- miR-185对癫痫海马神经元中BDNF-TrkB通路表达的影响被引量：7
- 2015年
- 目的研究海马神经元癫痫模型中的BDNF/TrkB信号通路及miR-185*对其的调控。方法构建miR-185*表达载体。体外培养海马神经元,7d后将其随机分为正常组、癫痫组、正常+BDNF组、癫痫+BDNF组、正常转染miR-185*组、癫痫转染miR-185*组、癫痫转染miR-185*+BDNF组。免疫荧光、膜片钳及免疫印迹技术观察转染miR-185*后BDNF/TrkB通路的表达变化。结果癫痫+BDNF组海马神经元细胞的TrkB蛋白磷酸化水平较正常+BDNF组降低,有统计学意义(P<0.05);正常+BDNF组TrkB蛋白的磷酸化水平比正常组的磷酸化水平升高,有统计学意义(P<0.001);癫痫+BDNF组TrkB蛋白磷酸化水平比癫痫组升高,有统计学意义(P<0.05);而癫痫+miR-185*+BDNF组的TrkB蛋白磷酸化水平较癫痫+BDNF组和癫痫转染miR-185*组升高(P<0.001)。结论BDNF可以激活BDNF/TrkB信号通路,转染miR-185*后可以消除对癫痫状态下BDNF/TrkB信号传导通路的抑制。
- 蔡浩李江丽谢伟常伟宋毅军
- 关键词：TRKB海马神经元癫痫蛋白印迹
- Turner综合征伴枕叶癫癎一例
- 2014年
- 患者女性，16岁。主因眼前闪光2年余、加重伴头晕5d，于2013年8月5日入院。2年前无明显诱因出现眼前闪光，呈持续性，未予重视，之后（约2011年1月）于夜间睡眠中出现四肢强直、双眼上翻、口吐白沫和牙关紧闭等症状，偶有舌咬伤情况。发作时神志不清，每次发作约持续数分钟，当地医院诊断为“癫痢”，
- 常伟吴秋静宋毅军
- 关键词：特纳综合征癫痫病例报告
- miR-204对癫神经元中BDNF/TrkB信号通路的影响被引量：5
- 2014年
- 目的研究海马神经元癫模型中转染miR-204后对脑源性神经营养因子(BDNF)与TrkB通路调控作用的影响。方法取原代培养7d后的细胞,分为正常组、正常+BDNF组、癫组、癫+BDNF组、正常转染miR-204组、癫转染miR-204组、癫转染miR-204+BDNF组。癫组用无镁液处理3 h制作癫模型。制备成功miR-204慢病毒表达载体。采用免疫荧光、膜片钳及免疫印迹技术鉴定及观察miR-204对BDNF/TrkB通路表达的影响。结果 TrkB蛋白的磷酸化水平:正常+BDNF组高于正常组;癫+BDNF组低于正常+BDNF组,高于癫组;癫+miR-204+BDNF组高于癫+BDNF组和癫+miR-204组。结论 BDNF及miR-204可以改善BDNF/TrkB受抑制的状态,从而在癫疾病的缓解中可能发挥重要作用。
- 常伟潘立平吴秋静宋毅军
- 关键词：癫痫海马神经元脑源性神经营养因子
- Toll样受体4在颞叶癫大鼠海马中的表达研究
- 2013年
- 目的观察癫持续状态大鼠海马组织Toll样受体4(TLR4)蛋白表达变化,探讨其在颞叶癫发病机制中的作用。方法采用氯化锂匹罗卡品方法制备颞叶癫大鼠模型,于癫持续状态后不同观察时间点分别提取海马总蛋白,Western blotting法和免疫组织化学染色检测TLR4蛋白表达变化。结果 Western blotting检测显示,癫持续状态后即刻(0 h)、1、6、12、24、48 h及7、10、30 d时海马TLR4蛋白表达高于正常水平(均P<0.05),于发作50 d时恢复至正常值范围(P=0.714);免疫组织化学染色显示,癫持续状态后1、6、12、24、48 h及7、10、30、50 d时海马CA3区TLR4阳性神经元数目增加(均P<0.05),但发作即刻差异无统计学意义(P=0.326)。模型组与氯化锂组大鼠发作即刻(P=0.451),以及不同处理组海马CA1和CA2区TLR4蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 TLR4蛋白主要在海马CA3区锥体细胞胞质表达。癫持续状态后各观察时间点TLR4蛋白表达水平均有不同程度增加。提示TLR4蛋白可能在癫发生过程中起重要作用。
- 潘立平吴秋静常伟宋毅军
- 关键词：TOLL样受体4海马免疫印迹法
- 在癫痫神经元中miR-212调控BDNF-TrkB信号通路表达的研究
- <正>目的本课题旨在通过检测转染miR-212后的海马神经元癫痫模型中TrkB蛋白磷酸化水平的变化,来发现其对BDNF-TrkB信号通路的调控作用,并探讨其在癫痫发病中的作用。方法采用24小时内新生Sprague Daw...
- 吴秋静常伟潘立平
- 文献传递
- TrkB不同亚型对癫海马神经元BDNF/TrkB信号通路调控的研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨癫海马神经元中酪氨酸激酶受体B(TrkB)不同亚型对脑源性神经营养因子(BDNF)/TrkB信号通路的调控机制。方法取原代培养7 d后的海马神经元,分为钙调蛋白抑制剂(ALLN)组和翻译抑制剂(An-isomycin)两大组。ALLN组又分为正常组、正常+BNDF组、癫组、癫+BDNF组、正常+ALLN组、癫+ALLN组和癫+ALLN+BDNF组;Anisomycin组又分为正常组、正常+BDNF组、癫组、癫+BDNF组、正常+Anisomycin组、癫+Anisomycin组和癫+Anisomycin+BDNF组。免疫荧光鉴定海马神经元,无镁液处理制备癫模型,电生理鉴定细胞痫样放电,免疫印迹技术检测各组TrkB和磷酸化TrkB(p-TrkB)蛋白的表达变化。结果 (1)ALLN组:正常+BDNF组p-TrkB/TrkB灰度值高于正常组;癫+BDNF组高于癫组,低于正常+BDNF组;癫+ALLN+BDNF组低于癫+BDNF组,与癫+ALLN组差异无统计学意义。(2)Anisomycin组:正常+BDNF组p-TrkB/TrkB灰度值高于正常组;癫+BDNF组高于癫组,低于正常+BDNF组;癫+Anisomycin+BDNF组高于癫+BDNF组和癫+Anisomy-cin组。结论通过Anisomycin降低TrkB.T表达可改善癫状态下BDNF/TrkB受抑制的状态,通过ALLN升高TrkB.FL表达无法改善其抑制状态。
- 吴秋静常伟潘立平宋毅军赵文
- 关键词：颞叶海马神经元钙调蛋白抑制剂
