凝胶基质。于伤后第3，5，7，10和14天，观察创面愈合时间；测定创面愈合率；切取创面组织，检测病理组织学变化；通过CD31免疫组化染色结果分析，计算创面微血管密度；应用RT—PCR检测创面GM—CSF、血小板源性生长因子（platelet—derived growth factor，PDGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和基质细胞衍生因子-1（stromal cell derivedfactor-1，SDF-1）基因表达变化。结果RT—PCR检测结果显示创面GM—CSF基因表达伤后3d达峰值（P〈0．01），直到伤后10d均维持较高水平（P〈0．05），伤后14d其表达显著下降接近正常；应用rhGM—CSF凝胶后，创面愈合时间较对照组提前（2．4±0．3）d，其创面愈合率于伤后7～14d显著升高（P〈0．05）；组织学显示创伤早期创面中性粒细胞数量较少，创沿上皮细胞增殖数量较多，创面肉芽组织增生明显，并日．细胞密度大，以梭形细胞和卯圆形细胞为主，新生血管数量较多；创面微血管密度在伤后7～14d显著增加（P〈0．05）；VEGF和SDF-1基因表达，分别于伤后7d和10d内显著上调表达（P〈0．05），促愈生长因子PDGF基因于伤后各时相点均显著上调表达（P〈0．05）。结论GM—CSF在创面愈合早期表达增高，GM—CSF可促进�
- 郭敏崔文慧徐祥简宇代卉杨永华蒋建新黄宏简华刚
- 关键词：伤口愈合粒-巨噬细胞集落刺激因子基因表达
- 川芎嗪通过Akt信号通路影响前列腺癌PC3细胞的增殖和凋亡被引量：25
- 2013年
- 目的研究盐酸川芎嗪对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法 0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mg/mL盐酸川芎嗪处理雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞,MTT法检测各组细胞的增殖能力,荧光显微镜观察细胞核形态学改变,Western blot检测Akt以及下游相关蛋白mTOR、p70S6蛋白及蛋白磷酸化的表达,以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果盐酸川芎嗪能有效抑制前列腺癌PC3细胞增殖,且显示浓度时间依赖性(P<0.05)。1.5、2.5 mg/mL的盐酸川芎嗪能够降低Akt和p-Akt的表达,进而下调mTOR、p-mTOR、p70S6及p-p70S6的表达(P<0.05);同时下调Bcl-2、上调Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论 Akt及其下游信号通路介导了盐酸川芎嗪抑制前列腺癌PC3细胞增殖及促凋亡作用。
- 韩娇艳朱方强徐祥黄宏黄文秋崔文慧代卉蒋建新王莎莉
- 关键词：川芎嗪前列腺肿瘤AKT
- mTOR及其下游信号通路在骨髓间充质干细胞氧化应激损伤中的变化及作用被引量：11
- 2013年
- 目的研究小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow stem cells,mBMSCs)在氧化应激损伤中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliatargetofrapamycin,mTOR)及其下游信号通路的变化及其作用。方法从30只雄性健康昆明小鼠的股骨中分离、培养和扩增BMSCs。H2O2刺激mBMSCs建立氧化应激损伤模型。实验分为对照组(不予H2O2处理)、不同浓度H2O2(100、200、300、400、500、800、1 000μmol/L处理mBMSCs)损伤组(n=5)。