项小琼
- 作品数：8 被引量：51H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- α粒子诱发BEP2D细胞转化过程中肺癌相关基因表达的cDNA Microarray研究
- 目的:探讨辐射诱发人支气管上皮细胞(BEP2D)转化过程中肺癌相关基因的表达.方法:用Cartesian PixSys5500 cDNA Microarray点样仪将60个肺癌相关基因以微阵列形式点布于醛基化的玻璃片上....
- 范保星张开泰李刚谢玲马淑华葛世丽项小琼胡迎春王升启周平坤吴德昌
- 文献传递
- BEP2D细胞恶性转化不同时期差异表达基因的筛选
- 2003年
- 目的 筛选并鉴定α粒子辐射诱发永生化人支气管上皮细胞 (BEP2D)恶性转化不同时期差异表达的基因。方法 抑制消减杂交 (SSH) ,cDNA芯片。结果 利用SSH构建了BEP2D细胞 3个恶性转化不同时期差异表达基因的文库 ,BEP2D细胞的文库有 4 16个克隆 ,R15H2 0细胞的文库有 30 1个克隆 ,R15H35细胞的文库有 5 86个克隆 ,经cDNAMicroarray验证发现 :BEP2D细胞文库来源的芯片与 3代细胞探针杂交后的阳性信号率为 90 4 %、2 1 6 %和 19 7% ;R15H2 0细胞文库来源的芯片的阳性信号率为 8 6 %、93 8%和 31 6 % :R15H35细胞文库来源的芯片的阳性信号率为 2 3 5 %、18 2 %和 90 7%。结论 联合应用SSH和cDNAMicroarray是筛选和鉴定不同样本中差异表达基因的快速和有效方法 ;经cDNAMicroarray鉴定出的 3个文库中差异表达的cDNA可能代表了α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化相关的基因。
- 范保星张开泰孙敬芬项小琼谢玲胡迎春王升启吴德昌
- 关键词：表达基因抑制消减杂交永生化人支气管上皮细胞癌症
- 肺癌诊断基因的初步筛选被引量：4
- 2002年
- 目的 筛选肺癌细胞恶性转化不同时期差异表达的基因,以期用于肺癌的诊断。方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)、测序、cDNA芯片(cDNA Microarry)、northern blot。结果 利用SSH建立了永生化人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化不同时期差异表达基因的cDNA文库,其中,A消减文库(BEP2D细胞的cDNA为tester,α粒子照射BEP2D细胞后35代恶性转化细胞R15Hp35的cDNA为driver)有416个克隆,B消减文库(α粒子照射BEP2D细胞后20代转化细胞R15Hp20的cDNA为tester,BEP2D和R15Hp35细胞的cDNA混合后为driver)有301个克隆,C消减文库(R15Hp35细胞的cDNA为tester,BEP2D细胞的cDNA为driver)有586个克隆。对文库中107个克隆单向测序发现:19个克隆在GenBank中没有查到对应的同源序列,其它88个克隆共代表了76个不同的已知基因。然后,将3个文库中全部克隆的cDNA制作成cDNA芯片,用该芯片筛选了15例肺癌组织、5例肺癌旁组织和其他8种癌组织(肝癌、胃癌、食管癌、乳腺癌、白血病、子宫内膜癌、脑神经角质瘤和结肠癌)中mRNA的表达差异。结果,获得肺癌组织高于肺癌旁组织表达的cDNA 26个,肺癌旁组织高于肺癌组织表达的31个,2者高于其他8种癌组织的分别为:肺癌旁组织中63个,肺癌组织中87个。将这208个具较大差异表达的基因重新制作成cDNA芯片,
- 范保星笪冀平张开泰谢玲项小琼王升启吴德昌
- 关键词：肺癌基因CDNA芯片BEP2D细胞
- 双向电泳和肽质量指纹谱技术鉴定支气管上皮细胞恶性转化相关蛋白质ANX1-human被引量：35
- 2000年
- 采用 2 - D PAGE及质谱技术对α粒子照射诱发人支气管上皮恶性转化细胞的不同阶段进行了比较蛋白组分析与鉴定 .2 - D电泳后在分子量 1 4.4～ 94k D,等电点 3～ 1 0范围内分离出约 1 1 0 0个不同蛋白质斑点 .对等电点约 7,分子量约 40 k D的蛋白质点进行了质谱分析 .鉴定出分子量为38.58k D、等电点 6.64的蛋白质 ANX1 - human(脂皮质蛋白 ,lipocortin ) ,并且发现该蛋白质在BEP2 D细胞恶性转化过程的不同时期存在差异表达 .提示蛋白质 ANX1 - human参与了支气管上皮细胞恶性转化过程 ,与细胞恶性转化相关 .
