陈琛
- 作品数：10 被引量：104H指数：5
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒载体及其研究进展被引量：67
- 2014年
- 慢病毒载体(lentivirus vector,LV)是目前分子及细胞生物实验中非常有效的工具,在基因转染方面有着许多独特的优势,例如,对细胞是否处于有丝分裂期没有特别的要求,基因转染效率高,可容纳较大基因片段等。本文将就慢病毒载体的来源、分子特征及研究进展等进行综述。
- 孟凡荣陈琛万海粟周清华
- 关键词：慢病毒载体RNA干扰
- m^6A RNA甲基化在非小细胞肺癌中的研究进展被引量：8
- 2020年
- m^6A修饰是真核生物mRNA中最丰富的修饰之一,该过程受m^6A甲基转移酶和去甲基化酶的共同调控。m^6A修饰后的RNA能够被m^6A识别蛋白特异性识别并结合,进而介导RNA的剪接、成熟、出核、降解和翻译等。目前国内外对于m^6A修饰及其相关蛋白如何参与非小细胞肺癌发生发展的研究,主要集中于细胞恶性增殖、迁移、侵袭、转移和耐药等方面。m^6A修饰相关蛋白在肺癌组织标本和血液循环肿瘤细胞(circulating tumor cell, CTC)中表达异常,有望成为肺癌诊断和预后判断的潜在分子标志物。本文围绕m^6A修饰相关蛋白的组成、作用方式、在非小细胞肺癌恶性进展中的生物学功能,以及针对m^6A修饰的靶向治疗等方面的研究进展进行综述,旨在为非小细胞肺癌的早期临床诊断和靶向药物的开发提供新思路。
- 潘红丽李雪冰陈琛范亚光周清华
- 关键词：肺肿瘤表观遗传修饰
- 肿瘤相关巨噬细胞促进上皮性卵巢癌迁移和侵袭能力的机制研究被引量：6
- 2020年
- 目的研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)对上皮性卵巢癌迁移和侵袭能力的影响及其可能的调控机制。方法利用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)对小鼠骨髓巨噬细胞进行诱导,使其分化为M2型TAMs;将TAMs与卵巢癌细胞共培养,检测其上皮间质转化(EMT)相关分子的表达;观察卵巢癌细胞局部黏着斑激酶(FAK)和基质金属蛋白酶家族(MMPs)的表达变化情况。结果获得稳定表达的M2型TAMs;将TAMs与卵巢癌细胞共培养后,卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力增强;EMT相关分子E-cadherin表达降低,间质标志蛋白N-cadherin和Vimentin的表达升高;TAMs刺激后卵巢癌细胞的FAK、MMP-2和MMP-9的蛋白表达量明显增加。结论TAMs与上皮性卵巢癌的迁移和侵袭相关,TAMs可能通过调控EMT、FAK及MMPs等的表达促进上皮性卵巢癌的迁移和侵袭。
- 孟凡荣王秀艳陈琛史云芳李晓洲琚端李岩潘红丽李雪冰张颖
- 关键词：肿瘤相关巨噬细胞上皮性卵巢癌上皮间质转化迁移
- 肺腺癌中FAT1的表达及其与免疫细胞浸润关系的研究
- 2024年
- 背景与目的肺癌是癌症相关死亡的主要原因。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌最常见的病理分型,其中又以肺腺癌占比最高。非典型性钙黏蛋白1(FAT atypical cadherin 1,FAT1)是一种受体样蛋白,在肺腺癌中存在高频率突变,其编码的蛋白在细胞黏附、细胞增殖、分化等过程中发挥着重要的作用。本研究旨在研究FAT1在肺腺癌中的表达及与免疫浸润的关系。方法通过下载癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因型-组织表达(Genotype-Tissue Expression,GTEx)相关数据,获得513例肺腺癌样本、397例癌旁样本的基因表达水平及相关临床信息。