杨华 作品数:47 被引量:84 H指数:5 供职机构: 宁夏医科大学临床医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 宁夏回族自治区自然科学基金 教育部“春晖计划” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
肝再生增强因子单克隆抗体的制备与初步鉴定 2016年 为了制备重组人肝再生增强因子(rh ALR)单克隆抗体(Mc Ab),并鉴定其特异性,从而研发一种特异性较好的检测试剂,试验以纯化的rh ALR为抗原免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合建立能稳定分泌抗rh ALR单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,用免疫荧光法对自行制备的单克隆抗体与购买的商品化多克隆抗体进行比较。结果表明:筛选出的5株稳定分泌抗rh ALR的单克隆抗体酶联免疫吸附方法(ELISA)鉴定其培养上清液和腹水中效价分别为1×10~3、1×10~3、1×10~3、2×10~3、2×10~3和1×10~4、1×10~5、1×10~3、1×10~4、5×10~5。说明与商品化多克隆抗体相比,自行制备的单克隆抗体具有较好的敏感性。 刘瑞 雷鸣 杨华 楚元奎 杨洋 田盼 廖国玲关键词:特异性 敏感性 以临床应用兼过程为导向的临床生物化学检验课程评价体系的建立与实践 被引量:4 2015年 通过建立过程考核、实验考核、闭卷考核"多层次、多形式、多特色"的临床应用兼过程为导向的临床生物化学检验课程评价体系的指标,阐述其具体做法,并就其实施的效果进行讨论分析,旨在缩短学生适应将来岗位的时间,强化学生的实践能力和动手能力,提高学生分析问题、解决问题的逻辑思维能力,进一步促进课程教学质量的提高。 韩学波 马晓恒 徐广贤 郭乐 廖国玲 杨华 王莉关键词:过程控制 临床生物化学检验 教学改革 ANXA1在胃癌中的表达及临床意义 被引量:2 2013年 目的检测胃癌组织中膜联蛋白1(ANXAl)的表达,探讨ANXAl与胃癌发生发展的关系。方法采用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)对20例胃炎组织和80例胃癌组织中的ANXAl表达情况进行检测,并分析ANXA1表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果在80例胃癌组织中,ANXAl阳性表达率为90.0%(72/80),明显高于胃炎组织的表达(20.O%,4/20);ANXAl的表达与胃癌的淋巴结转移之间差异具有统计学意义(P〈O.01),而与患者年龄、性别、胃壁侵犯、分期、分化无统计学意义。结论ANXAl高表达在胃癌的发生发展中可能起着重要作用。 杨华 廖国玲 杨风琴 刘学英 王莉 郭乐关键词:胃癌 免疫组化 MiR-5047在乳腺癌细胞增殖迁移中的作用及表达调控 被引量:4 2021年 探讨miR-5047在乳腺癌细胞中的表达及其在乳腺癌细胞增殖和迁移中的作用,并明确地西他滨在miR-5047表达调控中的作用。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人乳腺癌细胞系和正常乳腺上皮细胞MCF10A中miR-5047的表达水平;将miR-5047模拟物(mimic),阴性对照(NC)分别转染至MDA-MB-231和MCF7细胞,经平板克隆实验、MTT实验、划痕愈合实验检测乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,通过qRT-PCR和Western blot检测相关基因表达及蛋白水平。使用浓度5μmol/L和10μmol/L的地西他滨分别处理MDA-MB-231和MCF-7细胞,经qRT-PCR检测不同浓度和处理时间条件下地西他滨对miR-5047表达的影响。同时,通过形态观察和Western blot检测地西他滨对乳腺癌细胞上皮间质转化的影响。与正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,miR-5047在乳腺癌细胞中表达均显著下调。miR-5047过表达可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,促进上皮细胞标志物E-cadherin的表达,抑制间质细胞标志物Vimentin的表达。不同浓度地西他滨处理MDA-MB-231和MCF7细胞后,miR-5047表达均增强,且10μmol/L作用48 h效果最显著。地西他滨可诱导MDA-MB-231细胞向上皮样转变。miR-5047在乳腺癌细胞系中表达显著下调,过表达miR-5047可抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,地西他滨可促进乳腺癌细胞中miR-5047的表达,并诱导细胞向上皮样转变。 