王拴科
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
- 供职机构：兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 敲低Ski基因对骨肉瘤U-2OS细胞增殖和迁移的影响
- 2018年
- 该文研究了敲低Ski基因对骨肉瘤U-2OS细胞增殖和迁移的影响。该研究成功构建了Ski基因敲低表达的骨肉瘤U-2OS细胞系。Western blot结果显示,Ski-siRNA转染后骨肉瘤U-2OS细胞Ski蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。CCK-8结果表明,敲低Ski基因组在12、24、48 h细胞增殖活力明显降低(P<0.05)。与对照组相比,Ski-siRNA组细胞周期G1期细胞比例明显增高,而S期和G2期细胞比例均显著降低(P<0.05)。细胞划痕实验显示,Ski-siRNA处理组细胞在12、24、48 h的划痕愈合率均低于siRNA对照组,且均具有统计学意义(P<0.05)。此外,Ski-siRNA处理组中PCNA、cyclin D1、MMP-2和MMP-9蛋白质水平均显著降低(P<0.05)。上述结果表明,敲低Ski基因能显著抑制骨肉瘤U-2OS细胞的增殖和迁移能力,提示Ski基因有望成为骨肉瘤治疗的新靶点。
- 寇江力赵鑫王兴文王兴文王拴科张海鸿
- 关键词：骨肉瘤SKISIRNA增殖迁移
- Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤耐药中的研究进展被引量：2
- 2016年
- Wnt/β-catenin信号通路参与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,并且诱导肿瘤的耐药,是介导组织癌变的关键通路.体外实验表明,靶向抑制Wnt/β-catenin能够增强化疗药物的敏感性.因此对Wnt/β-catenin介导肿瘤耐药的深入研究将为肿瘤的治疗提供可能途径和潜在靶点.
- 移志刚周开升蒲彦川王兴文王拴科
- 关键词：肿瘤药物耐受性
- 关节囊切开减压对儿童股骨颈DelbetⅡ型骨折术后股骨头坏死发生率的研究
- 目的 探讨关节囊切开减压内固定较单纯闭合复位内固定治疗对儿童股骨颈Delbet型有移位骨折术后股骨头坏死发生率的影响。方法 回顾性分析我院2003年8月-2015年10月获得随访的46例、49 髋儿童股骨颈Delbet型...
- 任小军董平刘文忠陈永刚夏亚一王拴科
- 关键词：儿童股骨颈骨折股骨头坏死
- Clinical study of reconstruction of Oesophagus by small intestine with Coupler
- Objective: Free Oesophagus transplantation was used to reconstruct the esophageal defect caused by tumor resec...
- 叶凯山王拴科
- Notch1 siRNA影响Notch-Wnt信号通路对人成骨肉瘤细胞增殖的抑制作用被引量：4
- 2018年
- 背景与目的:骨肉瘤是骨肿瘤中最常见的原发性恶性肿瘤。迄今为止,骨肉瘤发生、发展的相关分子机制尚不明确,临床上也没有针对性的有效治疗药物。该研究探索Notch1蛋白在骨肉瘤中的作用及与影响骨肉瘤发生、发展的Notch-Wnt信号通路之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测骨肉瘤组织中Notch1的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法与流式细胞术检测靶向Notch1si RNA转染的人骨肉瘤细胞MG-63与U-2 OS凋亡的影响,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western bolt)检测转染后骨肉瘤细胞内Notch与Wnt信号通路中相关蛋白及RIPK4蛋白的表达变化。结果:Notch1在人骨肉瘤活检组织中的表达呈阳性,同时Notch1 si RNA能够显著抑制人骨肉瘤MG-63和U-2 OS细胞的增殖,并促进骨肉瘤细胞发生凋亡。此外诱导降低或缺失Notch1后,Notch与Wnt信号通路中相关蛋白及RIPK4蛋白表达明显减少。结论:si RNA-Notch1脂质体转染骨肉瘤细胞后,可影响Notch1-Wnt信号通路并降低促增殖分子RIPK4的表达,发挥抑制肿瘤细胞生长的作用。