分析肺腺癌组织中FAT1基因mRNA表达水平以及FAT1基因的表达与肺腺癌患者的预后关系,通过通路富集分析探索FAT1基因调控的相关信号通路。利用免疫蛋白印迹检测FAT1在肺上皮细胞和不同肺癌细胞系中的表达差异,免疫组织化学染色法被用于检测FAT1在肺癌和癌旁组织中的表达。结果14%的肺腺癌患者中存在FAT1基因突变;TCGA数据库数据显示肺腺癌组织中FAT1 mRNA表达显著高于癌旁组织。Kaplan-Meier分析显示FAT1基因表达较高的肺腺癌患者预后较差。通路富集分析表明FAT1与肿瘤发生发展通路相关,且FAT1的表达和免疫细胞浸润密切相关,免疫组化实验证明FAT1在癌组织的表达显著高于癌旁组织。结论肺腺癌组织中FAT1 mRNA呈高表达,高表达的FAT1 mRNA与肺腺癌患者的不良预后相关。FAT1有可能成为潜在的肺癌诊治靶点。
- 丁晨赵文浩黄华李永文张展瑞张芮豪王亚楠吴迪陈琛刘红雨陈军
- 关键词：肺肿瘤预后增殖免疫
- 肺癌患者能参加体育锻炼吗
- 2022年
- 近年来,越来越多的人通过健身增加身体的抗病能力,提高身体各脏器器官的功能,消除人体的疲劳、消除烦恼、促进心情愉悦。那么,肺癌患者也可以参加体育锻炼吗?他们可以有哪些锻炼方式?应该注意些什么呢?
- 陈琛
- 关键词：抗病能力锻炼方式肺癌患者身体
- MicroRNAs与OCT4基因之间的相互作用被引量：7
- 2015年
- OCT4基因是POU转录因子家族中的一员,它能与含八聚体基序(ATGCAAAT)的DNA结合。OCT4是一个关键的转录因子,在未分化胚胎干细胞中参与维持多能性和自我更新性,在许多种癌症包括肺癌、生殖细胞肿瘤、乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、胃癌、肝癌和卵巢癌中过表达。Micro RNAs(mi RNAs)是一种小的非编码RNA,通过和靶基因m RNA碱基配对来调控m RNA表达,降解m RNA或阻碍蛋白合成。一些mi RNAs被证实在癌细胞中调控干细胞因子如OCT4、NANOG、SOX2和KLF4,进而调控癌细胞的增殖、凋亡、分化、抗药性和免疫性。
- 陈琛孟凡荣万海粟周清华
- 关键词：MICRORNASOCT4肿瘤胚胎干细胞多能性
- 在长载体中引入定点突变的方法
- 2014年
- 背景与目的体外基因定点突变是分子生物学实验的常用方法。然而,虽然目前已经报道了多种基因突变的方法,但对于在长的载体序列中引入突变,一般的方法并不太容易实现。方法本研究在我们前期报告的基因突变方法的基础上,描述了一种简单易操作的可在长序列中引入定点突变的方法。这个方法的基本实验程序是:①确定待突变区域,合成一对均含有Type IIs类限制性内切酶位点载体引物,并合成一对互补的突变单链;②在突变区域之外的合适位置上,选择一个桥点,并合成一对均含有Type IIs类的限制性内切酶位点的桥点引物;③利用载体引物序列和桥点引物序列做PCR反应,以扩增载体序列中突变区域外的序列;④利用相应的Type IIs类的限制性内切酶,对以上扩增产物进行酶切;⑤将酶切产物和两个突变单链复性成的突变双链连接,形成突变载体,并转化进受体菌作克隆鉴定。结果为证明我们所报告的方法的有效性,我们在长的载体中进行了测试,结果显示,不但实验操作简单易行,而且突变效率可达到90%以上。结论我们提供了一种有效的在长载体中进行定点突变的方法。
- 孟凡荣陈琛万海粟周清华
- 关键词：定点突变TYPE
- 在基因序列中高效引入多位点突变的方法被引量：1
- 2014年
