王杨
- 作品数：9 被引量：18H指数：2
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 超微孔膨体聚四氟乙烯(ePTFE)自膨式介入肺动脉瓣膜动物实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的评价自主研制的超微孔膨体聚四氟乙烯(expanded polytetrafluoroethylene,ePTFE)自膨式介入肺动脉瓣膜动物体内原位置换后的早期实验效果。方法选用厚度0.1mm经磷酰胆碱表面接枝的超微孔ePTFE材料制作成三叶自膨式介入心脏瓣膜。雄性绵羊7只,体质量(27.2±1.2)kg,全麻右侧开胸,右室近心尖处缝荷包,将人工瓣膜经导管从右室心尖送入肺动脉瓣行原位置换。术后即时通过心血管造影、右心导管检查,术后4周通过经胸心脏超声、右心导管检查对介入瓣膜功能进行早期评价。结果 7只羊手术均获得成功,术后即时心血管造影提示人工瓣膜位置满意,开闭良好。1只羊因肺部感染合并感染性心内膜炎于术后16d死亡,其余6只羊随访4周状况良好。术后4周经胸心脏超声提示人工瓣膜工作正常,无明显血栓或赘生物,4只羊无明显反流,2只羊微量反流。右心导管检查提示术后即时人工瓣膜峰值跨瓣压差为(6.0±2.2)mmHg(1mmHg=0.133kPa),术后4周为(9.5±2.7)mmHg,且术后4周与术前[(3.5±1.0)mmHg]相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论超微孔ePTFE自膨式介入肺动脉瓣经右室心尖入路置入成功率高,人工瓣膜早期功能良好。
- 张本张锡武龚德军安朝杨帆王杨陈翔张志钢徐志云
- 关键词：人工心脏瓣膜
- 肥厚预刺激对苯肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的保护作用被引量：1
- 2016年
- 目的:研究不同肥厚预刺激对苯肾上腺素(Phenylephrine,PE)诱导的心肌细胞肥大的影响。方法:胶原酶联合差速贴壁法分离培养原代SD乳鼠心肌细胞后分组:(1)对照组(常规培养48 h);(2)PE组(50μM PE刺激48 h);(3)不同预刺激+PE组:A,不同浓度的PE(10、20、50μM)预刺激(12 h干预,12 h常规培养);B,PE(50μM)预刺激不同时间(period-1,6 h干预,6 h常规培养;period-2,6 h干预,6 h常规培养,再次6 h干预,6 h常规培养;period-3,8 h干预,8 h常规培养;period-4,12 h干预,12 h常规培养)。预刺激后再用PE(50μM)刺激48 h。经细胞骨架蛋白(α-actining)免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜观察细胞表型,Image J软件计算心肌细胞表面积,利用实时定量PCR检测肥厚相关标志物表达水平。结果:分离的心肌细胞纯度在90%以上。PE组较对照组心肌细胞明显肥大,细胞表面积增加2.3倍,心肌肥厚标记基因心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)和β肌球蛋白重链(βmyosin heavy chain,βMHC)表达明显升高(P<0.05);而不同预刺激+PE组心肌细胞肥大表型明显缓解,其中PE(50μM)两次6 h预刺激最为显著(P<0.05)。结论:肥厚预刺激可以减轻PE诱导的心肌细胞肥大的程度,从而对心肌肥厚有保护作用。
- 杨帆邹良建赵志敏王杨张冠鑫刘夙璇王国坤
- 关键词：苯肾上腺素心肌细胞心肌肥厚
- 胶原酶消化法、组织块贴壁法培养的大鼠RASMCs生长、增殖及分化对比观察被引量：6
- 2017年
- 目的比较胶原酶消化法、组织块贴壁法培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞(RASMCs)生长、增殖及分化的影响。方法选择6~8周龄雄性SD大鼠6只,取胸主动脉及主动脉弓部,保留中膜备用。分别采用胶原酶消化法、组织块贴壁法培养RASMCs。采用α-肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定RASMCs,并比较两种方法培养第0、24、36、48、60、72、84、96 h RASMCs生长情况。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期。采用实时定量PCR法检测细胞表型标志基因表达,包括收缩型标志基因α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转胶蛋白(TAGLN)、肌球蛋白重链11(MYH-11)、转录因子1(SP-1)及合成型标志基因骨桥蛋白(OPN)。结果胶原酶消化法、组织块贴壁法均成功分离出RASMCs,细胞纯度均在95%以上。培养36、48、60、72 h时,组织块贴壁法分离、培养的RASMCs计数多于胶原酶消化法(P均<0.05)。培养36、48、60、72 h时,胶原酶消化法分离、培养的RASMCs活力优于组织块贴壁法(P均<0.05)。两种方法分离、培养的RASMCs G_1、G_2、S期细胞所占比例比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。胶原酶消化法分离、培养的RASMCs中α-SMA、TAGLN、MYH-11 mRNA相对表达量均高于组织块贴壁法,OPN mRNA相对表达量低于组织块贴壁法(P均<0.05)。结论胶原酶消化法、组织块贴壁法均成功分离、培养出RASMCs。胶原酶消化法分离、培养的RASMCs生长、增殖较慢,但保持收缩表型;组织块贴壁法分离、培养的RASMCs生长、增殖较快,但有向合成表型转化的趋势。