- 郝俊龙杨凯王亚鹏王旭齐进王拴科汪静
- 关键词：NOTCH1MG-63细胞
- 骨肉瘤细胞中CSF-1促进肿瘤血管的生成被引量：3
- 2019年
- 目的 :探讨骨肉瘤细胞中巨噬细胞集落刺激因子1(macrophage colony-stimulating factor-1,CSF-1)的表达对肿瘤血管生成的影响及其可能的机制。方法 :采用蛋白质印迹法检测人成骨细胞hF OB 1.19和骨肉瘤SAOS-2、MG-63、U2OS细胞中CSF-1及同种异体移植炎性因子1(allograft in ammatory factor-1,AIF-1)的表达。将siRNA-CSF-1或其阴性对照(siRNA-NC)转染骨肉瘤SAOS-2细胞后,应用蛋白质印迹法检测各组细胞中AIF-1和Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate-1,Rac-1)的表达。收集siRNA-CSF-1或siRNA-NC转染组SAOS-2细胞的培养上清液,以未转染的SAOS-2细胞作为空白对照(blank control,BC)组,分别与完全培养液以1︰1的体积比混合,制成条件培养液,培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)。分别应用MTT法、Transwell小室法和小管形成实验检测HUVECs增殖、迁移和小管形成情况,应用蛋白质印迹法检测HUVECs中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和Rac-1蛋白的表达。分别用siRNA-CSF-1条件培养液、siRNA-CSF-1条件培养液+DMSO(终体积分数为0.1%)和siRNA-CSF-1条件培养液+Rac-1激活剂佛波酯(phorbol12-myristate 13-acetate,PMA)处理HUVECs 24 h后,分别应用MTT法、Transwell小室法和小管形成实验检测细胞增殖、细胞迁移和小管形成情况,应用蛋白质印迹检测HUVECs中VEGF和Rac-1蛋白的表达。结果 :骨肉瘤SAOS-2、MG-63和U2OS细胞中CSF-1及AIF-1蛋白的表达水平均显著高于人成骨细胞hFOB 1.19(P值均<0.05),且二者呈正相关(R^2=0.492 2,P=0.001 2)。siRNA-CSF-1转染组骨肉瘤SAOS-2细胞中AIF-1和Rac-1的表达水平均下调(P值均<0.05)。骨肉瘤SAOS-2细胞条件培养液处理HUVECs后,siRNA-CSF-1组HUVECs增殖、迁移以及小管形成能力均显著降低(P值均<0.05),VEGF和Rac-1的表达水平均下调(P值均<0.05)。Rac-1激活后,siRNA-CSF-1条件培养液对HUVECs增殖、迁移、小管形�
- 叶凯山王拴科周海宇马兵
- 关键词：骨肉瘤巨噬细胞集落刺激因子血管生成诱导剂
- 三磷酸腺苷保护脊髓损伤神经元的细胞活力被引量：2
- 2005年
- 目的:观察核苷酸类神经营养因子三磷酸腺苷对大鼠脊髓神经元损伤后细胞活力的影响。方法:取新生Wistar大鼠20只,切取脊髓,剪碎组织成糜状进行神经细胞培养。将培养的神经细胞分为3组,①无损伤对照组,继续完全培养液培养。②损伤组,培养第7天神经元用微量移液器塑料滴头行机械性划痕损伤后完全培养液培养。③三磷酸腺苷组,培养第7天神经元划痕损伤后加入终浓度为1.0mmol/L的三磷酸腺苷培养液培养。倒置相差显微镜观察细胞生长及不同时期细胞形态变化,各组于处理后10min,1,12,24和48h,细胞损伤程度,以乳酸脱氢酶法检测(乳酸脱氢酶渗漏量比值越大,说明细胞损伤越重)。检测各组细胞活性采用四甲基偶氮唑盐比色法(四甲基偶氮唑盐代谢率吸光度越高,说明细胞活性越高)。结果:①各组细胞损伤程度评估:以培养液中乳酸脱氢酶含量表示。