张继明
- 作品数：135 被引量：815H指数：16
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理生物学哲学宗教更多>>
- 一种乙型肝炎病毒cccDNA的数字微滴PCR检测方法及其试剂盒
- 本发明属生物技术领域，涉及一种检测乙型肝炎病毒共价闭合环状脱氧核糖核酸的方法以及试剂盒。本发明采用专用组织DNA提取试剂盒提取HBV DNA，并采用选择性荧光定量PCR技术对乙型肝炎病毒cccDNA进行检测，核酸提取后，...
- 张继明江培学毛日成
- 文献传递
- 一种新乙型肝炎病毒表型耐药分析方法的建立
- 2014年
- 目的 建立一种新的、简便的HBV表型耐药分析方法,通过置换完整的反转录酶（RT）区研究药物敏感性.方法 首先全基因扩增未经核苷（酸）类似物治疗患者的HBV DNA,构建含HBV野毒株全基因组表达质粒PHY536207（B基因型）及PHY97（C基因型）,继而在RT区上、下游设计限制酶切位点,改造后的质粒分别命名为mPHY536207及mPHY97.以CHB患者血清中分离到的拉米夫定（LAM）耐药变异株和阿德福韦酯（ADV）耐药变异株为骨架,分别构建LAM耐药株质粒PHY634和ADV耐药株质粒PHY6923,再用耐药株的RT区段取代mPHY536207中的RT区构建重组质粒,命名为RT634（LAM耐药）及RT6923（ADV耐药）.分别用RT区置换前、后的质粒转染Huh7细胞,用ELISA法检测分泌到细胞上清液中的HBsAg水平,用实时PCR和Southern印迹法检测细胞内HBVDNA水平.结果 成功构建B型和C型野毒株表达质粒PHY536207和PHY97,经转染Huh7细胞证实有HBV复制能力,6孔细胞培养板中每孔细胞所抽提的HBV DNA均＞1＆#215;107拷贝/mL;在RT区上游设计的Pst Ⅰ酶切位点不影响HBV的表型（HBsAg的表达及HBV DNA的复制）.在PHY634及RT634转染实验中,HBV DNA水平却并未随LAM浓度的升高而明显下降,50％抑制浓度（IC50）＞100 μmol/L,mPHY536207仅为0.18 μmol/L;PHY6923及RT6923转染实验中,HBV DNA对外加的ADV不敏感,IC50＞100 μmol/L,明显高于mPHY536207（1.2 μmol/L）.结论 本研究建立了一种新的HBV表型耐药分析方法,可通过RT区置换来研究RT区变异对药物敏感性的影响.
- 李新艳陈良马张妹毛日成黄玉仙张继明
- 关键词：抗药性表型
- 一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用，所述mRNA药物为脂质纳米颗粒LNP‑IL‑21，其由用于表达IL‑21蛋白或其突变体的IL‑21mRNA和用于递送mRNA的脂质制成，具体为...
- 谢幼华刘晶张继明沈忠良章申琰
- 原发性胆汁性肝硬化的诊治教训被引量：3
- 2005年
- 尹有宽于红缨李广明张继明卢清黄玉仙张清波邬祥惠
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化药物治疗肝功能
- 一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法
- 本发明属医学检验领域，涉及药物耐药基因的检测方法，具体涉及一种测定乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异的方法。本发明方法克服现有技术的缺陷，通过设计特定引物，采用套式PCR方法进行扩增，所获扩增产物使用BglI、BseDI进行酶...
- 张继明毛日成尹有宽王新宇
- 文献传递
- RNA干扰抑制丙型肝炎病毒复制的研究进展被引量：2
- 2005年
- 王新宇尹有宽张继明
- 关键词：病毒复制丙型肝炎RNA干扰技术转录后基因沉默碱基配对
- 长期核苷类似物经治的乙肝表面抗原低水平的慢性乙型肝炎患者联合长效干扰素治疗的临床疗效分析
- 应悦喻一奇张雪云张继明张文宏黄玉仙
- 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清HBeAg水平测定及意义被引量：1
- 2002年
- 目的：了解拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者的HBeAg水平变化及意义。方法：63例HBeAg阳性、HBV DNA阳性，ALT升高的慢性乙型肝炎按2：1比例随机分为拉米夫定治疗组和对照组，动态检测血清学、生化学和病毒学变化。结果：治疗12mo时9例患者HBeAg转为阴性(21．42％)，其中6例同时出现Anti-HBe(14．28％)。多数患者尽管未出现HBeAg血清转换，但HBeAg水平在拉米夫定治疗后均有下降，对照组HBeAg滴度变化不明显。HBeAg转阴组治疗前HBeAg水平平均为742．74，未转阴组为1454．12，两组相比有显著性的差异(P=0．0153)，表明治疗前HBeAg水平影响HBeAg转阴及HBeAg血清转换。结论：治疗前HBeAg水平是HBeAg转阴及HBeAg血清转换的预测因素：多数患者尽管未出现HBeAg血清转换，但HBeAg水平均显著降低。
- 尹有宽张继明卢清张清波邬祥惠翁心华
- 关键词：拉米夫定慢性乙型肝炎血清HBEAG
- 乙型肝炎病毒对核苷(酸)类似物耐药的现状被引量：1
- 2007年
- 张继明
- 关键词：肝炎病毒乙型核苷(酸)类似物耐药
- 应用滚环扩增技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的研究被引量：5
- 2010年
- 目的 应用滚环扩增（RCA）技术检测HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）,观察该方法的特异性和敏感性.方法 以HBV全基因质粒为模板,经酶切、连接、浓缩、胶回收纯化等步骤,构建和制备HBV cccDNA标准品.抽提7例慢性乙型肝炎患者肝组织总DNA,进行滚环扩增.用HBV cccDNA标准品、3.2 kb线性HBV DNA、健康肝组织总DNA及15例慢性乙型肝炎患者血清总DNA作为对照,验证此方法的特异性.将HBV cccDNA标准品进行系列稀释,了解该方法的敏感性.结果 成功构建了HBV cccDNA,并可用RCA方法进行扩增.RCA方法可从2 mg的慢性乙型肝炎患者肝组织中检测到HBV cccDNA,并可检测低至1×102拷贝/μL的HBV cccDNA.RCA方法不能检测3.2 kb线性HBV DNA,在健康肝组织及15例慢性乙型肝炎患者血清中亦检测不到HBV cccDNA.结论 RCA方法操作较方便,具有很高的特异性和敏感性.
- 赵旭刘红艳李新艳秦艳丽邬祥惠翁心华佘会元张继明
