楚元奎
- 作品数：65 被引量：160H指数：8
- 供职机构：宁夏医科大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 地西他滨逆转人乳腺癌细胞中miR-5047基因甲基化状态的研究
- 2021年
- 目的探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047表达及其启动子甲基化状态的影响。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR法分别检测人乳腺正常MCF-10A细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中miR-5047的表达水平及miR-5047启动子区的甲基化状态。用5μmol/L和10μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231细胞,MSP法检测miR-5047启动子区的甲基化状态,qRT-PCR法检测miR-5047的表达。结果与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A相比,乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中miR-5047呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231细胞中miR-5047启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047表达水平则显著升高。结论地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047的表达。
- 楚元奎路玉祥方丹丹杨丽李元郭乐杨华
- 关键词：乳腺癌地西他滨去甲基化甲基化特异性PCR
- 靶向M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用
- 本申请提供了靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统，可表达多种来源不同的疫苗抗原，用于制备GEM颗粒疫苗，提高口服...
- 郭乐刘昆梅王淑娥何萌李欣楚元奎
- 文献传递
- 甲酰肽受体shRNA稳定转染U87细胞系的构建被引量：1
- 2016年
- 目的构建靶向甲酰肽受体(FPR)基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定转染的U87细胞系。方法设计并合成FPR基因特异性的shRNA序列,构建PDS019_pL/shRNA/GFP/F-FPR慢病毒载体,通过脂质体转染293T细胞包装成FPR慢病毒颗粒,感染U87细胞。荧光显微镜观察转染效果,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测FPR干扰效率。结果成功构建FPR基因shRNA慢病毒表达载体。稳定转染U87细胞后,荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白。实时荧光定量PCR及Western blot证实PDS019_pL/shRNA/GFP/F-FPR慢病毒载体具有良好的干扰效果。结论成功构建FPR shRNA稳定转染的U87细胞系。
- 杨华刘学英杨风琴楚元奎
- 关键词：慢病毒属短发夹RNAU87细胞
- 噬菌体纳米抗体展示库构建中电转化条件的优化
- 2021年
- 目的对DNA电转化条件进行优化,以达到高的转化效率。方法测定不同生长阶段的大肠杆菌TG1、不同电压、不同外源基因(噬菌体质粒pCANTAB5e与驼源VHH片段的连接产物)质量、T4 DNA连接酶去除前后及转化孵育后不同培养温度等条件下的电转化效率,寻找最适电转化条件。结果当大肠杆菌TG1处于生长对数期(OD600为0.4左右)时制备电感受态细胞,取用乙醇沉淀法去除T4 DNA连接酶后的0.7μg连接产物,在电压2.3 kV、电容25μF、电阻200Ω的条件下,采用0.2 cm的电击杯进行电转化,将获得高的转化效率,达7.9×10^(7)CFU/μg DNA,而转化后的培养温度(30℃和37℃)对电转化效率并没有明显影响。结论经优化电转化条件后得到了高的电转化效率,为构建抗体库奠定基础。
- 李艳宁李光琪屈昱良潘俊斐楚元奎张晓春徐广贤
- 关键词：噬菌体抗体库电转化
- GSK3β抑制剂氯化锂对大鼠前列腺增生的影响
- 2014年
- 目的探讨GSK3β抑制剂氯化锂在大鼠前列腺增生治疗中的作用。方法通过皮下注射丙酸睾酮的方法复制前列腺增生模型,建模大鼠随机分成3组:氯化锂高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型对照组,另设正常对照组。高剂量和低剂量治疗组分别以20mg/(kg·d)、10mg(kg·d)的剂量腹腔注射氯化锂,连续给药30d。称量各组大鼠前列腺组织湿重、体积,计算前列腺指数;酶联免疫法测定血清中睾酮(T)、雌激素(E2)和性激素结合球蛋白(SHBG)含量。结果氯化锂治疗组的前列腺湿重、体积和脏器系数较模型对照组显著降低(P<0.01);氯化锂治疗组的T、E2和SHBG水平也较模型对照组降低(P<0.05)。结论 GSK3β抑制剂氯化锂对前列腺增生具有一定抑制作用。
- 楚元奎杨丽廖国玲
- 关键词：前列腺增生氯化锂