采用MTT法检测24、48、72 h各组的细胞活力;倒置显微镜观察BMSCs的形态学改变;采用细胞核Hoechst33342染色观察凋亡细胞核形态;Western blot检测各组Bcl-2、Bax、mTOR及其下游蛋白以及蛋白的磷酸化的表达。结果 100～1 000μmol/L浓度的H2O2作用mBMSCs24 h后,其形态学和病理学发生浓度依赖性的改变。H2O2浓度在100～300μmol/L时,随着H2O2浓度的增高,mBMSCs的mTOR、p70S6K、S6的表达水平有增高的趋势,磷酸化水平明显增高(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达增高(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达不明显(P>0.05)。H2O2浓度在400μmol/L以上时,随着H2O2浓度的增高,p-mTOR、p-p70S6K、p-S6、BCL-2的表达水平降低(P<0.05,P<0.01),而mTOR、p70S6K、S6蛋白变化不明显,同时Bax的表达水平明显增高(P<0.01)。结论一定强度的氧化应激可以降低mBMSCs存活率,促进细胞凋亡,其机理可能与抑制mTOR及其下游信号通路的活性和抗凋亡蛋白Bcl-2表达,促进凋亡蛋白Bax表达有关。
- 黄文秋黄宏徐祥韩娇艳代卉崔文慧蒋建新王莎莉
- 关键词：氧化应激骨髓间充质干细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白细胞凋亡
- 转化生长因子-β1促血管内皮细胞向间质细胞转化的作用研究被引量：5
- 2010年
- 目的观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)促进内皮细胞向间质细胞转化[endothelial-mesenchymal(myofibroblast)transition,EnMT]的效应,探讨肌成纤维细胞的来源以及纤维化疾病发生的新机制。方法分离培养人脐静脉内皮细胞,采用不同浓度的TGF-β1(0、10、25、和50ng/ml)刺激细胞72h后,倒置显微镜观察诱导后细胞形态变化,免疫荧光方法检测第Ⅷ因子相关抗原和α-SMA表达变化,RT-PCR检测VE-钙粘蛋白(VE-Cadherin),α-SMA和Ⅰ型胶原基因表达变化。结果正常对照组内皮细胞呈铺路石样生长,TGF-β1刺激组内皮细胞由铺路石样形态向梭形转化。免疫荧光检测可见对照组含有少量FⅧ,α-SMA双阳性细胞。TGF-β1组FⅧ,α-SMA双阳性细胞明显增多,并且具有明显的浓度依赖性(P<0.05,P<0.01)。RT-PCR检测结果显示,TGF-β1刺激导致内皮细胞特异性标记物VE-钙粘蛋白(VE-cadherin)基因的表达显著减少(P<0.05),随着TGF-β1刺激浓度的增加,VE-钙粘蛋白基因表达呈明显的下降趋势;相反,内皮细胞间质性标记物α-SMA和I型胶原基因的表达显著增加(P<0.05,P<0.01),并且具有明显的浓度依赖性。结论 TGF-β1刺激内皮细胞后,细胞表型和功能均表现为间质细胞特性,提示TGF-β1具有促进内皮细胞向间质细胞转化(EnMT)的作用,并且其促EnMT效应具有明显的浓度依赖性。
- 简宇简华刚黄宏徐祥郭敏代卉崔文慧蒋建新朱佩芳王正国
- 关键词：内皮细胞肌成纤维细胞转分化转化生长因子-Β1
- mTOR信号通路与创伤愈合的相关性研究
- 背景和目的： 创伤修复是外科乃至整个医学界所面临的最重要、最基本的问题之一，也是目前临床研究的热点。随着人类现代医学的发展和生物科学技术的进步，人们已经认识到可以在分子生物学、基因水平以及相关信号通路水平到对创面愈合进...
