刘静宇
- 作品数：30 被引量：145H指数：7
- 供职机构：广东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：广东出入境检验检疫局科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学农业科学更多>>
- 环介导等温扩增法检测转基因玉米MIR604被引量：3
- 2012年
- 根据转基因玉米品系MIR604外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系MIR604的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价,评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。
- 凌莉刘津易敏英吴少云蔡颖刘静宇高东微李志勇
- 关键词：环介导等温扩增
- 对食品中分离的金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型研究被引量：1
- 2012年
- 目的:对来自湛江的食品样本中分离的16株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统对16株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将16株金黄色葡萄球菌分为9个型别,其中P1型包含菌株0902和0901;P2型包含0971、0923、0967、09108菌株;P3型包含菌株0969、0970、10010;P4型包含菌株09118和09119。其余5株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:DiversiLab分型结果准确揭示了16株食品中金黄色葡萄球菌的遗传特征和亲缘关系;Diversilab自动化分型技术方便快捷、结果可靠,是监测分析食源性致病菌和对食源性疾病溯源及预警的有力工具。
- 刘静宇凌莉陈春梅易敏英胡科峰
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 用DiversiLab系统对食品中分离的金黄色葡萄球菌进行分型溯源研究被引量：2
- 2012年
- 目的:对分离自食品样本中的44株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布,为食源性疾病溯源及预警提供依据。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增广泛分布于金黄色葡萄球菌基因组中的重复序列,并在Agilent2100自动生物分析仪上对扩增产物进行微流体电泳分离,然后使用DiversiLabSoftware软件实时分析和处理数据,对44株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将44株金黄色葡萄球菌分为26个型别,其中P1型包含菌株n76、n78和n71;P2型包含z78、z60和g75菌株;P3型包含菌株n61、z77、g31;P4型包含菌株0868和10786;P5型包含菌株6’-3600和13-3462;菌株1167、11219和z12属于P6型;菌株n73和n75属于P7型;菌株1151和11059为P8型;菌株3-1154和0979为P9型;菌株11-2063和6-1310为P10型;P11型包含菌株z67、z63、z64、z61和z36;其余15株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:DiversiLab分型结果准确揭示了44株来自食品的金黄色葡萄球菌的遗传特征和亲缘关系;Diversilab自动化分型技术方便快捷、结果可靠,是监测分析食源性致病菌和对食源性疾病溯源及预警的有力工具。
- 刘静宇凌莉陈思强焦红邓翼惠易敏英
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 沙拉沙星体外诱导鼠伤寒沙门菌耐药实验
- 2012年
- 目的为获得体外鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)对盐酸沙拉沙星(sarafloxacin hydrochloride)的活性耐药菌株,研究诱导其产生耐药的盐酸沙拉沙星最低浓度,为评价食品中沙拉沙星残留导致的微生物耐药提供依据。方法设置盐酸沙拉沙星0.001、0.002 5、0.005、0.025、0.05、0.1μg/ml实验组和空白对照组、NaOH溶剂对照组,采用NCCLS法测试最小抑菌浓度,对鼠伤寒沙门菌进行耐药诱导,耐药判断为≥8×MIC(0.25μg/ml)。对产生耐药的鼠伤寒沙门菌的gyrA基因片段进行PCR扩增,焦磷酸凝胶测序法鉴定gyrA基因常见5个位点观察突变。结果盐酸沙拉沙星在0.005μg/ml水平传到第10代时,MIC增大32倍,抑菌浓度增加到1μg/ml,耐药菌增殖停止;传到第25代时,鼠伤寒沙门菌gyrA基因Ser83位点发生突变,获得多株稳定、有生物活性的耐药菌株。沙拉沙星浓度≥0.025μg/ml时,细菌不生长;沙拉沙星浓度≤0.002 5μg/ml时细菌生长,不产生耐药。结论沙拉沙星浓度为0.005μg/ml时可体外诱导鼠伤寒沙门菌产生耐药,经传代后获得具生物活性的耐药菌株。
- 任美玲焦红刘静宇易敏英许龙岩程树军
- 关键词：体外诱导耐药性鼠伤寒沙门菌沙拉沙星食源性致病菌
- 浅谈能力验证活动对实验室能力建设的作用和意义
- 能力验证是评价实验室技术能力的有效手段,也是实验室进行质量控制的重要环节.能力验证结果可用于实验室内部质量管理，检测人员技术能力考核，建立新的检测方法，检测设备的验证和核查，参加能力验证/比对活动有助于提升客户对实验室出...