- 人神经元素3基因重组逆转录病毒表达载体的构建及其包装细胞株的建立被引量：2
- 2010年
- 为构建表达人神经元素3基因(neurogenin 3,ngn3)的重组逆转录病毒载体,建立稳定表达ngn3的包装细胞株,本研究以流产人胎儿胰腺组织为材料,通过RT-PCR方法克隆出人ngn3基因,将其连接到pMD18-T载体上并测序,结果表明,测序得到的基因序列与发表的人ngn3基因序列(GenBank Accession No.BC126468)完全一致。将EcoRI和HpaI双酶切后的基因片段构建到pMSCV-neo逆转录病毒载体中,酶切鉴定结果表明,pMSCV-ngn3重组逆转录病毒载体构建成功。脂质体法将pMSCV-ngn3重组载体导入PT67包装细胞,G418筛选后,对得到的细胞株进行RT-PCR和免疫组化检测,结果显示,该细胞株在mRNA水平和蛋白水平均稳定表达Ngn3;收集该细胞株的培养上清液,进行RT-PCR检测及电镜观察,结果表明,该细胞株将导入的重组逆转录病毒载体pMSCV-ngn3包装成了具有感染性的病毒颗粒,并将其释放到了培养上清液中。以上结果表明PT67-ngn3包装细胞株建立成功。该细胞株的成功建立,为下一步将ngn3基因应用于提高人胎儿胰腺祖细胞诱导分化效率方面的研究奠定了基础。
- 楚元奎吕长荣陈冬梅曹晖窦忠英
- 关键词：逆转录病毒载体
- 山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养和鉴定被引量：14
- 2006年
- 为了探讨山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离、生长条件以及纯度鉴定，通过2g／L的Ⅰ型胶原酶置于水浴消化4h，200目的滤网过滤后进行低速离心，收集沉淀物，沉降洗涤3～5次，将细胞移至24孔培养板置37℃细胞培养箱中进行培养。12h后开始贴壁生长，腺团开始向外部扩散，生长2～3d，细胞扩散并出现明显的铺路石状，4～5d腺团基本扩散开来并呈一定走向继续生长。经免疫组织化学方法进行细胞染色，细胞表达角蛋白的阳性率达90％以上。
- 丰艳妮吴庆侠吴瑞楚元奎靳亚平
- 关键词：子宫内膜腺上皮细胞免疫组织化学山羊
- 孕早期山羊胎儿IL-4水平与PBMC增殖活性的关系
- 2006年
- 探讨了妊娠早期山羊胎儿IL-4水平与外周血单核细胞（PBMC）增殖活性的关系。用MTT法，检测孕早期山羊胎儿匀浆上清液（FHS）在不同浓度下对PBMC转化增殖活性的影响，设立孕130d胎儿血清（FS）及FHS＋PHA-P对照组；检测蛋白质浓度在1×10^-4mg／mL时IL-4的含苗，并与转化后的含量进行比较。结果：妊娠早期，FHS对PBMC转化活性的影响随着妊娠的发展而逐渐降低，但均低于妊娠后期对照组。FHS蛋白质浓度在1×10^-4～1×10^-5mg／mL时，对PBMC的转化增殖效果均较好（P〈0．05），且与PHA—P具有协同作用；妊娠早期FHS的IL-4水平随着妊娠的发展呈现上升的趋势，且均高于FS对照组，FHS的IL-4水平与转化后无显著差异（P〉0．05）。妊娠早期FHS IL-4水平的上升与PBMC转化活性下降之间呈负相关关系，正常妊娠早期主要是Th2型细胞因子在起作用，因此可以说明，PBMC转化活性的下降可能是IL-4发挥免疫抑制作用的结果，进而说明，妊娠早期胎儿可能通过自身分泌一些Th2型细胞因子，在母体子宫局部免疫中发挥免疫抑制作用，使其自身不被母体排斥，使妊娠能够顺利进行。
- 楚元奎吴瑞吴庆侠丰艳妮靳亚平
- 关键词：淋巴细胞转化怀孕早期母胎免疫
- 模拟预报告在检验医学实验课程中的应用研究
- 2014年
- 实验教学是检验医学很重要一个环节,本研究采用对照研究方法,观察了未实施模拟预报告和实施模拟预报组间的一般学习状况、实验考核成绩模及学生问卷评价,结果表明模拟预报告是提高实验教学中学生创新能力和实践能力、主动学习的有效方法,同时对学生的自主性、探索性也是一种提升培养。
- 于欣杨凤琴杨震楚元奎李宗吉
- 宁夏枸杞总黄酮对高糖诱导损伤人脐静脉内皮细胞抗氧化作用的影响被引量：10
- 2015年
- 目的探讨宁夏枸杞总黄酮对高糖诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)抗氧化作用的影响。方法利用体外培养HUVEC,采用高糖诱导HUVEC建立氧化应激损伤模型,实验分为正常对照组、高糖损伤模型组、枸杞黄酮保护组(100、200、400mg·L-1),以及阳性对照(维生素C 30mg·L-1)组。MTT法测定细胞存活率、测定各组细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活性,及丙二醛(MDA)的含量和一氧化氮(NO)释放量。结果与正常对照组比较高糖损伤模型组MDA含量增高,LDH活性上升,SOD活性明显下降,NO、NOS生成量及活性均下降(均P<0.01)。与高糖损伤模型组比较,枸杞黄酮保护组MDA含量下降,LDH活性下降,SOD活性增高(P均<0.01、P<0.05),NO、NOS的生成量及活性明显增高(P均<0.01),且上述各指标的变化程度随枸杞总黄酮浓度的增加而改变。结论宁夏枸杞总黄酮显著提高高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型的抗氧化作用,这可能与宁夏枸杞总黄酮抗脂质氧化,提高抗氧化酶活性及NO的释放量有关。
- 王伟尚佳廖国玲楚元奎
- 关键词：人脐静脉内皮细胞抗氧化