- 崔文慧
- 关键词：创伤修复粒细胞巨噬细胞集落刺激因子信号通路蛋白表达
- 小鼠创面GM-CSF表达特点及其作用机制初探
- 黄宏徐祥郭敏崔文慧简宇戴卉杨永华蒋建新
- Maspin在动情周期及早孕小鼠子宫内膜的表达规律
- 2012年
- 目的：初步探讨Maspin基因在动情周期及早孕小鼠子宫内膜的表达规律。方法：采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别检测动情前期、动情期、动情后期、动情间期及孕2、4、5、7d小鼠子宫内膜Maspin基因mRNA及蛋白的时空表达规律。结果：动情周期中动情期Maspin mRNA和蛋白表达较强，与其他3期相比差异有统计学意义，其他3期表达较弱，无差异。早孕小鼠子宫内膜组织Maspin基因mRNA和蛋白的表达高于未妊娠小鼠，且随着妊娠天数的增加呈逐渐增强的趋势，到妊娠第5天达到最高。结论：Maspin在动情周期及早孕小鼠子宫内膜呈规律性表达，说明其可能在胚泡着床过程中发挥着重要的作用。
- 黄燕姜蓉崔文慧杨戎
- 关键词：动情周期早孕胚泡着床
- 蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路关键蛋白在糖尿病大鼠皮肤组织和创面组织中的表达研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨糖尿病大鼠皮肤组织和创面组织中蛋白激酶B／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Akt／mTOR）信号通路关键蛋白的表达变化，并探讨相关机制。方法选取7～8周龄SD大鼠78只，按照随机数字表法分为糖尿病组和非糖尿病组，每组39只。糖尿病组大鼠一次性快速腹腔注射20mg／mL链脲佐菌素液（65mg／kg，采用柠檬酸缓冲液配制），建立糖尿病模型；非糖尿病组大鼠同法注射等量的柠檬酸缓冲液。于注射后1～8周2组每周各取3只大鼠，于背部切取约1．0cm×1．0cm的全层皮肤，行HE染色观测表皮厚度。注射后1周，2组各取15只大鼠同前取皮造成全层皮肤缺损，于伤后即刻及1、3、5、7d每组各取3只大鼠处死，伤后即刻每只大鼠沿创缘切取1块皮肤组织、伤后1～7d每只大鼠切取创面组织，取一部分组织采用蛋白质印迹法检测皮肤组织及创面组织中的Akt、磷酸化Akt、mTOR、磷酸化mTOR的蛋白表达水平；取剩余组织行免疫荧光染色，观察皮肤组织及创面组织中的磷酸化Akt与波形蛋白表达。对数据行析因设计方差分析、多重t检验。结果（1）注射后1、2周，2组大鼠表皮厚度相似（t值分别为0．25、1．33，P值均大于0．05）；与非糖尿病组比较，注射后3周起糖尿病组大鼠表皮厚度明显变薄（t值为4．44～9．71，P〈0．05或P〈0．01）。（2）与伤后即刻皮肤组织比较，非糖尿病组大鼠伤后1～7d创面组织Akt、磷酸化Akt、roTOR（伤后3d除外）及磷酸化mTOR蛋白表达水平明显升高，t值为3．75～21．44，P〈0．05或P〈0．01。与伤后即刻皮肤组织比较，糖尿病组大鼠伤后1～7d创面组织中Akt、roTOR蛋白表达水平（伤后ldmTOR除外）无明显变化（t值为0．03～2．32，P值均大于0．05）；伤后1～7d创面组织中磷酸化Akt（伤后1d除外）、磷酸化roTOR蛋白表达水平均明显升高（t值为3．79～8．11，P〈0．
- 黄宏邱伟朱明张娅崔文慧邢伟李向云安天琛陈民佳郭韡徐祥
- 关键词：皮肤
- 肿瘤坏死因子α在血管内皮细胞向间质细胞转化中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的 观察TNF-α在血管内皮细胞向间质细胞转化中的作用,探讨纤维化疾病发生的机制. 方法 取健康胎儿脐带,体外酶消化法分离培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,用免疫荧光法进行鉴定.取第3～5代对数生长期HUVEC分别接种于12孔板和6孔板中,均按随机数字表法分为6组：对照组,培养液中不加任何刺激因素；5、10、25、50、100 ng/mL TNF-α组,分别在培养液中添加相应终浓度TNF-α,每组3个样本.培养72 h后倒置相差显微镜下观察各组细胞形态；免疫荧光法检测12孔板中各组细胞凝血因子Ⅷ和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,计算2种因子双阳性细胞数比值及吸光度值比值；RT-PCR检测6孔板中各组细胞钙黏蛋白、α-SMA和Ⅰ型胶原mRNA的表达（以灰度值比值表示）.