张宝红
- 作品数：10 被引量：69H指数：6
- 供职机构：青岛海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学天文地球更多>>
- 节旋藻属与螺旋藻属的分子系统学研究
- ＜正＞ 传统的蓝藻分类体系是以形态观察为手段,以形态学特征为主并结合部分生理生化特征等表型特征为基础的,是在细胞水平上进行的,在蓝藻较高分类等级的研究中,如目、科,甚至表观特征明显的属的界定中,传统分类方法得到成功应用。...
- 茅云翔杨官品张宝红张学成
- 文献传递
- 螺旋藻胞外和胞内核酸酶活性研究被引量：6
- 2001年
- 通过分析比较 2个螺旋藻物种 7个品系胞外和胞内核酸酶活性 ,确定了抑制胞外和胞内核酸酶活性的方法。用液体培养基清洗两次可消除胞外核酸酶活性 ,添加 EDTA(2 m mol L-1)可显著地抑制胞内核酸酶活性。高温 (6 5℃ )
- 王高歌杨官品茅云翔张宝红张学成
- 关键词：螺旋藻EDTA
- 节旋藻(螺旋藻)高分子量DNA的两种制备方法被引量：8
- 2003年
- DNA的简便高效制备方法是研究基因结构、功能及开展其它各项研究的基础。首次报道了针对节旋藻的结构和组成特性而建立的制备节旋藻高分子量DNA的两种方法。其中第一个方法是常规方法 ,可大量提取纯度较高、分子量达50kb的节旋藻DNA ,可用于构建节旋藻质粒文库、Southern杂交和PCR操作等 ;第2种方法是用脉冲电场凝胶电泳分离DNA片段 ,制备的DNA片段达数百kb ,可用于构建节旋藻噬菌体文库、粘粒文库、BAC文库等 ,从而为构建节旋藻物理图谱 ,定位克隆基因奠定基础。
- 茅云翔张宝红杨官品张学成
- 关键词：节旋藻螺旋藻高分子量DNA脉冲场凝胶电泳
- 电转化法转化钝顶螺旋藻转化条件的研究被引量：4
- 2002年
- 确定了电转化法转化钝顶螺旋藻S6 - 4的转化条件。无论受体是藻丝还是单细胞 /藻丝段 ,钝顶螺旋藻S6 - 4在对数生长期内 ,半致死电场强度无显著差别。实验表明以对数中期的螺旋藻用于转化为宜。当脉冲时间是 5 0ms时 ,藻丝受体和单细胞 /藻丝段受体的半致死电场强度分别是 3 75～ 5 0kV/cm和 3 1～ 4 4kV/cm ,而电击缓冲液分别是 1 0mmol/LHEPES(pH7 5 )缓冲液和含有 0 5mol/L蔗糖的 1 0mmol/LHEP ES(pH7 5 )缓冲液。本文的研究结果为螺旋藻转化及外源基因表达提供了实验基础。
- 王高歌茅云翔张宝红张学成
- 关键词：电转化法钝顶螺旋藻丝状蓝藻实验室
- 螺旋藻对六种抗生素的敏感性研究被引量：10
- 2001年
- 通过 6种基因工程中常用抗生素对螺旋藻生长抑制的研究发现 ,钝顶螺旋藻S6和极大螺旋藻SM对卡那霉素和新霉素不敏感 ,10～ 70 0 μg/ml的卡那霉素和 10～ 30 0 μg/ml新霉素仍不能抑制其生长 ;S6 和SM对庆大霉素的敏感性存在较大差异 ,液体培养中的抑制浓度分别是 30 0 μg/ml和 50 μg/ml;S6 和SM品系对氨苄青霉素和链霉素较敏感 ,固体培养中 5.0～ 50 .0 μg/ml的氨苄青霉素对它们有致死作用 ;液体培养中链霉素的抑制浓度是 5.0 μg/ml,固体培养中链霉素的致死浓度是 50 μg/ml;S6 和SM对氯霉素最敏感 ,液体培养时 0 .1μg/ml的氯霉素可抑制螺旋藻的生长 ,固体平板致死浓度是 1.0 μg/ml。应用电转化法将带有CAT基因片段的同源重组质粒导入螺旋藻细胞 ,用含有 2 0 μg/ml氯霉素Zarrouk固体平板筛选出了抗性转化子 ,研究结果表明 ,氯霉素是螺旋藻转化系统中理想的抗性选择试剂。
- 王高歌臧晓南张宝红张学成
- 关键词：螺旋藻抗生素敏感性基因工程
- 3种不同来源的鲑鱼降钙素基因的克隆及其序列比较被引量：5
- 2002年
