温雪梅
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 不同方法提取淡色库蚊总RNA的定量比较分析被引量：3
- 2012年
- 采用异硫氰酸胍法、Trizol法、Trizol改良法、CTAB法及Trizol+CTAB 5种方法提取的淡色库蚊总RNA,以期得到最优方法。提取总RNA并用电泳及紫外分光光度计检测,经过Dnase I消化后反转录成cDNA,以此为模板,用CYP6F1引物作定量表达分析。结果表明,与其他几种方法相比,CTAB法提取的效果最好,提取的样品纯度高,完整性好,杂质较少,DNA残留少,降解不明显。CTAB法提取的RNA可以作为cDNA合成和基因克隆的模板,能够满足后续研究的需要。
- 温雪梅段晓雷刘虎岐
- 关键词：淡色库蚊抗药性总RNA提取
- 淡色库蚊溴氰菊酯抗性基因XN-P450的克隆、分析及CYP6F1的表达
- 淡色库蚊是一种分布极广的全球性卫生害虫，能够传播多种致命疾病。对其的防治主要是使用各类化学杀虫剂，这引起了杀虫剂抗性的产生和发展。淡色库蚊抗性机理及抗性基因的研究成为热点。本论文以淡色库蚊为材料进行了以下三方面的实验：1...
- 温雪梅
- 关键词：淡色库蚊抗性基因生物信息学分析
- 单、双子叶作物间EST-SSRs引物和标记的通用性研究被引量：6
- 2010年
- 【目的】探讨单、双子叶作物间EST-SSR引物和标记的通用性。【方法】选取30对小麦、8对油菜和14对白菜的EST-SSR引物,分别以10个小麦、10个油菜、5个大豆品种和5个玉米自交系的基因组DNA为模板,进行PCR扩增及扩增产物的多态性分析。【结果】(1)30对小麦EST-SSR引物中,有29,28和26对引物分别在玉米、油菜和大豆中有扩增产物,可扩增率分别为96.7%,93.3%和86.7%;其中分别有12对和9对引物在单子叶作物小麦和玉米及双子叶作物大豆和油菜中的扩增产物显示多态性,有4对引物在4种作物中的扩增产物均显示多态性。(2)22对白菜/油菜EST-SSR引物中,有18,21和22对引物分别在大豆、小麦和玉米中有扩增产物,可扩增率分别为81.8%,95.4%和100%;其中分别有10对和7对引物在单子叶作物小麦和玉米及双子叶作物大豆和油菜中的扩增产物显示多态性,有7对引物在4种作物中的扩增产物均显示多态性。【结论】在单、双子叶作物间开发可通用EST-SSR引物和建立可转化EST-SSR标记是可行的;在单、双子叶作物中均有多态性的EST-SSR标记所对应的基因,涉及贮藏蛋白、核酸的转录及复制、功能基因的表达调控、代谢催化等基础功能。
- 柴呈森姜蔚李娜刘川温雪梅赵惠贤胡胜武
- 关键词：双子叶作物EST-SSR
- 淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-XP1cDNA的克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 【目的】克隆淡色库蚊一个全新的氯菊酯抗性相关基因PR-XP1的全长序列,分析、预测其编码蛋白的结构与功能,为阐明该基因的抗性机制及研制新型卫生杀虫剂奠定基础。【方法】依据抗性与敏感品系库蚊差异表达的EST片段(GenBank号:EC093826.1),设计特异性PCR引物,采用RACE技术,克隆淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-XP1的全长cDNA序列,运用生物信息学软件对其同源性与系统进化进行分析,并对PR-XP1编码蛋白的结构与功能进行预测。【结果】获得了全长为2 004bp的淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-XP1,该基因具有完整的CDS区,编码249个氨基酸。同源性比对与系统进化分析表明,PR-XP1基因核苷酸序列与致倦库蚊(GenBank号:XM_001862469.1)、埃及伊蚊(GenBank号:XM_001658032.1)和冈比亚按蚊(GenBank号:BX021208.1)相关基因的同源性分别为95%,83%和70%;其编码蛋白的氨基酸序列与致倦库蚊、埃及伊蚊、西方蜜蜂、入侵红火蚁、佛罗里达弓背蚁、印度跳蚁等昆虫中"假设性蛋白"的氨基酸序列同源性均达46%以上。结构分析显示,PR-XP1基因编码蛋白可能为具有2个跨膜螺旋的膜蛋白,跨膜区形成了一个特异性的"U"形结构;该基因还具有1个微弱的信号肽位点和24个磷酸化位点。【结论】克隆得到了一个全新的淡色库蚊氯菊酯抗性相关的"保守性假设蛋白"基因PR-XP1,推测其功能与氯菊酯抗性相关。
- 段晓雷温雪梅刘虎岐
- 关键词：淡色库蚊生物信息学分析