对数据行单因素方差分析及LSD检验. 结果（1）原代培养HUVEC为圆形、短梭形或扁平形,传代后细胞呈铺路石样旺盛生长.经第1、2、3、4、5次传代后HUVEC凝血因子Ⅷ阳性表达率分别为（85.5±1.8）％、（88 1±5 0）％、（93.6±3.7）％、（92.9±4 8）％、（89.5±1.1）％,明显高于原代培养HUVEC的（81.4±3.8）％,F值均为7.481,P值均小于0.05.（2）对照组细胞呈圆形、短梭形或扁平形,细胞间连接紧密；5、10、25、50、100 ng/mL TNF-α组随着TNF-α浓度的增加,细胞形态逐渐向长梭形转变,细胞间连接减少、间隙变大.（3）对照组中凝血因子Ⅷ、α-SMA双阳性细胞数比值和吸光度值比值分别为0.055±0 015、0.078±0 017,均显著低于5、10、25、50、100 ng/mL TNF-α组的0 257±0.106、0 280±0.129、0.505±0 059、0.817±0.035、0.929±0.101和0.437±0 040、0 456±0.097、0 496±0.082、0.787±0 131、0.885±0 087,F值分别为45 009、50.099,P值均小于0.01.（4）5、10、25、50、100 ng/mL TNF-α组细胞中钙黏蛋白mRNA水平分别为0.70±0.05、0.63±0 06、0 60±0.10、0.45±0.16、0 26±0.14,后4组显著低于对照组的0 8
- 代卉黄宏王莎莉徐祥简宇崔文慧张猛张波蒋建新
- 关键词：肿瘤坏死因子Α内皮细胞间质细胞细胞转分化肌成纤维细胞
- 粒细胞巨噬细胞刺激因子对大鼠创面哺乳动物西罗莫司靶蛋白信号通路的作用被引量：4
- 2012年
- 目的 了解应用粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）对大鼠创面愈合的影响及对哺乳动物西罗莫司（雷帕霉素）靶蛋白（mTOR）信号通路的作用. 方法 将50只SD大鼠按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组25只,于其背部制作约2 cm×2 cm全层皮肤缺损创面.治疗组大鼠创面外涂重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（ rhGM-CSF）凝胶,10 μg/cm2,rhGM-CSF实际作用量为1×10-4 μg/cm2；对照组创面涂抹不含任何药物的凝胶基质,10 μg/cm2.2组每日给药1次直至创面愈合.于致伤后1、3、5、7、14 d,每组每时相点处死5只大鼠：（1）观察并计算创面愈合率.（2）于前4个时相点取创面组织标本,行HE染色观察组织病理学改变,ELISA法检测GM-CSF含量,蛋白质印迹法检测GM-CSF、CD31及mTOR信号通路相关分子P70S6K、磷酸化（p-）P70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1、mTOR、p-mTOR表达量.对数据行t检验. 结果 （1）伤后1d,2组大鼠创面愈合率接近（t=0.307,P＞0.05）；伤后3～ 14 d,治疗组创面愈合率明显高于对照组（t值为2.704～ 4.030,P ＜0.05或P ＜0.01）.（2）HE染色可见,与对照组同时相点相比,治疗组创面肉芽组织及微血管数量明显增多,创缘角化上皮细胞增殖明显.（3）ELISA法和蛋白质印迹检测结果显示,2组大鼠创面GM-CSF含量及蛋白表达量均在伤后3d达到峰值,对照组分别为（720.9±0.9）pg/mL、2.45±0.10,治疗组分别为（910.5±1.3）pg/mL、2 80±0.48.治疗组各时相点GM-CSF含量均明显高于对照组（t值为105.743～298.971,P值均为0.000）,治疗组伤后1、5、7 d GM-CSF蛋白表达量明显高于对照组（t值为4.070～5.275,P值均小于0.01）.（4）治疗组伤后1、3、7d创面组织中CD31表达量均明显高于对照组（t值为7.237～26.401,P值均小于0.01）.（5）治疗组伤后各时相点创面组织中mTOR和p-mTOR表达量均高于对照组（t值为2.921 ～23.143,P ＜0.05或P＜0.01）.治疗组P70S6K表达量�
- 崔文慧黄宏徐祥郭敏代卉简宇郭韡邢伟蒋建新杨戎
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子信号传导创面愈合
