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罗方妮: 作品数：46 被引量：231H指数：9; 供职机构：扬州大学动物科学与技术学院更多>>; 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金江苏省卫生厅医学科技发展基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>

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黑曲霉培养物急性毒性和微核实验评价被引量：5: 2000年; 以小白鼠为试验对象 ,对黑曲霉培养物的急性毒性和遗传性毒性进行了研究。结果表明 :黑曲霉培养物的 LD5 0>1 0 g/kg;黑曲霉培养物组与正常饲料组所引起的小鼠骨髓细胞微核率无显著差异。因此初步认为黑曲霉培养物是一种比较安全的饲料原料。; 罗方妮章世元罗珍兰朱王飞居颂文; 关键词：急性毒性微核实验饲料原料

酵母CYC1启动子TATA框对ERE调控的报告基因的影响被引量：1: 2011年; 人工合成两条雌激素效应元件(ERE)重复的核苷酸序列,并在5′和3′端设计HindⅢand SphⅠ黏性末端。将两条互补的ERE溶液加热至95℃,然后冷却至室温使其形成双股DNA,将双股ERE插入到pERE-CYC-yEGFP载体的细胞色素C(CYC1)启动子相应的酶切位点,生成pERE-CYC-αyEGFP载体。pERE-CYC-yEGFP和pERE-CYC-αyEGFP载体的不同之处是ERE位于CYC1启动子的位置,前者ERE下游的CYC1启动子含有α和β-TATA框,而后只含有-αTATA框。将两者分别转化于可表达人雌激素受体的酵母细胞,构建成两种受雌激素调控的重组酵母细胞。将该重组酵母细胞经6种不同的雌激素化合物作用4 h,发现重组pERE-CYC-αyEGFP的酵母细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达量与受试物间剂量效应关系较差,而含有pERE-CYC-yEGFP载体重组酵母细胞,与受试物具有明显的剂量效应关系。因此,在用于快速、高通量筛选雌激素类化合物生物评价中,其CYC1基本启动子中的α和-βTATA框是必须的。; 谭明典罗方妮葛宜枝李晶晶徐海荣李湘鸣; 关键词：酵母细胞绿色荧光蛋白生物评价

高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系被引量：7: 2008年; 以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系,用于快速筛选雌激素类化合物。在表达载体中,用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动α人雌激素受体基因(hERα)的表达;在报告载体中,用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中,构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞。该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后,发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系。与其他环境雌激素酵母评价体系相比,该重组酵母评价细胞,在应用时不需要破坏细胞壁,也不需要底物和相关试剂,可直接在96孔板中操作完成,具有快速、高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点。; 李湘鸣罗方妮汪霄贾平张娟祝娉婷张惟立; 关键词：环境雌激素酵母细胞雌激素受体绿色荧光蛋白

《家畜环境卫生学》实验课程研究性教学的实践与思考被引量：2: 2013年; 该文就《家畜环境卫生学》实验课程研究性教学改革及其实施的必要性、教改的教学模式,以及其实施效果进行总结思考与分析讨论,以为研究性教学改革与实践的进一步推进提供一些参考。; 王梦芝陈燕凌罗方妮; 关键词：研究性教学

钴辐射诱变黑曲霉菌株的初步筛选被引量：5: 1999年; 用扬州大学饲料营养学教研室筛选并保藏的黑曲霉菌株 ,经6 0 Co照射后 ,最终分离出 3株突变菌株。培养 5d后 ,突变株 A、C、D及野生菌株产生的植酸酶酶活力分别为 883 .52± 1 1 0 .0 8、 70 2 .1 4± 73 .85、 687.0 4± 82 .70、 74 8.1 2± 57.0 5U/ g。突变株 A比野生菌株的产植酸酶能力高 1 8.1 %。此外 ,突变株 A对菜籽饼中硫葡萄糖甙、粗纤维等的降解能力也较强。因此 ,本次筛选出的突变株; 章世元罗珍兰罗方妮邢华王欢莉唐宝玲; 关键词：菜籽饼钴辐射诱变植酸酶诱导育种

