马春树
- 作品数：13 被引量：57H指数：5
- 供职机构：北京大学基础医学院生理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金教育部科学技术研究重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤转移相关基因TMSG-1编码蛋白的定位被引量：9
- 2002年
- 目的 明确肿瘤转移相关基因TMSG 1编码蛋白在细胞内的定位。方法 计算机分析TMSG 1的跨膜区 ,构建GFP与TMSG 1融合蛋白表达载体pEGFP C1 TMSG 1,以LipofectAMINE介导转染人前列腺癌细胞PC 3M 1E8,荧光显微镜与共聚焦显微镜下观察。结果 计算机分析表明所示 ,TMSG 1有四个跨膜区 (aa33～ 4 8,aa6 4～ 79,aa114～ 130 ,aa15 8～ 174 ) ,推测其为跨膜蛋白。PSORTⅡ软件分析TMSG 1蛋白定位于胞浆 (可靠性 94 .1% ) ,具体位置为内质网 6 6 .7%、线粒体 11.1%、质膜 11.1%、高尔基体 11.1%。显微镜下观察TMSG 1 GFP融合蛋白表达于胞浆 ,呈不均匀的颗粒状、环状分布 ;而对照的GFP蛋白则在胞核和胞浆呈弥漫性分布。结论 TMSG 1蛋白定位于细胞内膜系统 ;利用GFP进行的亚细胞定位具有精确、快速、可重复等优点 ,是研究基因与蛋白定位的有效方法。
- 马春树由江峰郑杰王洁良崔湘琳吴秉铨
- 关键词：肿瘤转移绿色荧光蛋白
- 实验性体内外胸腺细胞凋亡的超微结构研究被引量：3
- 1999年
- 目的对糖皮质激素诱导的大鼠体内、外胸腺细胞凋亡进行系统超微结构观察。方法在培养的胸腺细胞中加入糖皮质激素，分别作扫描和透射电镜观察；对大鼠进行腹腔内氢化可的松注射，对胸腺组织进行透射电镜观察。结果胸腺细胞显示了细胞凋亡各阶段的超微结构改变。结论糖皮质激素诱导胸腺细胞发生凋亡，体外培养细胞出现典型的凋亡小体，而组织内主要改变是凋亡细胞或凋亡小体被上皮性网状细胞或巨噬细胞吞噬、降解。
- 姜叙城吴平平朱平马春树赵瑞波
- 关键词：胸腺细胞细胞凋亡超微结构
- 胸腺凋亡细胞DNA裂解的TUNEL原位标记被引量：1
- 1998年
- 运用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT介导的荧光素 dUTP 缺口末端标记法(TUENL对糖皮质激素诱导的实验性胸腺细胞凋亡的组织切片进行标记,选择性地显示了凋亡细胞,表明 TUNEL 可在细胞水平对组织切片中的凋亡进行检测。对细胞凋亡的判定,需结合细胞的形态结构特点,与坏死进行鉴别。
- 傅爱芬姜叙诚杜心垿陆良勇赵瑞波马春树
- 关键词：胸腺细胞细胞凋亡TUNEL原位标记
- 反义VEGF基因及内皮抑素基因转染对人巨细胞肺癌生物学行为的影响被引量：6
- 2001年
- 目的 探讨反义VEGF基因和内皮抑素基因联合转染在抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长转移中的作用。方法 反义VEGF12 1cDNA脂质体法转染人肺巨细胞癌细胞 (PG AS VEGF) ,先行转基因细胞裸鼠异种移植 ,之后电脉冲介导PsectagA 内皮抑素基因转染 ,观察反义VEGF基因和内皮抑素转染对肿瘤血管生成和肿瘤生长转移的调节作用。