朱凌
- 作品数：14 被引量：59H指数：5
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京大学人民医院研究与发展基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TTV基因酶切分型研究
- 2001年
- 目的了解中国ＴＴＶ基因分型状况。方法采用套式ＰＣＲ检测Ｄ８、 Ｄ１０、 Ｄ２２、 Ｄ２５、 Ｄ２９血清中ＴＴＶ ＤＮＡ，限制性内切酶和ＰＣＲ产物直接测序技术进行酶切和序列分析。结果 Ｎ２２～ Ｄ８存在 ＢｓｔＵＩ特异性切点， Ｇ１ｂ～Ｄ１０无 ＢｓｔＵＩ切点，有ＥｃｏＲＩ切点，Ｇ２ａ、Ｄ２５、Ｄ２９序列均存在Ｈａｅ和Ｔｓｐ５０９切点，Ｇ２ｂ－Ｄ２２除存在ＨａｅⅢ切点之外还具有ＭｂｏⅠ切点。Ｐａｔ３～ＴＴｈ６仅有Ｈａｅ Ⅲ切点。结论ＡＢ００８３９４～Ｄ８具有相同的切点可能均属ｌａ型，Ｇ１ｂ－Ｊｃａｓｅ５切点相同可能为１ｂ型，ＴＴｈ１～１和ＴＴｈ１～２可能属１型中的其它亚型。Ｄ２５～Ｄ２９酶切点相同为２ａ型，Ｇ２ｂ～Ｄ２２切点相同为２ｂ型，Ｐａｔ３～ＴＴｈ６切点相同可能为２型中的其它亚型。
- 杜绍财张玲荣朱凌季颖张敏
- 关键词：TTV-DNA基因型聚合酶链反应
- 磷酸酯酶抑制剂冈田酸对HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒复制的影响
- 2007年
- 目的初步鉴定可能与HBV核心蛋白去磷酸化有关的磷酸酯酶。方法以磷酸酯酶2A抑制剂冈田酸(OA)处理体外培养的人肝癌HepG2.2.15细胞。将细胞分为4组,分别加入终浓度为0(对照组)、10、20、30ng/ml的OA(OA10ng组、OA20ng组、OA30ng组),每组各设5孔。在培养0、2、4、6d时分别收集各组细胞培养上清液,采用电化学发光方法检测HBsAg浓度,荧光实时定量PCR方法检测HBVDNA拷贝数。取培养2d时的各组细胞,采用蛋白质印迹方法检测HBcAg异质性,免疫荧光细胞化学染色方法检测HBcAg亚细胞定位。结果OA10ng组、OA20ng组各时间点细胞培养上清液HBsAg浓度、HBVDNA拷贝数分别与对照组相应各时间点比较,差异均无统计学意义;在培养2d时HBcAg电泳条带、亚细胞定位分别与对照组比较均无明显异常。OA30ng组在培养2、4、6d时细胞培养上清液HBsAg浓度(ng/ml)均明显低于对照组相应各时间点(分别为385.9±43.1vs510.2±63.3、346.5±39.6vs484.6±59.4、295.1±32.8vs467.2±52.9,P值分别为0.028、0.022、0.016);在培养2d时细胞培养上清液HBVDNA拷贝数(ml-1)明显高于对照组相应时间点(6.71±6.07vs6.34±5.72,P=0.022),而在培养4、6d时均明显低于对照组相应各时间点(分别为5.80±5.19vs6.29±5.68、4.75±4.15vs6.25±5.58,P值分别为0.008和0.005);在培养2d时HBcAg电泳条带明显增宽,约20%的HepG2.2.15细胞的细胞核内HBcAg红色荧光信号明显增强。结论短时间、高浓度的OA处理可提高HBVDNA的复制水平和核心蛋白的磷酸化水平,提示磷酸酯酶2A可能参与了HBV核心蛋白的去磷酸化过程。
- 潘孝本季颖朱凌王茜管文莉韩进超魏来
- 关键词：DNA复制
- 甲型肝炎病毒抗体室内质控血清制备及评价被引量：6
- 2013年
- 甲型肝炎（甲肝）是由甲型肝炎病毒（Hepatitis A virus，HAV）引起的，以黄疸、发热、腹痛、厌食为主要症状的急性病毒感染性疾病，主要通过粪-口途径传播。甲肝是与环境卫生和个人卫生水平有关的世界范围内的传染病之一。
- 孔祥沙季颖张海莹朱凌纪和平魏来
- 关键词：甲型肝炎病毒抗体血清制备室内质控粪-口途径卫生水平环境卫生
- 慢性丙型肝炎患者血清基因型与丙型肝炎病毒RNA 的相关性研究
- 目前世界范围内有大约1．7亿人感染丙型肝炎病毒(}~EPATITIS C VIRUS，HCV)。HCV感染可导致慢性丙型肝炎、肝硬化及肝癌的发生。HCV有6个主要的基因型及不同亚型，不同基因型的致病性、与干扰素(IFN...
