谢建生
- 作品数：10 被引量：61H指数：4
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：广西卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 母血中胎儿有核红细胞的分离及无创性产前基因诊断研究被引量：12
- 2000年
- 目的 从母血循环中分离、富集、鉴定和提取胎儿有核红细胞 ,建立遗传病无创性产前基因诊断方法。方法 取 2 5名妊娠 8～ 36周的孕妇静脉血 ,加载在细胞分离液Histopaque 1.0 77上分离单个核细胞 (MNC) ;用包被CD71抗体的DynabeadsM 45 0CD71免疫磁珠或包被CD4 5抗体的DynabeadsM 45 0CD4 5免疫磁珠富集MNC中的胎儿有核红细胞 ;anti ζ biotin或anti γ biotin珠蛋白链抗体和FastRed显色反应识别富集的有核红细胞。在倒置显微镜下刮取 5例重型 β地中海贫血 (地贫 )高危胎儿的有核红细胞进行巢式聚合酶链反应 (PCR) ,扩增产物经DNA逆向斑点杂交法阐明地贫基因突变类型。结果 2 5名孕妇外周血中均发现与anti ζ biotin或anti γ biotin珠蛋白链呈阳性反应的胎儿有核红细胞。 5例重型β地贫高危胎儿中 ,有 3例所刮取的母血胎儿有核红细胞能成功进行巢式PCR ,并鉴定基因突变类型。结论 Histopaque 1.0 77单一密度梯度离心分离MNC ,结合抗CD71免疫磁珠阳性富集或CD4 5免疫磁珠阴性富集法 ,能有效富集母血循环中的胎儿有核红细胞。应用巢式PCR能对 2 0个左右的胎儿有核红细胞DNA进行扩增 ,使遗传病的无创性产前基因诊断成为可能。
- 谢建生龙桂芳
- 关键词：产前诊断基因诊断胎儿有核红细胞
- 广西壮族人HLA-DQ基因分型及其长寿和地中海贫血关系的探讨
- 龙桂芳潘尚领阿卜迪林伟雄谢建生陈萍唐霞金琪
- 该研究应用PCR-SSP及DNA测序方法，对广西壮族人群HLA-DQ基因的多态性及其与地中海贫血及长寿的关系做了大量的工作：在国内外首次公布从分子生物学水平研究了广西健康壮族人HLA-DQ等位基因型数据及其基因频率分布，...
- 关键词：
- 关键词：地中海贫血
- 用错配引物介导人工Hha I内切酶酶切位点检测葡萄糖－6－磷酸脱氢酶基因cDNA95（A→G）突变被引量：1
- 1995年
- 用错配引物介导人工ＨｈａＩ内切酶酶切位点检测葡萄糖－６－磷酸脱氢酶基因ｃＤＮＡ９５（Ａ→Ｇ）突变谢建生，龙桂芳，唐智宁，蒋南华，林伟雄，李卫葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺陷症是人类最常见的酶缺陷病，可导致蚕豆病、新生儿高胆红素血症甚至核黄疸、药...
- 谢建生龙桂芳唐智宁蒋南华林伟雄李卫
- 关键词：红细胞G6PD缺陷症基因诊断
- 直接免疫细胞化学法检测红细胞内血红蛋白及其在血红蛋白病诊断中的应用被引量：1
- 2000年
- 目的 :建立直接免疫细胞化学法检测红细胞内血红蛋白类型 ,以鉴别胎儿有核红细胞 ,开展从母血分离胎儿细胞进行遗传病无创性产前诊断研究。方法 :用荧光素标记的 anti- Hb A,anti- α- globin,anti- Hb E,anti- β- globin和 anti- γ- globin抗体特异性检测正常成人外周血、 Hb Bart's水肿死胎心脏血、血红蛋白 E杂合子患者和 β°地中海贫血纯合子患者外周血的细胞涂片 ,在荧光显微镜下观察阳性细胞。结果 :正常成人外周血和 Hb E杂合子患者外周血的细胞涂片在荧光显微镜下分别观察到anti- Hb A,anti- Hb E阳性细胞。Hb Bart's水肿死胎心脏血的细胞涂片 ,未见 anti- α- globin阳性细胞 ,可见 anti- γ- globin阳性细胞。β°地中海贫血纯合子患者外周血的细胞涂片 ,未见 anti- β- globin阳性细胞 ,可见 anti- γ- globin阳性细胞。结论 :直接免疫细胞化学法是一种简便有效检测红细胞内血红蛋白的方法 ,可用于鉴别从母血中分离的胎儿有核红细胞 ,开展无创性产前基因诊断研究 ,并进行生理、病理和治疗状态下特异红细胞族群的标识、分离、富集。
- 谢建生龙桂芳
- 关键词：免疫细胞化学法单克隆抗体血红蛋白病
- 应用PCR结合ASO探针斑点杂交技术检测β地中海贫血家系
- 1996年
- 应用聚合酶链反应和等位基因特异寡核苷酸斑点杂交技术时１例β地中海贫血家系进行基因诊断，确定先证者基因型为ＣＤ４１－４２（－ＴＴＣＴ）／ＣＤ１７（Ａ－Ｔ）双重杂合子，先证者父母的基因型分别为ＣＤ４１－４２（－ＴＴＣＴ）／β＾Ａ和ＣＤ１７（Ａ－Ｔ）／βＡ杂合子。
- 赵荣枝李牧尧庄怡龙桂芳林伟雄谢建生李卫
- 关键词：聚合酶链反应基因诊断
- 因子Ⅷ基因内二核苷酸重复序列在检测血友病A携带者中的意义被引量：3
- 2001年
- 目的 应用FⅧ基因内含子 13(CA)n及内含子 2 2 (GT)n(AG)n两位点多态性的单倍体分析 ,对血友病A(HA)家系进行携带者的检测。方法 采用PCR法扩增FⅧ基因内 13(CA)n及 2 2(GT)n(AG)n的多态性片段 (Amp FLP) ,银染色法显示扩增结果。 结果 35个HA家庭中 11个有家族史 ,此 11个HA家系有 2 1位女性 (包括 1例女性患者 ) ,检出携带者 14人 ,正常 4人 ,不能确定 3人 ,8个家系可用此法诊断 ,可诊断率 72 .7%。结论 银染色法与Amp FLP结合 ,在保证HA携带者检出结果可靠的同时 ,更具有省时、操作简单。