- 谢玲应万涛张开泰项小琼钱小红王玉芝吴德昌
- 关键词：双向电泳肽质量指纹谱BEP2D细胞蛋白质
- α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化不同时期差异表达基因cDNA文库的构建被引量：8
- 2002年
- 目的 :建立α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化不同时期差异表达基因的文库。方法 :抑制消减杂交法 (SSH)。 结果 :建立了 3个人支气管上皮细胞恶性转化不同时期差异表达基因的cDNA文库。其中 ,A差减文库 (永生化人支气管上皮细胞BEP2D的cDNA为tester,α粒子照射BEP2D细胞后 35代恶性转化细胞R15Hp35的cDNA为driver)有 416个克隆 ,B差减文库 (α粒子照射BEP2D细胞后 2 0代转化细胞R15Hp2 0的cDNA为tester,BEP2D和R15Hp35细胞的cDNA混合后为driver)有 30 1个克隆 ,C差减文库 (R15Hp35细胞的cDNA为tester,BEP2D细胞的cDNA为driver)有 5 86个克隆。,对文库中 70个cDNA克隆单向测序后发现 :6 1个cDNA为己知基因 ,9个cDNA在GenBank中无法查到对应的同源序列 ,可能代表了新基因。结论 :3个差减文库的cDNA可能代表了α粒子诱发人支气管上皮细胞恶性转化不同时期差异表达的基因 ,此为进一步研究α粒子诱导肺癌发生的分子机制奠定了基础。
- 范保星张开泰谢玲项小琼吴德昌
- 关键词：Α粒子差异表达基因抑制消减杂交BEP2D细胞
- 人支气管上皮细胞恶性转化差异表达基因的cDNA文库及与肺癌病变相关的克隆
- 本发明的名称为人支气管上皮细胞恶性转化差异表达基因的cDNA文库及与肺癌病变相关的克隆，涉及基因的cDNA文库及与病变相关的克隆。本发明的目的是利用辐射诱发的人支气管上皮细胞体外恶性转化实验模型，构建细胞恶性转化不同时期...
- 吴德昌范保星李刚张开泰楼铁柱葛世丽周平坤谢玲孙敬芬胡迎春项小琼
- 文献传递
- α粒子诱发BEP2D细胞转化过程中肺癌相关基因表达的cDNA Microarray研究
- 范保星张开泰李刚谢玲马淑华葛世丽项小琼胡迎春王升启周平坤吴德昌
- 文献传递
- α粒子诱发BEP2D细胞转化过程中肺癌相关基因表达的cDNA Microarray研究被引量：5
- 2001年
- 目的：探讨辐射诱发人支气管上皮细胞(BEP2D)转化过程中肺癌相关基因的表达。方法：用Cartesian PixSys5500 cDNA Microarray点样仪将60个肺癌相关基因以微阵列形式点布于醛基化的玻璃片上。提取α离子辐射前BEP2D细胞（原代）和α粒子辐射后20代、35代细胞总RNA，经长片段反转录和线性扩增标记成荧光探针后与微阵列中cDNA进行杂交。结果：原代细胞中检测到40个基因表达；20代检测到47个基因表达；35代检测到20个基因表达。所检测的基因中，抑癌基因的mRNA丰度在原代和20代后细胞中急剧下降；大多数癌基因的表达丰度在20代以后细胞中仅轻微下降；生长因子类基因大都在20代细胞表达。结论：在辐射诱发的人支气管上皮转化细胞中，抑癌基因的失活可能与细胞恶化有关；癌基因及生长因子类基因可能促进了细胞的转化。
- 范保星张开泰李刚谢玲马淑华葛世丽项小琼胡迎春王升启周平坤吴德昌
- 关键词：MICROARRAYBEP2D细胞肺癌
