林东子
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
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- 发文基金:广东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组胰高血糖素样肽-1突变体对糖尿病大鼠血糖的影响
- 2007年
- 目的:观察重组胰高血糖素样肽-1突变体(2Gly-GLP-1)对实验性糖尿病大鼠模型血糖和血浆胰岛素水平的影响。方法:利用定点突变技术将GLP-1基因第二位丙氨酸突变为甘氨酸(2Ala→2Gly),采用基因工程方法制备重组GLP-1突变体。正常Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg),建立1型糖尿病大鼠模型。静脉输注2Gly-GLP-1(4.0ng/kg.min)120min,观察血糖水平变化。正常Wistar大鼠腹腔注射50%葡萄糖(3.24g/kg),诱发暂时性高血糖动物模型。腹腔注射2GIy-GLP-1(12nmol/kg),间隔取血测定血糖与胰岛素水平。结果:与对照组相比,静脉输注重组2Gly-GLP-130min后,血糖水平14.25±1.03mmol/L(P〈0.05),120min后血糖水平9.08士0.75mmol/L(P〈0.001)。腹腔注射2GIy-GLP-1具有明显的促胰岛素分泌和降血糖活性,处理组大鼠的血糖、血浆胰岛素水平与对照组之间的差别具有非常显著性意义(P〈0.001),且呈现一定的量效关系。结论:基因工程制备的重组GLP-1突变体能显著改善实验性糖尿病大鼠的血糖水平,这与其促胰岛素分泌活性有关。该研究结果为GLP-1突变体的临床应用奠定了基础。
- 张志珍林东子
- 关键词:糖尿病血糖血浆胰岛素水平
- H9N2亚型禽流感病毒ns1基因克隆被引量:1
- 2006年
- 目的克隆A/Duck/Shantou/2088/01(H9N2)亚型禽流感病毒ns1基因,构建重组融合表达载体。方法采用常规PCR方法扩增ns1基因cDNA,将扩增产物克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-3中,构建重组质粒pGEX-4T-3/ns1,转化BL21(DE3)宿主菌;采用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切和序列分析鉴定插入的ns1基因;并用IPTG诱导工程菌,SDS-PAGE及Western blotting分析融合蛋白的表达。结果双酶切鉴定表明,ns1基因已正确克隆到GST融合表达载体中,测序结果证实ns1基因序列与目的基因序列完全一致。SDS-PAGE电泳显示,融合蛋白在BL21(DE3)工程菌中以可溶形式表达,重组融合蛋白GST-NS1的表达量占菌体总蛋白的20%左右。经West-ern blotting分析证实,重组融合蛋白可以被GST特异性抗体所识别。结论本实验成功克隆了H9N2亚型禽流感病毒ns1基因,构建了融合表达载体,并进行了融合蛋白的诱导表达,为进一步研究NS1蛋白在流感流行中的作用打下基础。
- 林东子张志珍梁念慈
- 关键词:H9N2亚型禽流感病毒NS1基因克隆融合蛋白
- GLP-1与糖尿病基因治疗被引量:4
- 2008年
- 胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是由肠道L细胞分泌的一种肽类激素,综合的降糖作用使它在治疗糖尿病方面具有巨大的潜力。但由于二肽酰基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)的降解,GLP-1血浆半寿期仅有几分钟,重复多次的给药方式降低了患者的依从性从而限制了它的临床应用。而基因治疗以抵抗DPPⅣ的GLP-1突变基因为基础,通过载体介导,旨在体内达到持续高效表达和延长半寿期的双重疗效。这一方法已成为目前关注的焦点。文章介绍了GLP-1分泌及降解,着重阐述近年来GLP-1在糖尿病基因治疗方面所取得的成果及存在的问题。
- 李晓丽林东子张志珍
- 关键词:GLP-1基因治疗分泌糖尿病
- 重组胰高血糖素样肽-1突变体对糖尿病大鼠血糖的影响
- 目的:观察重组胰高血糖素样肽-1突变体(2Gly-GLP-1)对实验性糖尿病大鼠模型血糖和血浆胰岛素水平的影响。方法:利用定点突变技术将 GLP-1基因第二位丙氨酸突变为甘氨酸(2Ala→2Gly),采用基因工程方法制备...
- 张志珍林东子
- 文献传递