- 以 3种不同来源的鲑鱼基因组 DNA为模板 ,采用 PCR方法获得完整的 s CT基因。与Genbank中 Pink Salmon(Oncorhynchus gorbuscha)的降钙素基因序列进行比较 ,结果显示 :实验组的 Pink Salmon(O.gorbuscha)降钙素基因有 2个碱基差异 (第 39位 C→ A;第 5 1位 T→ C) ,氨基酸没有变化 ;Chum Salmon(O.keta)有 1个碱基的差异 (第 86位 G→ A) ,且引起 1个氨基酸的变化(第 2 9位 S→ N) ;而中国黑龙江产的鲑鱼 (Oncorhynchus sp.)降钙素基因序列与 Genbank中 PinkSalmon(O.gorbuscha)的降钙素序列完全相同 ,没有碱基差别。
- 张宝红茅云翔王高歌杨官品张学成
- 关键词：克隆PCR鲑鱼降钙素基因碱基
- 建立螺旋藻转基因体系初报被引量：9
- 2000年
- 从钝顶螺旋藻单细胞克隆的制备、重组平台的 克隆、同源重组表达质粒的构建、质粒的电激转化和报告基因的表达等方面对螺旋藻转基因 表达系统进行了研究，初步建立起螺旋藻转基因体系。用次氯酸钠溶液处理获得无菌培养系 ；用钠、钙离子混合液处理，获得了可再生的螺旋藻单细胞。用含EDTA的培养基预培养和用 培养基洗涤可分别去除胞外核酸酶活性和抑制胞内核酸酶活性。以氯霉素乙酰转移酶基因替 换大肠杆菌表达质粒pBV220的抗性选择标记，同时插入系列同源重组片段和萤火虫荧光素酶 基因，构建了同源重组表达载体pBVCS01-04L。电激转化螺旋藻S6-4品系单 细胞，获得了具有稳定氯霉素抗性的培养系，并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了报告基 因的表达。
- 茅云翔王高歌张宝红杨官品隋正红张学成
- 关键词：螺旋藻重组质粒同源重组
- 16SrRNA基因与16S-23SrRNA转录单元内间隔区序列分析及其在节旋藻和螺旋藻分类鉴定中的应用被引量：20
- 2001年
- 测定了节旋藻属 3个品系和螺旋藻属 1个品系的全长 1 6SrRNA基因和 1 6S 2 3SrRNA转录单元内间隔区序列 (ITS) ,分析了已知的节旋藻、螺旋藻和相关品系的相应序列的同源性 ,构建了系统发生树 ,并评价了这两段DNA序列在节旋藻、螺旋藻种属分类和种质鉴定中的意义。结果表明 :( 1 ) 1 6SrRNA基因序列和ITS序列均可用于节旋藻属和螺旋藻属的属间分类 ,以两序列为基础的系统学分析结果一致 ;( 2 )ITS序列变异程度高于 1 6SrDNA序列 ,适用于节旋藻和螺旋藻属内品系或种质鉴定 ;( 3)节旋藻属可明确界定 ,1 6SrRNA基因序列相似性大于 98% ,ITS序列相似性大于 88% ;( 4 )螺旋藻属某些品系间 1 6SrDNA序列和ITS序列相似性较低 ,与不同属间的序列相似性程度为同一水平。
- 茅云翔杨官品张宝红张学成
- 关键词：16SRRNA基因聚类分析螺旋藻属养殖
- 无菌钝顶螺旋藻单细胞的制备和再生被引量：19
- 2001年
- 用含有 0 .75mol/LNaCl的Zarrouk培养基洗去藻丝体表面的角质鞘 ,可获得大量有活性并能再生的单细胞 ,再生率为 2 8.6%。用 0 .4%的次氯酸钠溶液消毒藻丝体 5分钟 ,恢复培养后再置于含有终浓度均为 1 50 μg/μl的卡那霉素、庆大霉素和新霉素Zarrouk培养基中 35℃ 48h杀菌 ,最后用含 1 .5mol/LNaCl的Zarrouk培养基对藻丝体洗壁处理 1min 。
- 王高歌张宝红茅云翔臧晓南张学成
- 关键词：钝顶螺旋藻单细胞原生质体
- 节旋藻（螺旋藻）大分子量DNA的两种制备方法
- ＜正＞ 近年来,随着基因组学的兴起,构建细菌人工染色体（Bacterial Artificial Chromosome,BAC）或酵母人工染色体（ Yeast Artificial Chromosome, YAC）文库、...
- 茅云翔张宝红杨官品张学成
- 文献传递