伤后1,12,24和48h,损伤组和三磷酸腺苷组较对照组明显增加(P<0.05);损伤24和48h,三磷酸腺苷组低于损伤组(17.94±0.82,23.05±1.04;18.52±1.12,24.88±1.16;P<0.05)。②体外培养的各组大鼠损伤神经元的变化:以四甲基偶氮唑盐代谢率表示。伤后1,12,24和48h,损伤组和三磷酸腺苷组明显低于对照组(P<0.05),损伤24和48h,三磷酸腺苷组高于损伤组(0.24±0.03,0.18±0.04;0.27±0.03,0.15±0.05;P<0.05)。结论:细胞外三磷酸腺苷可以减轻机械性损伤后的脊髓神经元的损伤程度,增强细胞活力,对受损伤的神经元有一定的保护作用。
- 王闻奇王拴科孙正义孟涛
- 关键词：脊髓损伤神经元腺苷三磷酸细胞培养
- 基于高通量芯片对强直性脊柱炎的生物信息学分析被引量：3
- 2019年
- 目的运用生物信息分析工具筛选出强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)并进行文献挖掘。方法从GEO数据库中检索获取AS患者的芯片数据,通过GEO2R进行DEGs的筛选,运用DAVID数据库对筛选获得的DEGs行基因富集和通路分析,通过STRING数据库构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并采用Cytoscape软件行进一步分析。结果共筛选出190个差异基因,其中上调的基因75个,下调的基因115个。GO分析显示差异表达基因主要涉及炎症反应、白细胞迁移、胞外区、细胞外结构域、细胞外区域、细胞外基质、脂蛋白颗粒结合和碳水化合物结合等功能簇;KEGG分析提示其在包括类风湿性关节炎和细胞因子-细胞因子受体相互作用等通路中富集;运用STRING数据库构建蛋白相互作用网络;运用Cytoscape筛选出CXCR4、SELL、CD79A、MMP3、CD68、ADIPOQ、CCL19、IL-7R、IL-1β、MYH14、APOE和FCGR3A等12个连接度最高基因,并运用iRegulon插件挖掘得到ETS1、GATA3和IRF8等41个作用于上述12个核心基因的转录因子。结论新发现的12个核心基因和41个转录因子可能在AS的致病机制中起重要作用,并可能成为防治AS的新靶点。
- 张东亮赵舒煊向高刘开鑫巩朝阳王拴科张海鸿
- 关键词：强直性脊柱炎生物信息学基因芯片差异基因
- 颈胸交界区脊柱结核病灶的前方清除与稳定性重建被引量：2
- 2014年
- 目的探讨颈胸交界区脊柱结核病灶前方清除的可行性及重建脊柱稳定性的可靠方法。方法对17例颈胸交界区结核采用病灶清除、自体髂骨移植及内固定术重建颈胸交界区稳定性。结果 17例获得随访15-48个月。17例均未见复发,自体髂骨植骨融合成功。术前伴神经功能损害者15例,术后脊髓功能显著改善12例。进行脊柱稳定性White和Panjabi评分,术前（8.65±1.58）分,术后12个月降至（2.94±0.97）分,差异有统计学意义（t=17.94,P=0.00〈0.01）。结论前路病灶清除、自体髂骨移植是治疗颈胸交界区脊柱结核的有效方法;应用自体髂骨植骨结合内固定系统能进行可靠的稳定性重建。
- 党跃修冯万文赵海燕陈宝王拴科
- 关键词：脊柱结核稳定性
- 反义RNA抑制c-myc表达增强骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性被引量：4
- 2014年
- 目的通过对骨肉瘤细胞MG-63和U2OS c-myc基因干扰,初步探讨顺铂对c-myc低表达骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法以腺病毒为载体,构建表达反义c-myc的重组腺病毒(Ad-Asc-myc),并在体外感染骨肉瘤细胞MG-63和U2OS,与不同浓度及不同时间点的顺铂作用后,采用Western blot方法检测干扰水平;瑞氏染色和MTT检测顺铂对骨肉瘤细胞MG-63和U2OS凋亡作用。结果构建包装的腺病毒Ad-Asc-myc体外感染MG-63和U2OS 48h后,可明显降低cmyc蛋白表达;随着顺铂浓度和处理时间增加可增强对细胞增殖的抑制。结论抑制c-myc的表达可以增强骨肉瘤对化疗的敏感性。
- 李宏维叶凯山吴卓王拴科
- 关键词：反义C-MYC骨肉瘤顺铂
