陈维贤
- 作品数：104 被引量：403H指数：11
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 丙型肝炎病毒5′非翻译区 DNA 序列在 HepG2细胞中的启动子活性被引量：4
- 2005年
- 目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)基因组5′非翻译区(5′UTR)DNA 序列在 HepG2细胞中 的启动子活性，以了解 HCV 的复制调控机制。方法 分别构建 HCV 基因组5′UTR DNA 正反向序列驱动 虫荧光素酶基因表达的质粒5′UTR-Luc(+)/(-)和5′UTR DNA 序列驱动绿色荧光蛋白基因表达的质粒5′ UTR-EGFP(+)/(-)，分别转染 HepG2细胞，用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶的表达水平，逆转录 聚合酶链反应检测虫荧光素酶基因 m R N A 水平，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白基因的表达水平，并与相应 对照作比较，来证实 HCV 基因组5′UTR DNA 序列的启动子活性。结果 5′UTR-Luc(+)有明显的虫 荧光素酶表达，但比 pGL3 control 表达水平低(Luc/R为0．690±0．086，Luc/RL 为4．210±0．340)，而5 ′UTR-Luc(-)和 pGL3 enhancer 无明显虫荧光素酶表达(Luc/RL 分别为0．095±0．008和0．044±0． 005)；逆转录聚合酶链反应结果与之相符，5′UTR-Luc(+)检测到虫荧光素酶基因 mRNA，而5′UTR- Luc(-)则未检测到。5′UTR-EGFP(+)观察到较强绿色荧光，而5′UTR-EGFP(-)无荧光表达。 结论 HCV 基因组5′U TR DNA 序列具有明显的启动子活性，能启动下游基因的表达，在 HCV 基因组复 制过程中有重要作用。
- 陈维贤张娟黄英张君唐霓黄爱龙
- 关键词：HEPG2细胞
- 一种乙型肝炎病毒转录后调节基序的体外合成方法
- 2005年
- 目的探索T7 RNA聚合酶体外转录方法制备乙型肝炎病毒(HBV)转录后调节基序(HPRE)。方法用聚合酶链反应法从含HBV全基因组的模板中扩增HBV HPRE基因,重组入pGEM-11 zf载体,并用T7 RNA聚合酶对其进行体外转录。结果成功地构建含HPRE基因的重组质粒,并成功地用体外转录方法制备了高纯度的HPRE。结论T7 RNA聚合酶体外转录方法可用于制备高纯度的HPRE,为以后的深入研究奠定了基础。
- 黄英郭进军张君陈维贤黄爱龙
- 关键词：肝炎病毒乙型体外转录转录后调节基序RNA聚合酶
- 重庆地区骨质疏松患者25-羟维生素D与骨代谢的相关性分析被引量：5
- 2017年
- 目的对25-羟维生素D和甲状旁腺激素(PTH)、N端骨钙素(N-MID)、降钙素(CT)、骨碱性磷酸酶(BALP)的相关性进行统计学分析,并探讨其在临床疾病的诊断、预防及治疗中的应用价值。方法收集2014年1-9月重庆医科大学附属第二医院住院患者411例,其中女316例,男95例;平均(69.29±12.21)岁。采用免疫电化学发光法检测住院患者25-羟维生素D、PTH、N-MID、CT、BALP的水平,探讨骨质疏松患者25-羟维生素D与骨代谢标志物的关系。结果25-羟维生素D与PTH、BALP均呈负相关关系(P<0.05),而与CT、N-MID则无显著相关(P>0.05)。回归分析显示,25-羟维生素D与骨代谢标志物回归方程为Y=19.02-0.066PTH-0.09BALP。结论骨质疏松患者25-羟维生素D水平的升高、降低与PTH、BALP均有一定相关性,通过对这些指标的检测,可以为临床骨质疏松患者的诊断、预防和控制提供基础数据。
- 周华赵清谢念伶陈维贤
- 关键词：骨质疏松25-羟维生素D骨代谢
- CysC和RBP水平评价血清肌酐参考范围的截断值研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨血清胱抑素C(CysC)和视黄醇结合蛋白(RBP)水平评价血清肌酐(Scr)参考范围调整的临床价值。方法对重庆医科大学附属第二医院2017年12月21日至2018年4月25日体检中心20 126例病例Scr测定情况进行回顾性分析,1 874例同时有Scr和CysC结果,对372例按照WS/T 404参考区间(新参考区间)Scr升高但无CysC结果的样本重新测定CysC和RBP。结果新参考区间更加适用于临床95%置信区间。采用CysC升高为评价肾损伤的参考方法,以新参考区间为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=198.648,P=0.000);以132.3μmol/L(旧参考区间上限)为截断值时,Scr阳性与CysC阳性差异有统计学意义(χ^2=82.337,P=0.000)。以新参考区间为截断值的Scr与CysC的相关性较旧参考区间更好。当Scr>108μmol/L时,RBP才出现升高,存在正相关。结论新参考区间的截断值更加有助于临床辅助诊断。