- 张海莹魏来封波尚佳谢青饶慧瑛王江华季颖朱凌杨瑞锋
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- 一种HBV DNA定量检测试剂的准确性分析被引量：1
- 2018年
- 目的评价一种新型HBV DNA定量检测试剂的准确性。方法将第3代HBV DNA WHO国际标准品稀释为6种不同梯度浓度样本,8.5×10~5、8.5×10~4、8.5×10~3、8.5×10~2、85及42.5 IU/ml,用待评价试剂care HBV PCR Assay V3.0检测,并对实测值和理论值进行相关性分析;以Cobas Taqman HBV V2.0为参比试剂,用care HBV PCR Assay V3.0检测93份HBV感染者标本和30份健康者标本HBV DNA含量,并对2种试剂定量检测结果进行相关性和一致性分析;采用巢式PCR扩增漏检标本的HBV S区,直接测序法测定其基因型。结果 care HBV PCR Assay V3.0检测WHO国际标准品的实测值和理论值具有线性相关;2种定量试剂检测93份HBV感染者标本结果均阳性共68份,检测结果呈线性相关,差异无统计学意义(P>0.05),但care HBV PCR Assay V3.0检测值相对偏低;care HBV PCR Assay V3.0检测有14份标本漏检,其中13份标本Cobas Taqman HBV V2.0检测结果位于30~2 000 IU/ml间;对1份漏检标本的基因型检测结果为C型。结论 care HBV PCR Assay V3.0与Cobas Taqman HBV V2.0试剂检测结果有较好的相关性,但对基因型C型的标本可能存在漏检现象。
- 孔祥沙杨瑞锋季颖朱凌张海莹王震宇魏来
- 关键词：乙肝病毒DNA
- 两种HBVDNA检测试剂的比较被引量：11
- 2011年
- 目的分析两种试剂在HBVDNA定量检测中的相关性，评价其在不同病毒载量时的检测性能。方法用人AB型血清将WHO第2代HBVDNA国际标准品（编号：97／750）配制成不同浓度的10份样本，10份样本的浓度分别为1×10^6、5×10^5、1×10^5、5×10^4、1×10^4、5×10^3、1×10^3、5×10^2、1×10^2、1×10^1kIU／L。采用深圳匹基生物工程股份有限公司生产的HBVDNA荧光定量PER检测试剂（PG试剂）和美国罗氏公司生产的定量PCR试剂（罗氏试剂）检测78份HBV感染者血清、30份健康献血者血清和10份不同浓度范围的WHO标准品中HBVDNA含量。对两种试剂检测HBVDNA结果相关性进行分析；对试剂在不同病毒载量时的检测性能进行评价；并对漏检情况进行分析。两种试剂每批检测均设有阴性质控、弱阳性质控和强阳性质控。