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杨树原

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：天津医科大学总医院更多>>
发文基金：天津市自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇质粒
  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇海马
  • 1篇海马组织
  • 1篇AD5
  • 1篇齿状回

机构

  • 1篇天津医科大学...
  • 1篇哈励逊国际和...
  • 1篇天津市人民医...

作者

  • 1篇张奇
  • 1篇杨新宇
  • 1篇颜荣
  • 1篇张建宁
  • 1篇杨树原
  • 1篇赵杰
  • 1篇张琳
  • 1篇赵旺森
  • 1篇郇林春

传媒

  • 1篇中华神经医学...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
重组腺病毒Ad5-mHes1的构建及其在小鼠海马组织中的表达被引量：1
2011年
目的构建含小鼠Hes1基因的重组腺病毒（rAd）并观察其在小鼠海马组织中的表达情况．为进一步研究Hes1基因在成年小鼠神经再生中的作用奠定基础。方法利用限制酶对pEGFP—miles1质粒和pDC316质粒进行酶切，将获得的miles1目的基因片段和pDC316质粒酶切产物回收,在T4DNA连接酶作用下连接，形成pDC316-mHes1穿梭质粒，并用PCR法及EcoRI＋HindⅢ双酶切法对pDC316-miles1进行鉴定。利用AdMax包装系统，穿梭质粒pDC316-mHes1与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293细胞，同源重组产生复制缺陷型腺病毒Ad5-mHes1，其报告病毒是包含高强度绿色荧光蛋白（EGFP）的腺病毒Ad5-EGFP。向成年C57BL／6小鼠海马中立体定向注射Ad5-miles1及Ad5-EGFP，Western blotting检测注射后7d Hes1蛋白在海马中的表达情况，荧光显微镜观察EGFP在海马中的表达情况。结果用PCR法及EcoR I＋HindⅢ双酶切法对pDC316-miles1鉴定的实验结果与预期结果相符，经测序后其序列与miles1 CDS序列一致。注射后7d．Hesl蛋白在PBS注射组和Ad5-mHes1注射组海马组织中均有表达，其Hesl蛋白与GAPDH的比值分别为0．363±0．053和0．705±0．128，差异有统计学意义（P〈0．05）。荧光显微镜下在海马齿状回颗粒细胞层中观察到Ad5-EGFP表达的绿色荧光。结论本研究成功构建了Ad5-miles1表达载体系统，并在C57BL／6成年小鼠海马组织中表达了Hes1基因。
颜荣赵杰张奇张琳郇林春赵旺森杨树原张建宁杨新宇
关键词：重组腺病毒质粒海马齿状回
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