- 龙桂芳朱春江刘敬忠梁燕谢建生
- 关键词：血友病A多态现象
- 应用序列特异引物PCR法对广西壮族HLA－DQA_1进行基因分型被引量：15
- 1995年
- 应用序列特异引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对８２名无血缘关系的广西壮族健康人的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１进行基因分型。共检出７种ＤＱＡ＿１等位基因，以ＤＱＡ＿１＊０３０１的频率最高，达３１％，其次为ＤＱＡ＿１＊０１０４，０１０２和０５０１，检出率分别为２４．３％，１６．９％和１１．７％。未检出的等位基因有ＤＱＡ＿１＊０２０１，０３０２和０６０１。结果表明，壮族的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１等位基因频率分布除与中国南方人相似外，尚有其特点。序列特异引物ＰＣＲ方法不需要放射性同位素，简便快速、准确可靠的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１基因分型新方法。
- 龙桂芳阿卜迪李卫林伟雄唐智宁谢建生金琪
- 关键词：多聚酶链反应基因分型
- 广西地区α地中海贫血高危胎儿产前基因诊断
- 1998年
- １９８９年以来，应用ＰＣＲ技术选择性扩增α２珠蛋白基因及斑点杂交方法对１６７例α地中海贫血高危胎儿进行产前基因诊断。结果，ＨｂＢａｒｔ＇ｓ水肿胎儿２７例，ＨｂＨ病１６例，其余为非Ｂａｒｔ＇ｓ水肿胎儿或非ＨｂＨ病胎儿。
- 林伟雄龙桂芳李卫谢建生金琪李琪唐霞
- 关键词：Α地中海贫血PCR产前诊断
- 两种常见葡萄糖－6－磷酸脱氢酶基因突变检测及临床分析被引量：26
- 1995年
- 通过扩增葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）基因第１０，１１，１２，１３外显子６３９ｂｐＤＮＡ片段结合寡核苷酸探针斑点杂交技术，在４０例广西籍Ｃ６ＰＤ缺陷者中检测中国人常见Ｇ６ＰＤ突变ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）和ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）。结果检出ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）男性半合子１２例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）男性半合子１０例，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）女性纯合子１例，ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）和ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）女性双重杂合子１例。ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）突变的频率为３１．０％，ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）突变的频率为３１．０％。ｃＤＮＡ１３７６（Ｇ→Ｔ）和ｃＤＮＡ１３８８（Ｇ→Ａ）两种突变均可导致新生儿高胆红素血症、急性溶血、遗传性非球形细胞性溶血性贫血、无症状基因突变携带者等临床表现。
- 谢建生龙桂芳蒋南华唐智宁林伟雄李卫
- 关键词：基因突变多聚酶链反应G6PD缺乏聚合酶联反应
- 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变与NlaⅢ多态性位点连锁关系研究被引量：6
- 2000年
- 目的 研究葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (G6PD)基因内的特定多态性位点与G6PD缺陷基因突变的连锁关系 ,进一步揭示G6PD缺陷症分子病理学本质及G6PD基因的多态性位点在人类学和人类迁移研究中的意义。方法 应用变性梯度凝胶电泳和DNA点杂交技术检测 5 4例G6PD活性正常男性对照者及 6 6例男性G6PD缺陷者G6PD基因中距离 12外显子上游 13bp处的NlaⅢ多态性位点。结果 在 6 6例G6PD缺陷者中 1376 (G→T)突变 32例、1388(G→A)突变 2 1例、95 (A→G)突变 13例。G6PD活性正常对照者中 ,距离G6PD基因 12外显子上游 13bp处的碱基是T(- 13bpexon12T ,无NlaⅢ内切酶位点 )者共 11例 ,约占 2 0 .4% ;而该位点碱基是C(- 13bpexon12C ,有NlaⅢ内切酶位点 )者共 43例 ,占 79.6 %。 6 6例G6PD缺陷者均与 - 13bpexon12C连锁遗传。结论 G6PD基因突变型 1376 (G→T)、1388(G→A)、95 (A→G)与 - 13bpexon12C连锁遗传是中国人G6PD缺陷症的特征之一。这一特征对于研究G6PD缺陷症复杂的临床表现有一定意义 ,对于人类学研究有参考作用。
- 谢建生龙桂芳唐霞
- 关键词：葡糖磷酸脱氢酶G6PD缺乏症多态现象基因突变