结果两种试剂对WHOHBVDNA标准物质稀释血清均能正确检出，罗氏试剂能检出最高稀释度样本浓度为2．00（klU／L，lg），PG试剂能检出最高稀释度样本浓度为3．00（kIU／L，lg）；两种试剂检测结果存在线性相关（R^2=0．9387，P〈0．01），罗氏试剂检测上限与理论值相符，大于检测上限的标本经稀释重复测定，罗氏试剂检测结果[（8．35±0．20）klU／L，lg]高于PG试剂检测结果[（7．73±0．42）klU／L，lg]，差异有统计学意义（t=3．776，P〈0．05）。两种试剂检测108份血清标本中HBVDNA含量，罗氏试剂检测值[（5．88±1．64）kIU／L，lg]高于PG试剂检测值[（5．25±1．55）klU／L．1g]，差异有统计学意义（t=12．297，P〈0．01）；检测高HBV病毒载量[（〉5．00-≤7．00）klU／L，lg和（〉7．00～≤9．00）klU／L，lg]组，两种试剂的相关性较高（R^2分别为0.7797、0．6037，P均〈0．01）；对低HBV病毒载量（〉3．00-≤5．00kIU／L，lg）组，两种试剂的相关性较低（R。=0．4173，P〈0．01）；病毒载量为〉3．00-≤4．00k
- 张海莹季颖朱凌饶慧瑛王江华张恒辉谢兴旺魏来
- 关键词：肝炎病毒乙型病毒病毒载量聚合酶链反应
- 国产HCV核酸扩增荧光定量试剂盒的溯源与单位统一的研究被引量：3
- 2010年
- 目的确定中国SFDA批准上市销售的国产HCV RNA扩增荧光定量试剂的量值X（copies/ml,lg）与标准物质的参考值Y（IU/ml,lg）之间的换算公式.方法用人AB型血清将WHO第二代HCV RNA国际标准品（编号：96/798）配制成不同浓度的样本7份,7份标准品的浓度分别为100 000、50 000、25 000、10 000、5 000、2 500、1 000 IU/ml.采用国内3种HCV RNA荧光定量试剂的2个不同的批次检测这7份不同浓度范围的标准品,每个批次重复测定4次.检测方法采用实时荧光定量PCR.结果 HCV RNA荧光定量试剂盒的量值X与标准品参考值Y之间的关系,试剂A：Y=0.902 0 X＋0.284 9,R2=0.953 3,P＜0.01,n=56;试剂B：Y=0.875 7 X＋0.562 4,R2=0.956 5,P＜0.01,n=56;试剂C：Y=0.843 8 X＋0.560 5,R2=0.945 8,P＜0.01,n=56.结论 3种试剂的量值与标准品参考值之间的换算公式不同,提示3种试剂的量值应进行更严格的溯源.3种试剂的换算公式能将其量值初步标准化,使不同试剂的量值之间具有可比性,为HCV感染的临床诊断和治疗监测初步提供统一的HCV RNA载量检测标准.
