陈源
- 作品数：12 被引量：64H指数：5
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲减影响新生期鼠脑梨状皮质Goα及Gsα的基因表达被引量：1
- 2000年
- 目的研究甲状腺功能低下对新生期鼠脑梨状皮质Goα及GsαmRNA表达的影响。 方法采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术 ,对围生期正常及甲减Wistar大鼠动物模型梨状皮质Goα及GsαmRNA的表达状况进行研究。 结果 14d龄甲减鼠脑梨状皮质GoαmRNA的表达明显升高 ,但其GsαmRNA与对照组无显著差异。结论在鼠脑发育过程中 ,甲状腺激素对梨状皮质Goα基因的表达具有负调作用 。
- 蔡东升陈源陈刚金群燕李果罗敏
- 关键词：甲状腺功能低下原位杂交G蛋白新生鼠
- 甲状腺激素对新生鼠脑NOS基因表达的调节被引量：2
- 2000年
- 目的观察不同日龄新生鼠脑一氧化氮 (NO)含量 ,一氧化氮合酶 (NOS)活性的变化及甲状腺激素对nNOS基因表达的调节。 方法采用丙基硫氧嘧啶 (PTU)灌注孕母鼠造成甲减模型。采用NO、NOS的生化测定法以及半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)。 结果生化测定法显示 ,不同年龄段大鼠随着年龄的增加NO含量上升 (P <0 .0 1) ,NOS的活性上升 (P <0 .0 1) ;同一年龄段仔鼠 ,甲减组较正常组NO含量下降 (P <0 .0 1) ,NOS活性下降 (P <0 .0 1) ;RT -PCR测定显示 ,幼鼠nNOSmRNA水平随着年龄的增加而上升 ;同一年龄组 ,甲减组较正常组nNOSmRNA表达下降。 结论提示甲状腺激素对nNOSmRNA表达有上调作用 ;
- 陈源罗敏蔡东升丁伟陈刚宗阳
- 关键词：甲状腺激素新生鼠脑损害甲状腺机能减退
- IA-2基因的克隆及原核表达研究被引量：1
- 2001年
- 目的 应用基因工程技术获取足量且具有免疫活性的IA 2重组蛋白 ,为建立IA 2抗体检测方法奠定基础。方法 通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA 2胞内结构域的cDNA ,构建表达型重组质粒 ,经DNA序列分析确证后 ,在大肠杆菌中表达 ,用亲和层析纯化融合目的蛋白 ,并以斑点印迹技术 (Dotblot)鉴定其免疫原性。结果 所获特异PCR产物正确重组至PinpointXa 1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约 5 6 0 0 0的融合目的蛋白 ,表达量约 1mg蛋白 /升菌液 ,且表达产物与谷氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血清发生的显色反应差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 原核表达的IA 2融合蛋白具有免疫学活性 ,可用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。
- 宗阳罗敏丁伟金群燕陈源陈刚蔡东升刘优萍谢超
- 关键词：自身抗原基因表达糖尿病DM
- 竞争性RT-PCR在基因表达定量分析中的应用被引量：11
- 2000年
- 目的用竞争性RT -PCR测定鼠脑GoαmRNA水平。 方法通过RT -PCR制备内标和外标 ,将等量内标和倍比稀释的外标作竞争性共扩增 ,得到标准曲线。然后将等量内标与cDNA标本共扩增 ,通过标准曲线求出标本中靶序列的水平。 结果内标和外标在共扩增反应中表现出明显的竞争性。一鼠脑标本GoαmRNA的测定结果为 17.6 2amol/ μg总RNA。 结论竞争性RT -PCR是一种简便、快速、灵敏的测定基因表达 (mRNA)
- 苏青罗敏刘红标陆志强陈源陈家伦
- 关键词：基因表达聚合酶链反应G蛋白MRNART-PCR
- 甲状腺激素对大鼠小脑,海马,嗅脑神经元型一氧化氮合酶基因表达的调节被引量：13
- 2000年