- 赵志敏王国坤王杨杨帆龚德军徐志云
- 关键词：血管平滑肌细胞胸主动脉胶原酶消化法细胞生长细胞增殖细胞分化
- 糖皮质激素治疗体外循环心脏术后全身炎性反应的研究进展被引量：6
- 2014年
- 体外循环技术的出现使各类心脏直视手术成为可能。然而,由于体外循环过程中血液与人工心肺机的非生理性表面接触、缺血再灌注损伤以及内毒素的释放等因素,引起炎性因子激活以及剧烈的全身炎症反应,可导致心脏术后并发症发生率升高以及死亡率增加。糖皮质激素具有明确和强大的抗炎作用,近年来已有多项基础和临床研究证实了其对体外循环术后炎性反应的控制效果和作用机制。该文对近年来糖皮质激素应用于体外循环的相关研究进行回顾和总结。
- 王杨徐志云
- 关键词：炎性反应糖皮质激素
- 靶向人BRG1基因的慢病毒载体构建及效率验证被引量：1
- 2014年
- 目的:构建靶向人BRG1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并验证其沉默效率。方法:设计3个针对人BRG1基因的特异性shRNA序列(shBRG1),构建于pLKO.1慢病毒载体中,并与psPAX2和pMD2.G质粒共同转染293T细胞以包装成慢病毒颗粒。将包装好的慢病毒感染人主动脉平滑肌细胞(HASMC),应用实时荧光定量PCR和western blot检测BRG1 mRNA和蛋白表达水平,判断其沉默效率。结果:3种shBRG1干扰序列均成功插入慢病毒载体中且测序正确,3种慢病毒均可有效降低BRG1 mRNA表达水平(P均<0.01)。其中shBRG1-3的沉默效率最高,其感染HASMC后BRG1蛋白表达水平较对照组显著下降(P<0.01)。结论:靶向人BRG1基因的shRNA慢病毒表达载体构建成功,shBRG1-3慢病毒能够有效降低BRG1 mRNA和蛋白表达水平。
- 王树伟王杨谈梦伟袁扬龚德军韩林徐志云
- 关键词：RNA慢病毒载体主动脉平滑肌细胞
- miR-494调节主动脉平滑肌细胞表型转化参与胸主动脉瘤发生发展的作用机制
- 王杨杨帆徐志云王国坤
- 生物瓣置换术后晚期血栓形成原因及应对策略分析被引量：2
- 2015年
- 目的分析生物瓣置换术后晚期血栓（LBVT）的形成原因并提出应对策略。方法长海医院2001年1月至2013年7月间共580例患者行生物瓣置换术,仅1例（0.2%）出现LBVT。患者,男,67岁,主动脉瓣置换术后3年,因主动脉瓣重度狭窄再次行瓣膜置换术。回顾性分析该患者临床资料,并通过检索Pub Med数据库（1989年1月至2013年12月）对LBVT相关文献进行总结。结果该患者无致血栓高危因素,术中发现生物瓣窦内大量血栓,病理检查发现瓣叶纤维断裂。文献回顾共纳入20篇文献共47例患者,LBVT发病率为0.2%~1.0%,其中至少18例合并致血栓高危因素,此18例中有15例早期抗凝后未延长抗凝治疗;至少10例未合并任何高危因素而出现LBVT。44例患者使用猪瓣置换,仅1例使用牛心包瓣,余2例不明。结论 LBVT是生物瓣置换术后罕见且严重的并发症,其原因与患者和生物瓣本身均有关。牛心包瓣在预防血栓方面优于猪瓣。对无致血栓高危因素的患者,应抗凝3个月,然后终生抗血小板治疗;而如果存在高危因素,则应延长抗凝。
- 张本王杨刘晓红张锡武龚德军唐昊徐志云
- 关键词：人工心脏瓣膜生物瓣血栓
- 血管平滑肌细胞自噬在主动脉夹层发生过程中作用的初步探讨
- 目的 探讨血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cell,VSMC)自噬在主动脉夹层发生过程中的作用.方法 1.通过免疫组化法和透射电镜法检测主动脉夹层患者主动脉血管壁自噬的发生情况.2.通过免疫...
- 王杨王国坤赵志敏杨帆薛祥闫岩
- 主动脉夹层小鼠血管壁中微管相关蛋白1轻链3、Beclin1及骨桥蛋白的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨主动脉夹层小鼠血管壁中微管相关蛋白1轻链3（Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3）、Beclin1及骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）的表达及意义.方法 （1）急性主动脉夹层模型的建立：3周龄FVB小鼠随机分为β-氨基丙腈（β-aminopropionitrilemonofumarate,BAPN）联合人血管紧张素-Ⅱ（Angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ）组,单BAPN干预组和对照组,分别予以BAPN口服4周后联合Ang-Ⅱ皮下微泵48 h,单用BAPN 4周口服和正常喂养进行干预.（2） LC3、Beclin1及OPN的检测：采用RT-PCR、免疫组织化学染色法对小鼠主动脉血管壁中自噬相关蛋白LC3、Beclin1及合成型血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）标志蛋白OPN等进行定量和半定量测定.结果 （1）BAPN联合Ang-Ⅱ干预组小鼠夹层发生比例为86.7％,单BAPN组夹层发生比例低于联合组,对照组夹层发生比例为0;（2）急性主动脉夹层小鼠主动脉壁中自噬相关蛋白LC3B、Beclin1及合成型VSMC标志蛋白OPN基因和蛋白含量明显高于正常对照组（P＜0.05）,且LC3B、Beclin1及OPN蛋白表达主要定位于血管中层VSMC.结论 BAPN联合Ang-Ⅱ能够成功诱导FVB小鼠发生急性主动脉夹层,且该模型中发生了VSMC表型转化和自噬现象,两者可能具有相关性.
- 王杨龚德军袁扬刘晓红张本张锡武闫岩谈梦伟徐志云
- 关键词：主动脉夹层主动脉BECLIN1骨桥蛋白