- 席静张思群刘静宇陈文锐
- 关键词：食品实验室
- 文献传递
- 进出口食品中沙门氏菌PFGE分型及耐药研究被引量：6
- 2010年
- 目的：研究进出口食品中分离的沙门氏菌（SA）分子型别和耐药情况。方法：用限制性内切酶XbaⅠ酶切SA染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）实验,用BioNumerics软件分析菌株之间的相似度。用Vitek 2进行药敏实验,分析SA耐药情况。结果：24株SA分成22个PFGE型。SA2和SA11之间相似度100%,鼠伤寒SA之间的相似度62.1%～90.3%。药敏实验结果显示5株鼠伤寒SA共有4种耐药谱,部分菌株对青霉素类、呋喃类、氨基糖苷类、磺胺类耐药。结论：进出口食品中分离的SA表现出较大的遗传多样性,但部分菌株有相关性。
- 许龙岩袁慕云刘静宇赵贵明邹志飞张旺阳静焦红
- 关键词：沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分子分型食品耐药
- Caco-2细胞与肠道菌共培养初建体外肠道共生模型被引量：5
- 2012年
- 【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21 d体外培养构建Caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门菌组、混合菌群-沙门菌组4组,制备混悬液,各组分别单独和混合培养4 h,荧光定量PCR法测试共培养前后各菌16SrDNA菌量变化,电阻仪测试跨膜上皮电阻(TEER)数量;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1变化,评价三维肠上皮屏障功能的改变。【结果】在体外共培养模型内,4种肠道菌混合培养4 h后同单独培养组间比较,细菌量增长无统计学差异(P>0.05));需氧菌的增长速度明显高于厌氧菌(P<0.01),厌氧菌:需氧菌浓度比接近100∶1,厌氧菌仍为优势菌。TEER和ZO-1免疫荧光染色结果均提示混合肠道菌群对Caco-2细胞三维肠上皮无明显破坏,侵入性沙门氏菌可显著降低TEER值,并观察到模型的ZO-1结构受到破坏。这种破坏作用在混合肠道菌群加沙门菌群组较轻。【结论】Caco-2细胞三维肠上皮同乳双歧杆菌、植物乳酸杆菌、大肠杆菌和粪肠球菌组成的混合菌群体外共培养能建立稳定的体外肠上皮模型,并具有生物学活性;正常肠道菌群对侵入性沙门菌有拮抗作用。该模型可进一步完善作为食源性抗菌药、耐药菌与肠道系统相互作用研究模型的基础。
- 陈晓清焦红程树军易敏英刘静宇许龙岩刘超
- 关键词：CACO-2细胞RDNA
- 速冻水饺中金黄色葡萄球菌的DiversiLab分型研究被引量：1
- 2012年
- 目的:对速冻水饺中分离的20株金黄色葡萄球菌进行DiversiLab分型,研究其基因特征和聚类分布。方法:采用DiversiLab自动分型系统扩增金黄色葡萄球菌基因组中广泛分布的重复序列,然后在Agilent2100自动生物分析仪上对扩增片段进行微流体电泳分离,并使用DiversiLab Software软件实时分析和处理数据,对20株金黄色葡萄球菌进行分子分型。结果:DiversiLab分型系统将20株金黄色葡萄球菌分为13个型别,其中P1型包含菌株L17、L14、L11,P2型包含L16、L12、L19、L4菌株,P3型包含菌株L3、L18、L13,其余10株金黄色葡萄球菌的每一个菌株被分为一个单独的型别。结论:20株金黄色葡萄球菌从基因型来看有一定的聚集性,可能来自相近的污染源。同时也有一些金黄色葡萄球菌菌株之间的基因型差异较大,遗传学上关系较远,可能来自不同的污染途经。Diversilab自动化分型技术方便快捷,是监控食品及其生产企业细菌性污染的有力工具。
- 刘静宇郑晶凌莉易敏英袁慕云席静
- 关键词：金黄色葡萄球菌
- 转基因玉米Bt176品系特异性环介导等温扩增检测方法的研究被引量：7
- 2013年
- 根据转基因玉米品系Bt176外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系Bt176的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价。评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。
- 凌莉刘静宇易敏英吴少云刘津蔡颖李志勇高东微
- 关键词：环介导等温扩增
- 阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型及耐药研究被引量：11
- 2010年
- 目的:研究北京、新疆、广东、辽宁等地和新西兰、美国、印度进口食品中分离的阪崎肠杆菌(ES)分子型别和耐药情况。方法:用限制性内切酶XbaⅠ酶切ES染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验,用BioNumerics软件对不同地区分离的ES进行比对,分析菌株之间的相似度。用Vitek2进行药敏实验,分析ES耐药情况。结果:38株ES(其中ES12为标准菌株)分成37个PFGE型,相似度在25%～100%,未表现出优势带型和地区特异性,而部分食品被遗传紧密相关的ES克隆株污染。药敏实验结果显示37株ES共有9种耐药谱,部分菌株对呋喃类、头孢类、β-内酰胺类耐药。结论:建立的PFGE方法可应用于ES的分子分型和溯源。
- 许龙岩袁慕云刘静宇赵贵明邹志飞阳静焦红
- 关键词：阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分子分型耐药