芝江霉素对小鼠骨髓嗜多染细胞（PCE）微核的影响被引量：2: 1996年; 芝江霉素对小鼠骨髓嗜多染细胞（ＰＣＥ）微核的影响罗方妮扬州大学农学院动物科学系扬州２２５００９芝江霉素是一种新的抗鸡白痢抗生素。我们根据中华人民共和国农业部（１９９ｌ）农（牧）函字第１号文件，关于《新兽药特殊毒性试验技术的要求》的规定，进行了有关毒理...; 罗方妮; 关键词：小鼠微核

快速筛选环境雌激素酵母细胞的试验研究被引量：6: 2005年; 通过分子生物学技术将雌激素效应元件(ERE)基本序列插入β-半乳糖苷酶的LacZ报告基因的上游,并将其置于重组酵母细胞雌激素受体(ER)的调控之下。结果表明:当环境雌激素作用于酵母细胞时,会使ER发生变构效应,与ERE结合使LacZ基因得以表达,其表达量与环境雌激素的污染程度具有剂量效应关系,通过检测β-半乳糖苷酶的活性,可反映环境雌激素的污染程度;与双酚A和苯甲酸雌二醇活性相比较,β-雌二醇活性最强,但双酚A活性明显高于苯甲酸雌二醇。; 李湘鸣罗方妮陈春波; 关键词：环境雌激素酵母雌激素受体

RNR2调控的重组绿色荧光蛋白酵母细胞的构建及其对化学诱变原的高通量筛选: 目的建立RRNR2调控的酵母增强绿色荧光蛋白(yEGFP)发光酵母细胞,高通量筛选化学诱变原。方法用PCR方法从酵母(W303-1A)基因组扩增RNR2启动子,经酶切后,用T4连接酶与线性化的含酵母嗜好遗传密码子的yEG...; 谢云斌罗方妮王磊刘星妍王正英王小伟李华玲李湘鸣; 关键词：酵母细胞绿色荧光蛋白高通量; 文献传递

雌激素调控的绿色荧光蛋白在酵母细胞中的表达被引量：1: 2006年; 采用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,用酵母细胞构建环境雌激素(EEH)的评价体系,可敏感、快速、方便地筛选出EEH化合物。通过分子生物学技术,将GFP基因插入到pM P 206/ERE启动子CYC 1的下游,用GFP取代L ac Z基因,并转化于酵母细胞。DNA测序发现ERE-CYC 1-GFP框架正确。对转化子进行PCR鉴定,发现有雌激素受体基因(hER cDNA)和GFP基因特异条带,说明hER cDNA和GFP已重组于酵母细胞。荧光显微镜下发现大量的绿色荧光颗粒,表明GFP基因在酵母细胞中成功表达。酵母细胞经不同浓度雌二醇作用后,与GFP表达量有剂量效应关系。与其他酵母评价体系相比,以GFP为报告基因评价EEH不需要破坏细胞壁,也不需要底物,可在96孔板中完成,这为高通量筛选EEH化合物奠定了基础。; 李湘鸣罗方妮陈春波张唯立吴玉娟祝娉婷; 关键词：环境雌激素酵母细胞基因重组绿色荧光蛋白

转虫荧光素酶基因细胞在亲电性化学污染物监测中的应用研究被引量：2: 2007年; 目的用亲电性反应元件(EPRE)调控的转虫荧光素酶基因细胞快速评价环境的污染程度。方法采用分子生物学的方法,将EPRE与TK基本启动子和编码虫荧光素酶(LUC)的基因相融合,构建成EPRE调控的LUC稳定表达载体,将其转染于HeLa细胞,经G418筛选出稳定的细胞株。该细胞经不同浓度的亚砷酸钠(NaAsO2)、氯化镉(CdCl2)、氯化汞(HgCl2)和顺丁烯乙酸二乙酯(DEM)作用后,用荧光素酶试剂盒物测LUC的表达量。结果DNA测序显示,EPRE调控的LUC稳定表达载体结构框架正确;LUC的表达量与受试物具有一定的剂量-效应关系,其中DEM的剂量-效应关系最明显。结论EPRE调控的转LUC基因细胞构建成功。; 李湘鸣罗方妮陈春波陈秀云吴玉娟李华玲; 关键词：环境污染物虫荧光素酶转基因细胞

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