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黄利华

作品数：66 被引量：152H指数：6
供职机构：中南大学湘雅三医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学一般工业技术农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 53篇期刊文章
  • 13篇会议论文

领域

  • 53篇医药卫生
  • 3篇生物学
  • 2篇一般工业技术
  • 1篇农业科学
  • 1篇理学

主题

  • 29篇细胞
  • 16篇基因
  • 14篇蛋白
  • 14篇多态
  • 13篇多态性
  • 13篇川崎
  • 13篇川崎病
  • 10篇基因多态性
  • 10篇HELA细胞
  • 9篇位点
  • 9篇病毒
  • 8篇柯萨奇
  • 8篇柯萨奇病毒
  • 6篇胰腺
  • 6篇位点多态性
  • 6篇柯萨奇病毒B...
  • 6篇冠状
  • 5篇动脉
  • 5篇心肌
  • 5篇柯萨奇病毒B...

机构

  • 65篇中南大学湘雅...
  • 9篇中南大学
  • 2篇常德市第一人...
  • 1篇北京大学第一...
  • 1篇湖南省人民医...
  • 1篇浙江医院
  • 1篇湖南省儿童医...
  • 1篇海口市人民医...
  • 1篇岳阳市第二人...
  • 1篇湖南中医药大...
  • 1篇昆明医科大学
  • 1篇澳门镜湖医院

作者

  • 66篇黄利华
  • 25篇杨作成
  • 16篇邢晓为
  • 15篇李卓颖
  • 10篇田朗
  • 8篇袁洪
  • 8篇余枭
  • 7篇江杰
  • 7篇余灿
  • 7篇伍勇
  • 6篇李欣
  • 6篇黄志军
  • 6篇闾宏伟
  • 5篇朱咏贵
  • 5篇陈佳
  • 5篇成亮
  • 5篇杨丽
  • 5篇朱红伟
  • 4篇陈淳媛
  • 4篇李霞

传媒

  • 6篇中南大学学报...
  • 4篇湖南师范大学...
  • 3篇中国现代医学...
  • 3篇中华医学会第...
  • 2篇中国临床药理...
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  • 2篇中国动脉硬化...
  • 2篇临床检验杂志
  • 2篇中华实验外科...
  • 2篇生物工程学报
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  • 2篇南方医科大学...
  • 2篇中华胰腺病杂...
  • 2篇Transa...
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  • 1篇生命科学研究
  • 1篇中国老年学杂...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中国药学杂志

