王晓春
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金:教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- Duchenne型肌营养不良症药物筛选模型的构建被引量:1
- 2006年
- 建立一种能方便检测utrophin表达的方法,制备筛选Duchenne肌营养不良症治疗药物的细胞模型。将Utrophin基因上18号和19号外显子及其周围约6.7kb的DNA,分三段克隆下来,并将TETC报告基因插入插入片段Ⅰ(其中的18号外显子)中,构建打靶基因。经过电转化的方法,将测序正确的打靶基因转染到C2C12细胞株中。经G418筛选,FlAsH荧光染色,PCR扩增鉴定得到正确同源重组的细胞株。为筛选utro-phin表达促进剂建立了细胞模型,为筛选DMD治疗药物打下基础。
- 潘英钱之玉孙勇军沈月王晓春朱敏生
- 关键词:DUCHENNE肌营养不良症抗肌萎缩蛋白UTROPHIN报告基因同源重组
- 以乙肝病毒核心抗原HBcAg为载体的utrophin抗体的制备被引量:1
- 2006年
- 目的构建以乙肝病毒HBc为载体的带有utrophin的两个B细胞表位多肽的融合表达质粒pHBc-2UB,表达出融合蛋白并纯化,通过免疫新西兰大白兔获得抗utrophin的抗体。方法通过DNAstarⅡ模拟出utrophin的两个显著优势的B表位。用PCR法合成片段插入HBcAg序列的78位,将该合成片段克隆至pET28a载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白HBc-2UB,纯化后免疫新西兰白兔。再将该合成片段克隆至pGEX4T-2载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白GST-2UB,用于检测两个表位的抗体。结果测序结果表明重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳显示融合蛋白表达正确,ELISA检测到高滴度抗体。结论以HBc呈现utrophin的B表位被成功表达和纯化,获得高滴度的与两个B表位结合的抗体,为utrophin检测和DMD治疗药物研究打下了基础。
- 潘英朱敏生傅健王晓春李越希
- 关键词:UTROPHIN抗体乙肝病毒核心抗体
- 促Utrophin表达药物的筛选方法的建立与应用被引量:2
- 2006年
- 目的:建立一种筛选促Utrophin表达药物的方法。方法:将含有utrophin基因下游增强子DUE和PA启动子以及LacZ报告基因的重组质粒转染小鼠成肌细胞C2C12细胞,以此作为细胞模型,筛选中药材样品库,筛选出能增强Utrophin表达的药物,得到的阳性药物分别给予C2C12细胞和BALB/c小鼠,检测Utrophin表达的变化。结果:得到佛手等3个在细胞和整体水平促进Utrophin表达的候选药物。结论:成功地建立了1种筛选促Utrophin表达药物的方法,为进一步开发杜兴氏肌营养不良症(DMD)治疗药物奠定基础。
- 潘英钱之玉沈月王晓春朱敏生
- 关键词:UTROPHIN中药药物筛选
- 姜黄素对杜兴氏肌营养不良症的治疗作用
- 目的:寻找杜兴氏肌营养不良症的治疗药物.杜兴氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,简称DMD)是由于X染色体上dystrophin基因缺陷所致,发病率为新生男婴的1/3500,该疾病的特...
- 潘英朱敏生李越希王晓春沈月
- 关键词:肌营养不良症姜黄素药物治疗病理X染色体食用色素
- 文献传递