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内质网伴侣蛋白Grp78在STZ诱导Ⅰ型糖尿病不同时期表达变化: 目的:葡萄糖调节蛋白78(Grp78)是热休克蛋白70家族的成员之一,作为一种分子伴侣在蛋白质的折叠和转运过程及内质网应激反应中发挥重要作用,也被称为内质网应激marker蛋白。本实验研究Grp78在 STZ诱导的Ⅰ型糖...; 王敏吴砂赵晓平彭吉林李文涵何峰蓉李黎雷萍朱慧芬沈关心; 关键词：内质网应激; 文献传递

SLC修饰肿瘤诱导外周血单个核细胞增殖与抗瘤作用: 目的:本实验将转染次级淋巴组织趋化因子(SLC)的肿瘤细胞与外周血单个核细胞(PBMC)共培养后, 探讨致敏后PBMC凋亡及抗肿瘤效应。方法:①转染SLC的肿瘤细胞或未转染SLC的肿瘤细胞经丝裂霉素C处理,分别与PBMC...; 吴砂赵晓平彭吉林王敏李文涵袁晓梅邢薇刘静雷萍朱慧芬沈关心; 关键词：次级淋巴组织趋化因子 PBMC; 文献传递

EGF对一膜表面稳定表达EGFR细胞系生物学特性的影响: 2006年; 目的探讨表皮生长因子(ep iderm al growth factor,EGF)对一膜表面稳定表达表皮生长因子受体(EGF receptor,EGFR)细胞系CHO-EGFR-GFP1生物学特性的影响。方法采用台盼蓝染色计数活细胞数观察不同浓度EGF刺激48 h后细胞增殖情况;PI染色一步法流式细胞仪检测不同浓度EGF刺激48 h和100 ng/mL EGF刺激不同时间细胞周期改变以及细胞凋亡,Ho-echst 33258染色观察细胞凋亡;流式细胞术测定GFP(green fluorescent prote in,绿色荧光蛋白)平均荧光强度判定EGFR表达水平的变化。结果低浓度的EGF可促进CHO-EGFR-GFP1细胞增殖,而高浓度EGF刺激则引起CHO-EGFR-GFP1细胞失去黏附、细胞周期阻滞、促进细胞凋亡以及抑制细胞增殖;高浓度EGF以一种剂量依赖性方式同时上调EGFR的表达和引起细胞凋亡。结论不同浓度EGF对CHO-EGFR-GFP1细胞生长特性影响不同,高浓度EGF刺激引起肿瘤细胞失去黏附可能是导致肿瘤细胞容易脱落、发生转移的机制之一。; 赵晓蓉王敏彭吉林吴砂赵晓平黄韬王国斌伍钢沈关心; 关键词：表皮生长因子受体

可溶性人干细胞因子与EGFP融合基因的构建及真核表达被引量：1: 2004年; 目的　可溶性人干细胞因子 (SCF)膜外活性区与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)融合基因表达载体的构建及其表达。方法　应用基因工程技术构建重组载体 ,电穿孔转染CHO K1细胞株 ,荧光分光光度计检测上清液中融合蛋白的表达 ,流式细胞仪检测其活性。结果　融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达 ,并分泌至上清 ,且SCF EGFP融合蛋白中分子标签EGFP未影响可溶性人SCF膜外活性区的结构及其生物学活性。结论　可溶性人干细胞因子与EGFP融合基因载体构建成功 ,表达的融合蛋白具有生物活性 ,为进一步研究SCF对造血干细胞的生物学作用奠定了基础。; 雷萍虞涛余柏林朱慧芬赵晓平廖雯君张悦邵静芳杨静沈关心; 关键词：干细胞因子绿色荧光蛋白融合基因

稳定表达EGFR-GFP融合蛋白细胞系的建立被引量：5: 2006年; 目的:建立稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系。方法:CaC l2法将pEGFR-EGFP质粒转化DH5α,酶切鉴定后提取质粒经电穿孔转染CHO-K1细胞;以EGFP作为荧光报告分子,克隆化培养以获取单克隆阳性细胞;流式细胞术、荧光显微镜术、W estern B lot检测转染细胞EGFR-GFP融合蛋白的表达;比较稳定转染细胞及未转染细胞的生长曲线;反复冻存、复苏、传代鉴定细胞表达EGFR-GFP融合蛋白的稳定性。结果:获得1株稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系,命名为CHO-EGFR-GFP1,融合蛋白主要表达于细胞膜。稳定转染细胞和未转染细胞生长特性无显著差异。结论:成功获得膜表面稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系,为研制以EGFR为靶点的抗肿瘤药物以及研究EGFR与其配体间相互作用奠定了基础。; 赵晓蓉曹利民彭吉林王敏赵晓平吴砂李文涵叶庆沈关心; 关键词：表皮生长因子受体绿色荧光蛋白细胞系

Survivin反义RNA真核表达载体的构建及鉴定(英文): 2003年; 目的为了特异封闭白血病细胞survivin的表达,抑制其功能,本实验构建了survivin反义核酸载体并导入白血病细胞系中。方法应用RT-PCR获得survivin的cDNA片段,反向插入pcDNA3质粒载体中;经限制性酶切和测序鉴定所构建的反义核酸是否正确;采用电转染方法将重组体导人HL-60细胞中;RT-PCR技术检测转染细胞sunrivin表达的变化。结果经限制性酶切和测序鉴定证明survivin反义核酸已成功构建;RT-PCR产物电泳结果显示,与转染前细胞、空质粒转染细胞相比,转染survivin反义核酸的细胞survivin mRNA水平明显降低。结论本实验已成功建立了survivin反义核酸真核表达载体,而且在白血病细胞系中发挥了特异封闭作用,为进一步研究survivin反义核酸在白血病治疗中的作用提供了实验基础。; 王晓娟戴国仪赵晓平于慧玲王国华朱慧芬张悦沈关心; 关键词：SURVIVIN 反义RNA 真核表达载体白血病 RT-PCR

内质网滞留型抗TfR胞内抗体的构建、表达及其对肿瘤细胞生长的抑制: 目的:铁是细胞生长增殖及机能活动所必需的微量元素之一,而肿瘤细胞主要是通过高表达转铁蛋白受体(TfR)来摄取铁。铁剥夺可以抑制肿瘤细胞生长及促进肿瘤细胞凋亡,本研究拟通过胞内抗体技术探讨内质网滞留型抗转铁蛋白受体单链抗体...; 彭吉林吴砂赵晓平王敏李文涵沈昕代维雷萍朱慧芬沈关心; 关键词：转铁蛋白受体胞内抗体肿瘤细胞; 文献传递

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赵晓平