- 目的 观察 15日龄大鼠小脑 ,海马 ,嗅脑一氧化氮 (NO)含量 ,一氧化氮合酶 (NOS)活性的变化及甲状腺激素对上述部位神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)基因表达的调节。方法 采用丙基硫氧嘧啶 (PTU)给孕母鼠灌胃造成仔鼠甲减动物模型 ;采用NO ,NOS生化测定法及nNOSmRNA半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法。结果 无论正常组还是甲减组 ,NO含量 ,NOS活性及nNOSmRNA转录均以小脑为最高 ,嗅脑次之 ,海马最低 (P <0 .0 5 ) ;正常组NO含量 ,NOS活性nNOSmRNA转录均高于甲减组 (P <0 .0 1)。结论 提示甲状腺激素对nNOS基因表达有上调作用 ,NO信号系统可能参与大鼠小脑 ,海马 ,嗅脑等区甲状腺激素缺乏所造成的脑损害过程。
- 罗敏陈源蔡东升陈刚宗阳金群燕
- 关键词：甲状腺激素一氧化氮一氧化氮合酶脑发育
- 围生期甲减对鼠脑Goα基因表达的影响被引量：2
- 2000年
- 目的定量分析甲状腺激素缺乏对围生期大鼠脑GoαmRNA的影响。 方法以PTU溶液灌胃造成大鼠围生期甲减模型 ,部分甲减仔鼠每天腹腔注射T4 2 μg/ 1 0 0 g体重。收集 5、1 5、2 5d的正常、甲减及T4 -替代仔鼠脑组织 ,用竞争性RT -PCR法测定脑GoαmRNA。 结果生后 5、1 5、2 5d的甲减仔鼠脑GoαmRNA水平均较同日龄正常仔鼠明显升高 ,尤以 1 5d时最为显著。T4 -替代可明显减轻这种变化。 结论甲状腺激素对发育期鼠脑Goα基因的表达有下调作用 。
- 苏青罗敏陈源刘红标陆志强陈家伦
- 关键词：甲状腺激素脑发育G蛋白
- 甲状腺激素调控脑发育分子机制的系列研究
- 罗敏苏青蔡东升谢超陈源李果宗阳陈家伦
- 本研究旨在探讨甲状腺激素调控脑发育的分子机制。在国际上首先纯化成大鼠肝核T3受体并制备成功核T3受体单克隆抗体，并阐明核T3受体的器官、组织、细胞的分布和发生规律。首次将DD-PCR技术用于脑甲状腺激素反应基因的研究。首...
- 关键词：
- 关键词：甲状腺激素脑发育分子机制
- 甲低对新生早期大鼠海马及齿状回Goα mRNA的影响被引量：10
- 2001年
- 目的 :研究甲状腺功能低下 (甲减 )对围生早期大鼠海马及齿状回GoαmRNA表达的影响。方法 :采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术 ,观察 7d龄围生期甲减及正常Wistar大鼠海马CA1 4区及齿状回GoαmRNA的表达状况。结果 :7d龄甲减鼠脑海马各区及齿状回GoαmRNA的表达明显高于对照组 ,以CA3、CA4最为显著。结论 :在鼠脑发育过程中 。
- 蔡东升陈源陈刚罗敏
- 关键词：甲状腺功能低下原位杂交
- 非同位素mRNA差异显示方法的建立及应用被引量：13
- 2000年
- 目的建立非同位素mRNA差异显示技术 ,并用以分析鼠脑甲状腺激素的反应基因。 方法用 9-1 0bp的随机但序列确定的引物扩增甲减和正常大鼠脑cDNA ,用PAGE分析PCR产物 ,EB染色 ,切取差异条带 ,再扩增、测序并作同源性分析。 结果得到两个 (2 2 6、2 79bp)受甲状腺激素上调、一个 (2 78bp)受甲状腺激素下调的片段 ,前二者与任何已知基因的同源性都低于 80 % ,提示为两个尚未报道的新基因 ,后者即大鼠G蛋白Go的α亚单位基因。 结论非同位素mRNA差异显示技术是一种快速、简便。
- 苏青罗敏刘红标陆志强陈源陈家伦
- 关键词：聚合酶链反应甲状腺激素非同位素
- 甲状腺激素对新生期大鼠下丘脑Go蛋白α亚单位的影响被引量：4
- 1999年
- 目的 研究新生期Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑Ｇｏ 蛋白α亚单位（Ｇｏα） 的分布及甲状腺激素对其表达的影响。方法 采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术，对新生期正常及甲减Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑ＧｏαｍＲＮＡ 的表达状况进行研究。结果 （１）ＧｏαｍＲＮＡ 主要分布于新生期Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑的弓状核（ＡＲ）、腹内侧核（ＶＭＨ）等部位；（２）２１ 日龄组大鼠下丘脑诸核团ＧｏαｍＲＮＡ 的转录水平明显低于１４ 日龄组；（３） 甲状腺功能低下可引起１４ 日及２１ 日龄大鼠下丘脑ＡＲ、ＶＭＨ 核团ＧｏαｍＲＮＡ水平显著升高。结论 在大鼠下丘脑的发育过程中，信号蛋白Ｇｏα基因呈现特征性分布及表达，甲状腺激素对该基因具有转录下调作用。
- 蔡东升罗敏陈源丁伟陈刚金群燕笪翠娣陈家伦
- 关键词：甲状腺激素原位杂交新生大鼠下丘脑
