赵世源
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划转基因生物新品种培育专项植物病虫害生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 新型vip3Aa基因的克隆与杀虫活性的测定被引量:1
- 2012年
- 为了给生物防治提供更多的基因资源,以从黑龙江省分离的100株苏云金芽胞杆菌进行PCRvip3类基因鉴定,对vip3类基因进行克隆表达及生物活性测定,为vip基因储备奠定基础。利用vip3类通用引物进行基因鉴定并进行全长基因克隆表达和生物活性测定。结果表明,菌株LB73经Blast对比后发现含有vip3Aa类基因,克隆基因全长序列为2370bp,编码789个氨基酸残基,分子量为88kD,并在国际基因库GenBank中登记,其登录号为JQ228436,由Btδ-内毒素基因国际命名委员会正式命名为vip3Aa46。构建原核表达系统,并进行杀虫活性的测定。vip3Aa46甜菜夜蛾LC504.02μg/g,棉铃虫LC50387.72μg/g。生测结果表明,vip3Aa46表达的可溶性蛋白对甜菜夜蛾幼虫具有高毒力;对棉铃虫幼虫具有一定毒力。
- 赵世源李海涛张春鸽高继国
- 关键词:营养期杀虫蛋白甜菜夜蛾棉铃虫
- 苏云金芽胞杆菌cry2Ab、cry9Ea基因的表达及活性分析被引量:4
- 2012年
- 旨在为农业害虫防治提供更多的苏云金芽胞杆菌基因资源,从中国吉林市龙潭山土壤样品中分离得到野生菌株命名为Bt LTS-7,扫描电镜显示该菌株产生晶体形状为双锥体和正方体,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示该菌株产生130 kD和71 kD的晶体蛋白,通过PCR鉴定出该菌株中含有cry2Ab和cry9Ea基因,并成功克隆到了这两个新基因,并被Bt国际命名委员会正式命名为cry2Ab28和cry9Ea9,将两个基因分别在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,并进一步对其表达蛋白进行杀虫活性测定。结果显示,Cry2Ab28蛋白对棉铃虫(Helicoverpa armigera)初孵幼虫具有杀虫活性,LC50为32.45μg/mL。Cry9Ea9蛋白对小菜蛾初孵幼虫(Plutella xylostella)具有较高杀虫活性,LC50为0.77μg/mL。
- 李玉红李海涛高继国赵世源张春鸽赵灿
- 关键词:苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白生物活性
- 苏云金芽胞杆菌cry7Ab9基因的克隆与杀虫活性的测定被引量:1
- 2013年
- 以辽宁省千山市的22株苏云金芽胞杆菌进行PCR cry型的cry7类基因鉴定,对cry7类基因进行克隆表达及生物活性测定,为cry基因储备奠定基础.菌株QZG121经比对后发现含有cry7Ab基因.克隆该基因全长序列为3 417 bp,编码1 138个氨基酸残基,相对分子质量为130 000,并在Gene Bank中登记,基因登录号为GU936713,由苏云金芽胞杆菌国际命名委员会正式命名为cry7Ab9.通过构建原核表达系统获得cry7Ab9基因表达蛋白,并进行暗黑鳃金龟幼虫杀虫活性的测定,7天校正死亡率10 mg.L-1为11.11%、100 mg.L-1为25.93%;两周校正死亡率10 mg.L-1为33.33%、100 mg.L-1为48.15%,LC50为289.99 mg.L-1.
- 李海涛曲步云赵世源贾宏博高继国
- 关键词:苏云金芽胞杆菌生物活性
- 苏云金芽胞杆菌cry1Ib6基因的克隆、表达及活性的研究被引量:2
- 2011年
- 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)能产生杀虫晶体蛋白(Insecticida Crystal Proteins,ICPs),对敏感昆虫有强烈毒性,而对高等动物和人无毒性。ICPs由cry或cyt基因编码,根据cry1I型基因设计引物,以Bt LB52菌株的质粒DNA为模板,扩增出了全长为2.1 kb的cry1I基因,其能通过表达载体pEB在大肠杆菌中高效表达为79.9 kDa的蛋白。经过AlginX软件分析该蛋白由712个氨基酸组成,分子量为79.9 kDa,等电点为6.54,为弱酸性蛋白质,NCBI Blast比对该蛋白的氨基酸序列与Cry1Ib3的相似性最高为98%,有12个氨基酸的差异。该基因已在GenBank中注册,登录号为ADK38579,并被国际基因命名委员会正式命名为cry1Ib6。它的表达产物对小菜蛾具有较高的毒力,LC50为1.196μg/mL,为抗虫转基因植物研究提供了新的基因。
- 张庆丽李海涛赵世源刘荣梅赵勇高继国
- 关键词:苏云金芽胞杆菌克隆生物活性