罗清华
- 作品数：20 被引量：24H指数：3
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子与HBsAg融合蛋白基因的分子克隆及序列测定
- 1998年
- 目的研究粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的免疫活性。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增出粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）３８４ｂｐ的基因片段及ＨＢｓＡｇ８４６ｂｐ基因片段，扩增产物经柱纯化后，由Ｔ４ＤＮＡ酶连结为１２３０ｂｐ的片段，将此片段命名为ＬＧＨ，克隆到ｐＵＣ１９质粒中，利用菌落ＰＣＲ法快速筛选阳性克隆及限制酶切鉴定插入片段的大小。结果该基因全长１２３０ｂｐ，经序列分析，证实为ＧＭ－ＣＳＦ－ＨＢｓＡｇ基因。结论ＧＭ－ＨＢｓＡｇ融合蛋白基因构建成功，为进一步研究其生物学活性及表达奠定了基础。
- 薛净程云罗清华李伯安李伯安张郁郭仁峰曹阳林秀玉施红
- 关键词：HBVHBSAGGM-CSF
- 抗HBV Pres2单链抗体基因的构建、克隆、表达及鉴定
- 1997年
- 3B9是一株分泌HBV Pres2抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系。为了构建基因工程抗体并从分子水平分析3B9株McAb,我们用分子生物学技术提取3B9杂交瘤细胞总RNA,经反转录和聚合酶链式反应(PCR)技术分离获得了3B9McAb的轻、重链可变区基因(VL/VH)。
- 程云汪力亚杨守纯罗清华韩凤连曹阳张建宗周继文
- 关键词：重链可变区基因杂交瘤细胞系高效表达载体单链抗体基因
- 抗乙型肝炎病毒Pre S2 3B9单克隆抗体轻链可变区基因的扩增及序列分析被引量：2
- 1995年
- 为了构建基因工程抗体并从分子水平分析抗乙型肝炎病毒ＰｒｅＳ２３Ｂ９单克隆抗体，我们利用分子生物学技术快速分离３Ｂ９杂交瘤细胞总ＲＮＡ，经反转录，ＰＣＲ扩增，分离获得了３Ｂ９单抗轻链可变区基因，并用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及双脱氧核苷酸链末端终止法对该可变区基因的全部３２７ｂｐ核苷酸序列进行了测定。结果表明，３Ｂ９单抗轻链隶属小鼠免疫球蛋白Ｋａｐｐａ轻链第Ⅱ亚组，ＪＫ１微基因重排。
- 程云周继文杨守纯罗清华韩风连戎广亚乔小江张建宗曹阳
- 关键词：乙型肝炎病毒单克隆抗体
- 庚型肝炎病毒RNA、NS_5抗原在肝组织中表达的研究
- 1998年
- 目的研究 HGV RNA 及 HGV 抗原在肝组织中的表达。方法对17例 HGV 血清标志阳性患者进行了肝组织 HGV RNA 的原位杂交及免疫组织化学研究。结果原位杂交 HGV RNA 阳性8例,阳性率47.05%,阳性信号均存在于肝细胞的胞浆中;免疫组化3例 HGV NS_5抗原阳性,阳性率17.64%,均为胞浆型。结论 HGV RNA 及 HGV NS_5抗原阳性细胞及其周围肝细胞未见特殊病理改变。
- 辛绍杰王松山程云王林杰李静薛生罗清华郭仁峰李伯安曹阳张建宗
- 关键词：庚型肝炎原位杂交HGV
- 嵌合抗体红细胞免疫技术的建立及初步应用被引量：1
- 1989年