- 背景与目的在基因序列中引入点突变是研究基因结构和功能及其相关性的重要手段。目前已有多种对基因序列进行突变的方法,然而,这些方法大多对单一位置的基因突变有效,而对在基因序列中引入多位点突变,还有待方法的进一步改进。为适应这一需要,本研究提供了一种高效的可在基因序列的多个位点引入突变的方法。方法该方法依赖于一种Type IIs类的限制性内切酶,例如Esp 3I等。本研究所提供的方法中,针对每一个突变位点,合成一对含有突变点和所选择的Type IIs类的限制性内切酶位点的引物,当需要引入多位点突变时,则利用邻近的两个突变位点的引物做PCR反应,多个位点的突变,就可以得到多个扩增片段,将这些片段用和引物上的限制性内切酶位点对应的酶进行反应,然后用连接反应将片段连接形成突变基因。结果本研究所提供的方法非常简便,主要实验步骤可以在一天之内完成。我们已经利用这种方法,在绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)和nm23基因中,引入3个或4个突变,突变效率几乎为100%。结论本研究所提供的方法可以成为研究基因功能的有用工具。
- 孟凡荣陈琛李永文万海粟周清华
- 基于TCGA数据库的EGFR突变型与野生型肺腺癌患者免疫微环境的差异性分析被引量：5
- 2021年
- 背景与目的肺癌是一种具有高发病率与高死亡率的恶性肿瘤,腺癌是其中一个重要的组织亚型。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变是肺腺癌患者重要的驱动基因。EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)对EGFR敏感突变的患者疗效显著。而免疫治疗作为新兴的治疗却不能使EGFR突变患者获益,其中的机制研究尚不明确,并集中于EGFR与程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)表达之上,而我们推测与两类患者不同的免疫微环境有关。方法从癌症基因组图谱(TheCancerGenome Atlas,TCGA)数据库收集肺腺癌数据集,下载临床信息资料及基因表达谱资料。通过TIMER2.0计算TCGA数据库中免疫相关淋巴细胞浸润情况。并对EGFR突变型与野生型患者进行基因集富集分析。结果临床特征分析显示EGFR突变更频繁发生于女性以及未吸烟患者中。免疫浸润分析显示EGFR突变患者通常具有更高的肿瘤相关成纤维细胞、普通髓系祖细胞、造血干细胞、效应CD4^(+)T细胞、自然杀伤T细胞浸润;具有更低的记忆B细胞、初始B细胞、浆细胞、浆细胞样树突状细胞、记忆CD4^(+)T细胞、CD4^(+)辅助性T细胞2、CD8^(+)T细胞、中心记忆CD8^(+)T细胞、初始CD8^(+)T细胞浸润。我们发现CD8^(^(+))T细胞、自然杀伤T细胞、记忆B细胞和造血干细胞在肿瘤中浸润的程度越高则患者预后越好(Log-rank检验,P=0.017、0.009,3、0.018和0.016)。同时CD4^(+)辅助性T细胞2在肿瘤中浸润的程度越高则患者预后越差(Log-rank检验,P=0.016)。基因集富集分析的结果显示,相比较EGFR野生型肺腺癌患者而言,EGFR突变患者的自然杀伤细胞介导的对肿瘤细胞的免疫应答的正调控、自然杀伤细胞激活参与免疫反应、在自然杀伤细胞介导的对肿瘤细胞的免疫应答这三条与自然杀伤细胞有关的通路上均处于下调状态,而参与免疫应答
- 朱光胜李永文施睿峰徐松林张子禾曹培俊陈琛刘红雨陈军
- 关键词：表皮生长因子受体免疫微环境
- 新一代基因测序技术及其在肿瘤研究中的应用被引量：10
- 2010年
- 基因测序技术的进步,为分子生物学的发展,起到了巨大的推动作用。传统的基因测序技术的重要代表,是所谓的Sanger测序法,这是一种以末端终止法为原理建立起来的技术[1]。20世纪90年代开始启动的人类基因组计划,
- 陈琛万海粟周清华
- 关键词：基因测序技术人类基因组计划肿瘤分子生物学测序法