结果 肿瘤内微血管密度在PG AS VEGF、转染空载体组分别为 40 .6 7± 9.35和5 8.34± 10 .5 2 (P <0 .0 5 ) ;裸鼠体内接种PG AS VEGF细胞后 18天 ,PG AS VEGF、转染空载体组肿瘤体积分别为 (0 .9779± 0 .2 42 1)和 (1.5 2 10± 0 .415 0 )cm3(P <0 .0 5 ) ;PG AS VEGF、转染空载体组淋巴结转移率分别为16 .7% (2 /12 )和 5 0 % (6 /12 ) (P <0 .0 5 )。在肿瘤局部行PsectagA 内皮抑素基因转染的PG AS VEGF瘤 ,当肿瘤生长到 2 1天时 ,肿瘤生长受到明显抑制 ,PsectagA 内皮抑素基因转染组与PsectagA空载体转染组肿瘤体积分别为 (1.5 889± 1.1396 )和 (3 .398± 2 .6 42 )cm3(P <0 .0 5 ) ;两者肿瘤淋巴结转移率分别为 12 .5 % (1/8)和 75 %(6 /8) (P <0 .0 5 )。结论 内皮抑素基因转染对反义VEGF基因转染的PG细胞裸鼠体内生长和淋巴结自发性转移有协同抑制作用。
- 吴晓郑杰朱建健付坚马春树由江峰崔湘琳王洁良方伟岗周爱儒汤健吴秉铨
- 关键词：肺肿瘤血管内皮生长因子内皮抑素基因转染
- 糖皮质激素诱导体内外胸腺细胞凋亡及超微结构研究
- 细胞凋亡(apoptosis)是一种生理或病理性的程序性细胞死亡,是生物体内细胞死亡的基本形式之一,与坏死(necrosis)在发生机理和形态特点等方面均有明显不同.近年的研究表明,细胞凋亡与许多疾病有密切关系.为了对细...
- 马春树
- 关键词：细胞凋亡胸腺细胞超微结构
- TMSG-1基因转染对肿瘤转移表型的影响被引量：10
- 2003年
- 目的 :研究肿瘤转移抑制基因TMSG 1对肿瘤转移表型的影响。方法 :将含TMSG 1全长开放阅读框架的 1.5kbcDNA克隆于 pcDNA3,构建正义及反义TMSG 1cDNA真核表达载体 ,以脂质体转染人肺巨细胞癌PG的高转移亚系BE1,挑选G4 18抗性克隆 ,RT PCR检测正义或反义TMSG 1cDNA在转染细胞中的表达 ,进行转染细胞体外肿瘤生物学行为检测。结果 :RT PCR显示正义TMSG 1cDNA转染的BE1细胞 (BE1 S)中TMSG 1表达明显高于BE1及空载体对照细胞 ,反义TMSG 1cDNA转染细胞 (BE1 AS)中TMSG 1表达低于空载体对照细胞。与BE1及空载体对照细胞 (BE1 V)相比 ,BE1 AS细胞体外生长较快 ,软琼脂克隆形成能力明显增强 ;而BE1 S细胞体外生长能力没有显著改变 ,但其穿越Matrigel的能力及软琼脂克隆形成能力明显减弱。流式细胞仪分析结果显示BE1 S的G0 、G1期的细胞较BE1 V细胞比例增多 ,并且BE1 S出现了细胞凋亡峰。结论 :实验结果表明反义TMSG 1基因转染可增强BE1细胞的体外生长、体外侵袭能力及克隆形成能力。而正义TMSG 1基因转染则使BE1细胞的侵袭能力及软琼脂克隆形成能力减弱 ,而对细胞体外生长能力无明显影响。结论支持TMSG
- 边巴马春树由江峰宁钧宇方伟岗郑杰
- 关键词：肿瘤转移表型病理生理学
- 糖皮质激素诱导的体外胸腺细胞凋亡模型的建立被引量：2
- 1996年
- 在体外培养的大鼠胸腺细胞中加入糖皮质激素,孵育后进行光镜、扫描和透射电镜观察。经激素作用的胸腺细胞发生胞浆和胞核的浓缩,染色质的凝集与裂解和凋亡小体形成等一系列改变,表明了凋亡的形成。
- 马春树姜叙诚李仁班翔朱平宋雁南张雅坤
- 关键词：胸腺细胞细胞凋亡糖皮质激素超微结构
- TMSG-1基因功能的初步研究被引量：2
- 2003年