路玉祥 李元 方丹丹 王学博 杨万鹏 楚元奎 杨华关键词:乳腺癌 地西他滨 上皮间质转化 幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用 本发明提供了幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗及制备方法与应用,属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的幽门螺旋杆菌四价毒力因子GEM颗粒疫苗GEM‑SAM<Sup>E</Sup>‑FVpE,主要是将含有核心组件SA... 刘昆梅 郭乐 杨华 王淑娥 张帆 姜中佳文献传递 P37蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义 被引量:1 2011年 目的研究卵巢癌组织中P37蛋白的表达,探讨猪鼻支原体感染与卵巢癌发生的关系。方法采用免疫组化法检测109例卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中的P37蛋白表达情况。结果卵巢癌组织中P37蛋白阳性表达率为43.1%(47/109),正常卵巢组织的阳性表达率为0(0/30),两者相比差异具有统计学意义(P<0.001)。结论卵巢癌组织中存在猪鼻支原体的感染,卵巢癌的发生与支原体感染有一定的相关性。 杨华 寿成超关键词:卵巢肿瘤 临床生物化学检验实践操作技能评价体系探讨 被引量:4 2011年 医学检验是一门发展迅速、多技术、多学科交叉的实践性很强的学科,实验教学是完成这门课程的重要环节,而要提高学生的实践能力、创新能力和综合素质,必须进行严格的实践操作技能评价。但在目前的临床生物化学检验课程中,测定的实验项目繁多,测定的方法多,不利于老师对学生进行实践操作技能评价。笔者在教学过程中,根据教学大纲的要求对临床生物化学检验课程进行了适当的改革和总结,并探索出了一个较好的实践操作技能评价体系。 韩学波 廖国玲 杨华 王莉关键词:临床生物化学检验 实践操作技能 单纯性2型糖尿病与糖尿病肾病患者尿液中α1-微球蛋白和激肽原1的表达分析 被引量:9 2017年 目的研究尿α1-微球蛋白(α1-MG)和尿激肽原1(KNG1)水平在单纯性2型糖尿病与糖尿病肾病患者中的表达变化情况。方法选取2016年9月~2017年3月在宁夏医科大学总医院住院的糖尿病肾病患者34例作为实验组(DN组)以及同时期单纯性2型糖尿病患者32例作为对照组(DM组),其中,DN组包括甲组(HbA1c<10%)19例和乙组(HbA1c≥10%)15例。测定尿α1-MG和尿KNG1及各项生化指标。结果与DM组相比,尿α1-MG在DN组下降(t=9.972,P<0.01),尿KNG1在DN组升高(t=-3.356,P<0.01),差异均具有统计学意义;DN乙组尿α1-MG、血清GLU水平均高于DN甲组(t=-2.092,-3.464,均P<0.05),DN乙组血清Cr水平低于DN甲组,差异具有统计学意义(t=2.181,P<0.05);此外,在DN组,根据Pearson相关分析显示,尿α1-MG与HbA1c,尿KNG1呈正相关(r=0.33和0.355,均P<0.05),其它未见明显相关。结论尿α1-MG和KNG1的表达在DN的发生发展中存在一定的变化规律,可为DN的临床诊断提供依据。 于菲菲 庞白冰 杨华 廖国玲关键词:糖尿病肾病 Α1-微球蛋白 幽门螺旋杆菌重组尿素酶B亚基的纯化及其免疫学性质的研究(英文) 被引量:2 2014年 目的:幽门螺旋杆菌(Hp)尿素酶是Hp重要的定制因子和致病因子,Hp尿素酶活性位点位于Hp尿素酶B亚基(Ure B),研发基于Ure B的Hp疫苗是一种很有前景的防治Hp感染的策略。方法:主要利用基因克隆技术从幽门螺旋杆菌标准菌株SS1(Hp SS1)获得Hp尿素酶B亚基基因,并构建含有重组Hp尿素酶B亚基(rU reB)基因的重组表达载体p ET-rU re B及其重组菌株;重组菌株经蛋白表达和优化后,利用Ni-NTP镍离子亲和层析和DEAE Sepharose FF阴离子交换层析纯化重组尿素酶B亚基(rU re B),并进一步通过腹腔注射免疫BALB/c小鼠,研究rU re B的免疫学性质。结果:通过基因克隆技术成功获得了Hp尿素酶B亚基基因,并成功构建了重组表达载体p ET-rU re B及其重组菌株BL21(DE3)/p ET-rU re B,经蛋白表达优化及纯化,可获得高纯度(96.5%)的重组蛋白rU re B。重组蛋白rU re B辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫BALB/c小鼠,经间接ELISA鉴定小鼠能够产生针对天然Hp尿素酶和Ure B的高滴度特异性抗体,且能够显著性抑制Hp尿素酶的活性。结论:重组Hp尿素酶B亚基能够在大肠杆菌表达系统中获得较高水平的表达,具有较高的免疫学特异性,其抗体能够有效抑制Hp尿素酶活性。为研究基于尿素酶的防治Hp感染的Hp疫苗奠定了一定的实验基础。 秦玉红 刘昆梅 廖国玲 杨华 徐广贤 李秀萍 郭乐关键词:幽门螺旋杆菌 尿素酶 试剂盒研发及评价在《临床生物化学检验技术》课程中的应用研究 2018年 通过将试剂盒研发及评价应用到临床生物化学检验技术理论和实践课程中,以及指导学生以试剂盒的研发及评价参与大学生创新性实验等方面,旨在提高学生技能和研发意识,发挥学生学习的主动性,提高课堂教学效果,提高教学质量。同时提高教师综合教学能力、科研意识和能力,做到教学相长。 韩学波 郭乐 廖国玲 杨华 王莉 徐广贤