- 饶慧瑛季颖朱凌王江华刘峰魏来
- 关键词：肝炎病毒属聚合酶链反应
- 北京大学人民医院2015年-2018年HCV感染筛查情况分析被引量：2
- 2019年
- 目的分析一家综合性三甲医院HCV感染筛查漏检的情况。方法 回顾分析2015年-2018年就诊于北京大学人民医院同期进行抗-HCV和HCV RNA检测的3659例患者信息。抗-HCV采用雅培Architect I2000和强生Vitros 3600检测,HCV RNA采用罗氏Cobas AmpliPrep/Cobas Taqman 96全自动病毒定量系统检测。收集HCV RNA阳性而抗-HCV阴性的患者标本,Sanger测序法检测HCV基因型,并对患者HCV感染状况及其临床状况追踪随访。抗-HCV检测结果用样本吸光度值与阳性判定值(cut-off)的比值(S/CO)表示。利用GraphPad Prism 5.0作抗-HCV S/CO比值分布图。结果 3659例患者中6例(0.16%)患者至少1种试剂检测抗-HCV为阴性,而HCV RNA为阳性,均值为(6.40±1.86)log 10 IU/ml。6例患者中5例(83%)为急性白血病患者,另1例为呼吸系统疾病患者。6例患者中1例预后良好,3例预后不良,2例死亡。结论 HCV感染使用抗体作为首选筛查方法,仍有0.16%感染者会被漏检,且漏检患者多数预后不良,对免疫功能不全的患者,应检测HCV RNA以避免漏检。
- 孔祥沙杨瑞锋张海莹季颖朱凌刘艳魏来
- 关键词：肝炎病毒属丙型肝炎抗体病毒载量
- 树突状细胞亚群相对数与乙型肝炎病毒复制及肝损伤的关系被引量：18
- 2005年
- 目的探讨外周血树突状细胞(DC)亚群相对数量与慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)患者血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA水平和肝脏病理炎症损伤程度问的关系。方法定量聚合酶链反应法检测患者血清HBV DNA,利用流式细胞仪检测外周血DC亚群。结果血清HBV DNA<106拷贝/ml慢乙肝患者外周血DC2相对数量显著高于HBV DNA≥106拷贝/ml患者和健康者(P<0.05),而后两组间DC2的差异无统计学意义;上述三组中DC1相对数量差异无统计学意义;外周血DC亚群相对数与患者临床型别和肝内炎症损伤程度无关。结论外周血DC2亚群的升高与慢乙肝患者体内HBV低水平复制相关,提示DC2 可能在抑制HBV复制中发挥作用;外周血DC亚群相对数与肝组织炎症程度不相关。
- 高斌陈红松赵桂鸣朱凌季颖费然戴晨阳徐健朱理珉魏来
- 关键词：乙型肝炎病毒复制树突状细胞亚群肝损伤外周血树突状细胞肝内炎症
- HEV核酸、抗原、抗体对HEV感染的诊断价值被引量：2
- 2020年
- 目的探讨HEV核酸(HEV RNA)、HEV抗原(HEV Ag)、HEV抗体(HEV IgM抗体和HEV IgG抗体)在临床诊断HEV感染中的作用。方法收集在北京大学人民医院进行HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测的13992例标本,其中1924例HEV IgM抗体或HEV IgG抗体阳性。分别采用荧光PCR法进行HEV RNA和基因型检测,酶联免疫吸附试验方法进行HEV Ag、HEV IgM抗体和HEV IgG抗体检测,并检测ALT、AST、TBil和DBil水平。计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验。结果1924例标本中HEV IgM抗体阳性152例(7.9%),HEV IgG抗体阳性1897例(98.6%),HEV RNA阳性62例(3.2%),HEV Ag阳性55例(2.9%)。HEV IgM抗体阳性组中HEV RNA阳性率为40.8%(62/152),HEV Ag阳性率为36.2%(55/152)。HEV RNA阳性组中HEV Ag阳性率为88.7%(55/62)。HEV RNA阳性组(n=62)ALT、AST、TBil、DBil水平高于HEV RNA阴性组(n=90)(Z值分别为-7.609、-6.942、-5.815、-6.130,P值均<0.001),HEV Ag阳性组(n=55)ALT、AST、TBil、DBil水平明显高于HEV Ag阴性组(n=97)(Z值分别为-6.413、-5.786、-5.199、-5.545,P值均<0.001)。巢式PCR扩增测序结果显示58例HEV RNA阳性,4例阴性。HEV IgG抗体阳性高水平明显降低HEV Ag检测的S/CO值,甚至出现阴性结果。结论与HEV抗体相比,HEV Ag可以提高戊型肝炎的诊断水平,具有一定的临床意义;高水平的转氨酶或胆红素可以辅助诊断HEV感染;高水平的HEV IgG抗体会降低HEV Ag检测值,检测时应注意HEV Ag阴性时HEV IgG抗体值。
- 李晓鹤王江华季颖刘艳朱凌贾玉缘王震宇史羿君张海莹饶慧瑛
- 关键词：戊型肝炎病毒RNA抗原抗体