- TMSG-1是用mRNA差异显示技术克隆的转移相关基因,它在高转移肿瘤细胞系和有转移的肿瘤组织中表达下降。以高转移的前列腺癌细胞系PC-3M-1E8为受体细胞,通过基因转染技术观察了TMSG-1基因表达对细胞V-ATPase活性、细胞内pH值和细胞凋亡情况的影响,同时利用GFP对TMSG-1细胞内定位进行了分析。结果表明,V-ATPase在PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系的活性无明显差异。在转染正义TMSG-1的细胞系中,V-ATPase的活性比PC-3M-1E8细胞系,转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系均有明显增高(P
- 马春树宁钧宇由江峰柳林郑杰方伟刚王洁良崔湘琳吴秉铨
- 关键词：前列腺癌MRNA差异显示基因转染基因表达PH值
- 胸腺细胞凋亡的电镜观察和DNA裂解原位标记被引量：1
- 1998年
- 目的：观察胸腺细胞凋亡的超微结构及其与ＤＮＡ裂解的相互关系。方法：对大鼠进行腹腔内糖皮质激素注射，对胸腺进行光、电镜观察，并作ＴｄＴ介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴｄＴ－ｍｅｄｉａｔｅｄ－ｄＵＴＰｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＴＵＮＥＬ）。结果：皮质胸腺细胞出现凋亡的超微结构改变，少数细胞出现管网状结构。ＴＵＮＥＬ可标记不同阶段的凋亡细胞。结论：糖皮质激素可引起胸腺皮质细胞凋亡，上皮性网状细胞对凋亡细胞具有活跃的吞噬和降解作用。ＴＵＮＥＬ可选择性标记石蜡切片中的凋亡细胞。
- 姜叙诚朱平朱平马春树傅爱芬赵瑞波
- 关键词：胸腺细胞超微结构细胞凋亡原位标记
- 应用mRNA差异显示技术克隆肿瘤转移相关基因TMSG-1被引量：25
- 2002年
- 应用mRNA差异显示技术,对比研究前列腺癌细胞系PC-3M具有不同转移潜能的亚系,克隆差异表达片段,经Northern杂交验证其在不同转移潜能的人类肿瘤细胞系中的表达差异,测序,EST拼接获得cDNA全长序外,RT-PCR验证拼接结果并重复测序再次证实.结果显示,TMSG-1在前列腺癌细胞系PC-3M不转移亚系2B4高表达,而在高转移亚系1E8低表达,二者差异显著.TMSG-1cDNA全长序列2kb,开放读码框编码含230aa的蛋白质,GenBank Blastn检索与已知基因无显著同源性.对TMSG-1所编码的氨基酸序列进行功能预测提示:TMSG-1是一个跨膜蛋白,有3个跨膜区、3个蛋白激酶C磷酸化位点、2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和1个N末端肉豆蔻酸酰化位点.在6种人类常见肿瘤组织中,RT-PCR结果显示TMSG-1在前列腺癌中表达最强,肺癌转移灶较肺癌原发灶表达显著降低,低分化结肠癌较高分化结肠癌表达显著降低,在复发性乳腺癌、卵巢癌、低分化胰腺癌（均无转移）中均有表达.9例胃癌原发灶标本中,TMSG-1与β-actin RT-PCR扩增产物的灰度扫描（CNT×mm2）比值显示:TMSG-1在已发生转移的胃癌标本中的表达与无转移的胃癌标本相比有下降的趋势,t检验显示其差异有显著性（P<0.05）.结果表明,TMSG-1基因表达水平的降低与肿瘤转移潜能的提高具有相关性.
- 马春树刘宇欣郑杰方伟刚由江峰王洁良崔湘琳吴秉铨
- 关键词：MRNA差异显示技术前列腺癌肿瘤转移相关基因基因克隆
