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一株鹅源巴氏杆菌强毒株的分离及鉴定被引量：5: 2012年; 为了确定导致山东某鹅场种鹅发病的病原。从病死鹅肝脏、心脏中分离并纯化细菌,根据其形态特征、培养特性、生化鉴定、PCR和致病性试验等进行鉴定。致病性试验结果表明,1.2×109CFU/mL的菌液10倍系列稀释后,接种11日龄健康雏鸭后,该分离菌株对11日龄健康雏鸭的LD50为10-4.5CFU/mL。死亡雏鸭的剖检病变与病死鹅类似,并分离出形态特征完全一致的菌落。病理组织学变化以十二指肠绒毛断裂、脱落、肝细胞脂肪变性、心肌纤维断裂为特征。药敏试验结果显示,该分离菌株对头孢曲松钠、阿莫西林、氨苄西林、氧氟沙星等较敏感。山东某鹅场中发病病原经分离鉴定为多杀性巴氏杆菌,为禽巴氏杆菌病的诊断与防治提供了科学的依据。; 宋晓娜刁有祥高绪慧葛平萍张颖鞠小军王丽荣; 关键词：多杀性巴氏杆菌

鼻气管鸟疫杆菌环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立与应用被引量：1: 2013年; 根据GenBank发表的鼻气管鸟疫杆菌的16SRNA(登录号:JF810495.1)序列,利用Primer Explorer V4在线软件设计了1套环介导等温核酸扩增技术(LAMP)引物,并对反应体系和反应条件进行优化,同时评价该方法的灵敏性和特异性。结果显示,建立的LAMP检测方法能够在63℃1h内实现对目的片段的大量扩增,检测结果可直接用肉眼判断。特异性试验结果显示,该方法只能检测到鼻气管鸟疫杆菌,与其他细菌如鸡白痢沙门菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌的核酸无交叉反应,特异性强。敏感性试验表明,该方法可检测到1×101拷贝/μL的质粒标准品,比普通PCR高104倍。利用该方法对分离的阳性菌株进行检测,检出率为83.33%。结果表明,建立的鼻气管鸟疫杆菌LAMP检测方法,具有快速、简便、特异性强、灵敏度高的特点,可用于鼻气管鸟疫杆菌的临床检测。; 王丽荣刁有祥唐熠鞠小军宋晓娜

鼻气管鸟疫杆菌环介导等湿扩增(LAMP)与SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用: 鼻气管鸟疫杆菌(Ornithobacteriumr hinotrotracheale，ORT)可引起禽类以生长障碍、死亡率增加为特征的鼻气管鸟疫杆菌病，菌体大小约为0.2μm×0.6～5.0μm，隶属于rRNA第5超科。...; 王丽荣; 关键词：病原检测; 文献传递

B亚型禽偏肺病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：8: 2014年; 根据GenBank登录的B亚型禽偏肺病毒（JN224985．1）F基因序列设计1对特异性引物，经RT—PCR扩增出214bp的目的片段。回收目的片段并与pMD18-T载体连接后转化到基因工程菌DH5a中，提取重组质粒，经PCR、酶切及测序鉴定后，筛选出阳性质粒作为模板，建立SYBRGreenI荧光定量PCR标准曲线，并做敏感性试验、特异性试验和重复性试验。结果表明，标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系，产物T值在83．0～83．7℃之间，灵敏度为7．9×10^2拷贝／μL，特异性和重复性较好。本试验建立了检测B亚型禽偏肺病毒的sYBRGreenI荧光定量PCR方法，为该病的早期诊断以及感染程度的定量分析奠定了基础。; 王丽荣刁有祥唐熠鞠小军于春梅; 关键词：SYBR

检测鼻气管鸟疫杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立: 2017年; 利用DNAStar对GenBank上发布的鼻气管鸟杆菌(ORT)16S rRNA基因进行序列分析,根据分析结果选择其保守区域设计1对特异性的引物。扩增16SRNA部分保守基因序列并将其克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒,经鉴定、纯化后作为阳性标准品,用于SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR标准曲线的建立。反应条件反复优化后,成功建立了检测ORT的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。该方法对ORT的最低检测量约为100拷贝数/μL,比普通PCR高100倍;与引起禽类呼吸系统疾病的其他病原体之间无交叉反应;批内和批间试验的变异系数均小于0.63%,充分显示该方法具有良好的重复性和稳定性。对46份临床样本进行ORT检测,该方法检测的阳性样本为38份,检出率为82.26%。在38份阳性样品中,普通PCR只检出30份阳性样品,常规细菌培养只检出23份阳性样品。结果表明:本试验建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法比其他方法更敏感,为临床上快速准确的检测、诊断禽类ORT的感染提供了敏感可靠的检测方法。; 提金凤李志杰李秀丽王丽荣张敏敏刁有祥; 关键词：SYBR

鼻气管鸟疫杆菌环介导等温扩增（LAMP）与SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用: 鼻气管鸟疫杆菌(Ornithobacteriumr hinotrotracheale, ORT)可引起禽类以生长障碍、死亡率增加为特征的鼻气管鸟疫杆菌病，菌体大小约为0.2μm×0.6～5.0μm，隶属于rRNA第5超科...; 王丽荣; 关键词：实时荧光定量PCR; 文献传递

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王丽荣