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刘晋纬
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1
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供职机构:
首都医科大学附属北京朝阳医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
肖白
首都医科大学附属北京朝阳医院
陈文明
首都医科大学附属北京朝阳医院
王璞
首都师范大学生命科学学院
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首都医科大学附属北京朝阳医院
刘敬忠
首都医科大学附属北京朝阳医院
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2008
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基因工程苯丙氨酸解氨酶对多发性骨髓瘤U266细胞的作用研究
2008年
目的为寻找对多发性骨髓瘤新的治疗方法,从基因工程乳酸乳球菌提纯苯丙氨酸解氨酶(PAL),探讨PAL酶对多发性骨髓瘤U266细胞系的影响作用。方法利用已构建成功的高表达PAL的基因工程乳酸乳球菌,结合物理、化学、生物学等方法,设计一种简便、高效提纯PAL酶的方法。培养人多发性骨髓瘤U266细胞系,在不同浓度基因工程PAL酶作用后,以MTT法检测细胞增生;流式细胞仪检测细胞凋亡;HPLC检测细胞培养液中苯丙氨酸(phe)浓度。结果①用本研究所设计方法从基因工程乳酸乳球菌NZ3900/pNZ8149-pal^art中提取的PAL酶比活性可达同量原菌的92.5%;②0.1~2.0U/ml的PAL提取液作用24h后能显著抑制U266细胞生长,并呈剂量依赖性;③只添加提取过程所用试剂的对照组细胞生长无明显抑制;④0.1U/ml、0.2U/ml、2.0U/ml的PAL酶作用24h后的MM细胞早期凋亡率分别为(21.92±0.95)%、(50.64±0.86)%、(90.86±2.91)%;⑤PAL酶作用24h后细胞培养液中phe浓度随PAL酶活性增加而降低。结论本研究所设计方法可从基因工程乳酸菌高效提取PAL酶;提取过程中的添加试剂对MM细胞生长无明显抑制作用;PAL酶能显著抑制MM细胞体外生长,诱导细胞早期凋亡;PAL酶可降低培养液中的phe水平,且phe浓度与MM细胞生长的抑制作用具有相关性。
陈星
王璞
刘晋纬
肖白
陈文明
刘敬忠
关键词:
苯丙氨酸解氨酶
基因工程
多发性骨髓瘤
凋亡
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