年份

  • 1篇2024
  • 1篇2023
  • 2篇2022
  • 1篇2021
  • 1篇2020
  • 2篇2019
  • 5篇2018
  • 3篇2017
  • 4篇2016
  • 5篇2015
  • 6篇2014
  • 17篇2013
  • 8篇2012
  • 5篇2011
  • 5篇2010
共 66 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
类风湿关节炎患者外周血白细胞介素-32的表达和临床意义研究
检测类风湿关节炎(RA)患者外周血白细胞介素(IL)-32、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达水平,同时分析其与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)和DAS28的关系,初步探讨IL-32在RA的...
桂明张浩黄利华李英李杨
人睾丸蛋白SPAG4L与KASH结构域蛋白Nesprin-3的相互作用
2017年
目的探讨含SUN(Sad,UNC-84)结构域的人睾丸蛋白SPAG4L(sperm-associated antigen 4 like)与具有KASH(Klarsicht,ANC-1 and Syne homology)结构域的核膜血影重复蛋白3(nuclear envelop spectrin repeat proteins 3,Nesprin-3)之间的相互作用。方法用生物信息学方法对SPAG4L蛋白进行分析,通过体外转染实验,观察SPAG4L的亚细胞定位;并用免疫荧光技术、免疫共沉淀和双分子荧光互补实验检测SPAG4L是否与KASH结构域蛋白Nesprin-3存在相互作用。结果生物信息学分析结果表明,SPAG4L蛋白具有跨膜结构;亚细胞定位结果发现,SPAG4L蛋白定位于核膜和胞浆;免疫荧光、免疫共沉淀和双分子荧光互补实验结果表明,SPAG4L蛋白与Nesprin-3蛋白质相互作用,形成LINC(linkers of the nucleoskeleton to the cytoskeleton)复合物。结论 SPAG4L与Nesprin-3能够相互作用,形成LINC复合物,对了解SPAG4L蛋白在精子发生中的作用具有重要的意义。
任瑶伍勇黄利华邢晓为
关键词：相互作用精子发生
小鼠高迁移率族蛋白B1基因短发卡RNA的构建及干扰效果检测
2015年
目的 构建有效靶向小鼠高迁移率族蛋白B1 （HMGB1）基因的短发卡RNA（shRNA）载体.方法 针对小鼠HMGB1序列设计4条HMGB1干扰序列的shRNA载体：pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4以及与哺乳动物基因组无同源性序列的shRNA作为对照（NC）组,Xho Ⅰ酶切鉴定其序列.然后利用质粒转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测干扰效率.结果 经酶切凝胶电泳证实shRNA构建正确;质粒筛选结果表明,转染48h后,pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4及NC组的荧光表达率为85％、78％、75％、70％、60％;FQ-PCR显示pYr-1.1-musHMGB1-sh1～4组及NC组转染Hepal-6细胞48h后相对表达量分别为0.52±0.05、0.59±0.08、0.61±0.08、0.57±0.21、1.02±0.21.结论 成功构建表达靶向HMGB1的4条shRNA重组质粒载体,其中pYr-1.1-musHMGB1-sh1质粒对HMGB1基因的抑制作用最强,为研究HMGB1的功能提供实验基础.
朱红伟李志强黄利华余枭
关键词：高迁移率族蛋白B1RNA干扰
SOD1真核表达载体的构建及表达被引量：1
2010年
目的:构建人铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)基因真核表达载体,并在HeLa细胞中进行表达。方法:应用RT-PCR从人外周血中扩增SOD1基因开放阅读框(ORF),采用TA克隆技术,将目的片段插入到pUCm-T载体中进行鉴定,重组的质粒命名为pUCm-T-SOD1。随后,将SOD1进一步克隆到真核表达载体pTracer-CMV/Bsd中。用脂质体将经过测序、验证的重组pTracer-CMV/Bsd-SOD1质粒转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,转染HeLa细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选4周,用RT-PCR、Western blot检测SOD1的表达。结果:成功构建了pTracer-CMV/Bsd-SOD1真核表达质粒,转染HeLa细胞,发现转染成功的细胞均发绿色荧光;RT-PCR及Western blot检测结果表明,所转染的SOD1在HeLa细胞中成功表达。结论:成功构建了能够同时表达绿色荧光蛋白和SOD1的真核表达质粒pTracer-CMV/Bsd-SOD1,为进一步研究SOD1在基因治疗中的作用奠定了基础。
吴雄辉孙虹邢晓为黄利华
关键词：铜锌超氧化物歧化酶基因转染基因表达基因治疗
十六烷基三甲基溴化铵修饰的单壁碳纳米管和寡核苷酸的结合及细胞毒性(英文)被引量：2
2011年
应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为表面活性剂修饰单壁碳纳米管,研究CTAB修饰后的单壁碳纳米管的分散情况和表面电荷情况;观察在场发射扫描电子显微镜和透射电子显微镜下的形貌,同时还研究CTAB修饰后的单壁碳纳米管与小干扰RNA结合的最佳浓度配比,以及CTAB功能修饰后的碳纳米管对培养的人脐静脉内皮细胞的毒性。结果表明:CTAB修饰后的单壁碳纳米管分散良好,CTAB吸附到单根或成束的碳纳米管管壁上,表面带正电荷;与带负电荷的寡核苷酸分子小干扰RNA可以结合,并且CTAB-SWNT与小干扰RNA结合比例达到1:1.5到1:2之间时基本饱和;缺乏CTAB的单壁碳纳米管不能结合小干扰RNA;没有分散的单壁碳纳米管具有更大的细胞毒性,CTAB可以改善SWNTs的分散性,从而减轻单壁碳纳米管的细胞毒性。
阎雪彬谷永红黄东甘丽邬力翔黄利华陈哲东黄苏萍周科朝
关键词：寡核苷酸细胞毒性
自噬与高迁移率族蛋白B1在急性胰腺炎损伤中的作用