- 我们用SPDP法代替传统的戊二醛一步法来制备高效价的嵌合抗体,用稳定性好的SRBC代替酶的底物作指示物,所建立的固相CEIA技术,经初步检测HBsAg.表明该法敏感性高、特异性强、重复性好、安全简便、价格低廉,尤其适于条件简陋,无特殊设备的基层卫生单位作检测和研究使用。
- 程云杨守纯罗清华
- 关键词：嵌合抗体红细胞细胞免疫技术
- 中国大陆庚型肝炎病毒结构区与非结构区部分cDNA基因的序列分析被引量：2
- 1996年
- 作者在建立检测庚型肝炎病毒酶免疫和ＰＣＲ技术的基础上，将抗－ＨＧＶ阳性病人血清经逆转录─巢式ＰＣＲ分离部分ＨＧＶｃＤＮＡ片段，用与ＨＧＶ基因互补的特异寡酸引物进行双脱氧核苷酸链末端终止法──ＰＣＲ直接测序。结果表明，中国大陆ＨＧＶ－３０２Ⅰ株部分ｃＤＮＡ序列与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的ＨＧＶ美国株ｃＤ－ＮＡ序列有极高的同源性。５’端非编码区、前１区、包膜Ｅ１区、ＮＳ３区和ＮＳ５区与美国株ｃＤＮＡ序列有高达９０％以上的同源性，编码相应氨基酸的同源性达９６％。表明ＨＧＶ感染虽呈全球分布，但在进化上属遗传高度保守。
- 程云郭仁锋李伯安罗清华曹阳张建宗貌盼勇马洪滨李静薛净
- 关键词：庚型肝炎病毒病毒CDNA
- 丁型肝炎抗体阳性病毒感染患者血清中HGV RNA的检测及分析
- 1996年
- 为探讨我国部分肝炎患者人群中HGV的感染情况．本文用我室建立的HGV RNA RT—PCR方法检测丁型肝炎抗体标志物阳性患者血清20例，其中HGV RNA RT-PCR阳性率为15．0%，说明上述肝炎患者血清中存在庚型肝炎病毒的交叉重叠感染。
- 张建宗程云马洪滨傅体权李奇芬郑红李伯安罗清华郭仁峰
- 关键词：HGV丁型肝炎肝炎患者RNA抗体阳性病毒感染
- 抗HBV PreS2单链噬菌体抗体基因在噬菌体载体中的克隆及初步表达
- 1994年
- 本文利用基因工程技术,在成功构建抗HBV PreS2 3B9mAb单链可变区抗体(ScFV)基因的基础上,在389 ScFv基因中引入限制性内切酶位点,克隆的噬菌体表达载体pCANTAB5噬菌粒中。
- 程云罗清华周继文杨守纯韩风连戌广亚曹阳季伟
- 关键词：PRES2PRESSCFV上清
- 抗HBV Pre S2 3B9单抗轻、重链可变区基因的分离,序列分析及单链可变区抗体基因的构建
- 1994年
- 3B9单抗是一株抗HBV PreS2抗原的单抗,为从分子水平分析,了解389单抗进而为制备新一代基因工程抗体奠定基础。本文用分子生物学技术,提取389杂交瘤细胞总RNA,经反转录,PCR分离获得了389单抗的轻,重链可变区基因。并利用PCR及双脱氧核苷酸链末端终止法对389单抗的可变区基因的核苷酸序列进行了分析。结果表明,389单抗轻链隶属小鼠Ig
- 程云周继文罗清华杨守纯韩风连戌广亚张建宗乔小江曹阳
- 关键词：重链可变区基因PRE基因工程抗体杂交瘤细胞
- 中国大陆庚型肝炎病毒检测技术的建立及分子病毒学流行病学的研究被引量：2
- 1996年
- 近年来发现,在约20％的非甲非乙型肝炎病人中经各种检测表明,甲-戊5型肝炎病毒标志均为阴性。提示存在另一种新型的肝炎病毒感染。1995年初,Kim等报道了庚型肝炎病毒(HGV)的存在。经分子克隆及序列分析证实,HGV基因结构与丙型肝炎病毒(HCV)一样同属黄病毒科,为正链单股RNA病毒。
- 程云郭仁峰李伯安罗清华曹阳张建宗
- 关键词：庚型肝炎庚型肝炎病毒