- 蒋慧晖张帆满雪芹燕玲李庆琳李慧陈维贤周华
- 关键词：肌酸酐半胱氨酸蛋白酶抑制剂
- 医学检验本科实习带教工作体会被引量：5
- 2011年
- 医学检验本科生的临床实习是学校教育的深化和延续，是理论到实践的必由之路，也是学生向医务工作者角色转化的重要阶段。带教工作是培养医学检验实习生独立工作能力、综合动手能力的第一步。临床实习的目的就是将医学检验基础理论与临床实践能力融为一体，
- 王玎陈维贤
- 关键词：医科
- 临床微生物带教实践总结被引量：1
- 2014年
- 临床微生物学是一门对专业知识和实践技能都具有较高要求的专业学科。如何提高微生物教学质量和效果,需要带教教师在教学实践中不断总结、归纳适合于自己的教学方法。本微生物室通过几年的教学实践,总结了自己独有的一套思路及方法。
- 张秀瑜王云英陈维贤
- 关键词：微生物教学
- 带GFP的启动子鉴定质粒的构建及在HCV启动子鉴定中的应用
- 2005年
- 目的:利用已有质粒构建带GFP报告基因的启动子鉴定质粒,并用此质粒鉴定丙型肝炎病毒5非翻译区(HCV 5'- UTR)启动基因表达的活性。方法:用限制性内切酶将质粒pEGFP-N1上的EGFP基因片断切下,与用相同酶切去除荧光素酶基因片断的PGL3 enhancer质粒大片断连接,得到带GFP的启动子鉴定质粒pEGFP enhancer HCV 5’-UTR片断用PCR方法获得,插入pEGFP enhancer的多克隆区,构建HCV 5’-UTR驱动GFP表达质粒。应用脂质体转染技术转染HepG2细胞并观察荧光。结果:成功构建带GFP报告基因的启动子鉴定质粒,并在此基础上构建了HCV 5’-UTR启动GFP表达的质粒。前者转染HepG2细胞后,几乎无GFP表达,而后者观察到较强的绿色荧光。结论:该实验构建的带GFP报告基因的启动子鉴定质粒本底表达低,可用于真核启动子的鉴定。HCV 5’-UTR可以启动报告基因的表达。
- 陈维贤张君张娟张秉祥唐霓黄爱龙
- 关键词：启动子丙型肝炎病毒绿色荧光蛋白
- 菌悬液直接进行聚合酶链反应快速检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究
- 2004年
- 目的：对不提染色体DNA用菌悬液直接进行PCR扩增检测mecA基因诊断耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)方法的可靠性和临床实用性进行评估。方法:对临床分离的215株葡萄球菌分别进行提取染色体DNA后PCR和不提DNA直接PCR检测mecA基因并比较其结果，同时测定其灵敏度。结果:215株葡萄球菌中mecA基因阳性为120株，占55．8％，两种方法结果一致。最低检出浓度为2．5×10^5CFU／mL。结论:不提染色体DNA直接PCR检测mecA基因是检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的可靠而实用的方法，更简单快速且成本更低。
- 陈维贤张莉萍李兴禄叶耀红黄长武吴倩
- 关键词：聚合酶链反应甲氧西林葡萄球菌MECA基因
- SARS冠状病毒N蛋白的真核细胞定位研究
- 2005年
- 目的:为进一步探讨SARS-CoV核衣壳蛋白(N蛋白)在病毒复制及细胞通路中的作用,观察了核衣壳蛋白不同区段在细胞内的定位。方法:应用核定位序列分析软件分析N蛋白序列,找出其中的核定位信号序列;构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与SARS-CoV不同长度核衣壳蛋白区段融合表达的pEGFP-C1重组载体,对293细胞进行瞬时转染,在荧光显微镜下观察核衣壳蛋白不同区段在细胞内的定位。结果:不同的核定位信号分析软件分析的结果不同,Prosite找到的核定位信号位于N蛋白第373-389或374-390aa,而PredietNLS server找到的核定位信号位于N蛋白第36-44aa;全长核衣壳蛋白及第161-422aa区段均定位于细胞质,第1-187aa区段定位于细胞质和细胞核。结论:SARS-CoV核衣壳蛋白的核定位信号可能位于N蛋白第36-44aa。
- 陶鹏陈维贤郭进军黄爱龙
- 关键词：核衣壳蛋白细胞定位
- 临床免疫检验实习生带教工作体会被引量：3
- 2012年
- 医学检验本科生的临床实习是学校教学的延伸,是理论到实践的必经之路[1]。临床免疫检验实习是医学检验专业本科生实习内容的重要组成部分之一。本文就本科室在临床免疫检验实习带教中的一些体会进行总结,报道如下。1重视岗前培训学生到科室以后,由组长先对其介绍本科室的规章制度、
- 王玎陈维贤
- 关键词：临床免疫检验实习生带教