2012年
急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是临床上常见急腹症之一,其中重型急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)一直是临床上治疗的难点和挑战。虽然近年随着对重型急性胰腺炎发病机制的进一步认识,以及'个体化治疗方案'和'综合治疗体系'的应用使得重型急性胰腺炎生存率明显提高,
余灿黄利华余枭
关键词：重型急性胰腺炎自噬胰蛋白酶原胰腺腺泡细胞雨蛙肽溶酶体酶
中国儿童内皮细胞蛋白C受体基因多态性与川崎病易感性的关系（英文）被引量：5
2019年
目的:调查中国儿童人群内皮细胞蛋白C受体(endothelial protein C receptor,EPCR)基因的单核苷酸多态性是否与川崎病(Kawasaki disease,KD)相关。方法:招募103名KD患者(其中23名患者出现冠状动脉病变)和158名对照组。选择EPCR基因的7个标记单核苷酸多态性(rs6088738,rs2069940,rs2069945,rs2069952,rs867186,rs9574和rs1415774)进行TaqMan等位基因鉴别分析。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测53名KD和52名健康儿童血浆可溶性EPCR(soluble EPCR,sEPCR)水平。结果:rs2069952,rs9574,rs1415774与KD的发生显著相关,但与冠状动脉病变的发生无关。具有rs2069952,rs9574,rs1415774和rs2069945单核苷酸多态性的男性比女性具有更大的KD风险。KD患儿血浆sEPCR水平不能预测冠状动脉病变的形成,而KD患者rs867186等位基因G与血浆sEPCR水平升高有关。结论:中国汉族儿童EPCR的单核苷酸多态性与KD易感性有关。
李卓颖江杰黄利华戴红梅陈佳蔡骞杨作成
关键词：川崎病内皮细胞蛋白C受体冠状动脉病变
带Myc、His标签的SPAG4L真核表达载体的构建与表达被引量：4
2013年
为了获得带有His、Myc双标签的SPAG4L蛋白,建立能够稳定表达该蛋白的细胞系,本研究利用PCR技术从人睾丸cDNA中扩增SPAG4L开放阅读框,构建到pcDNA3.1(+)myc-his真核表达载体中进行测序和双酶切验证。将pcDNA3.1/myc-His(-)A/SPAG4L质粒和空白载体分别转染HeLa细胞,G418筛选后建立稳定转染细胞系。用Western blotting和免疫荧光技术对新建立的稳定转染细胞系进行检测。结果表明,成功扩增了SPAG4L基因,构建到pcDNA3.1/myc-His(-)A真核表达载体后,经酶切和测序验证所插入的SPAG4L序列完全正确;pcDNA3.1/myc-His(-)A/SPAG4L转染HeLa细胞后,经G418筛选后建立了稳定转染细胞系。Western blotting检测后发现,新建立的细胞系能够正确表达SPAG4L及其标签蛋白,进一步的免疫荧光实验发现,SPAG4L能够和内质网标签蛋白PDI共定位。研究结果所提供的稳定转染细胞系将为下一步进行免疫共沉淀和pull-down实验提供了有力的工具。
陈颜亮郑治王剑龙周晓哲李艳杨梦黄利华邢晓为
关键词：标签转染真核表达蛋白功能
TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响
2012年
目的：构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型，然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823，SGC7901，MGC803中的表达，筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA1～3，将其分别转染至目标胃癌细胞系中，应用rea1．timePCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA，最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响，通过Transwe11小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果：与GES．1比较，TRAF1基因在BGC823，SGC7901，MGC803中的表达均有上调（P〈O．05），其中以BGC823表达最高；3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有抑制作用，以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强；干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱，凋亡明显增加，但对其迁移功能无明显影响。结论：TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显；pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达；TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。
王芬杨燕冯茜步光奎黄利华闾宏伟郭勤徐灿霞沈守荣
关键词：TRAF1胃癌细胞系
miR-181a基因rs77418916位点多态性与川崎病的关联性研究被引量：2
2021年
目的:观察miR-181a基因rs77418916位点多态性与川崎病(KD)及其并发冠状动脉损伤(CAL)的关联性。方法:选取100名KD患儿和100名健康儿童外周血标本,提取DNA,使用聚合酶链反应-直接测序法(PCR-SBT)技术检测miR-181a基因rs77418916位点的多态性。结果:miR-181a基因rs77418916位点的AA、AT、TT基因型分布和A、T等位基因频率在KD组与对照组间,及川崎病合并冠状动脉损伤组(KD-CAL)组与川崎病无冠状动脉损伤组(KD-NCAL)组间的差异无统计学意义。结论:miR-181a基因rs77418916位点多态性与KD发病及其CAL的发生均无明显关联性。
姚美清余梦吴吉平黄利华杨作成
关键词：川崎病基因多态性
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